To understand the distribution of Giardia cysts in drinking water supplies in Seoul, Korea, we collected water samples quarterly at 6 intakes in the Han River, its largest stream and 6 conventional water treatment plants (WTPs) serving drinking water, from 2000 to 2009. Giardia cysts in each of 10 L water were confirmed in 35.0% of intake water samples and the arithmetic mean was 1.65 cysts/10 L (range 0-35 cysts/10 L). The lowest cyst density was observed at Paldang and Kangbuk intakes, and the pollution level was higher at 4 intakes downstream. It seemed that these 4 intakes were under influence of Wangsuk stream at the end of which cysts were found in all samples with the mean of 140 cysts/10 L. The annual mean number of cysts was 0.21-4.21 cysts/10 L, and the cyst level at the second half of the 10 years was about 1/5 of that at first half on average. The cysts were more frequently found in winter, and their mean density was 3.74 cysts/10 L in winter and 0.80-1.08 cysts/10 L in other seasons. All finished water samples collected at 6 WTPs were negative for Giardia in each of 100 L sample for 10 years and cyst removal by physical process was average 2.9-log. It was concluded that conventional water treatment at 6 WTPs of Seoul appears to remove the cysts effectively under the present level of their source water. Domestic wastewater from the urban region could be an important source of Giardia pollution in the river.
Giardia lamblia, a waterborne parasitic protozoa causing diarrhea and gastroenteritis, is transmitted to humans from untreated and treated water in the form of cysts. The ingestion of G. lamblia cysts is followed by the excystation of the cysts to trophozoites and subsequent colonization of the upper small intestine. In this study, the in vitro conditions for upper small intestine. In this study, the in vitro conditions for G. lamblia encystation were investigated to enhance the efficiency of cyst conversion and the resulting cyst density. The trophozoite of G. lamblia was cultivated to the late exponential growth phase, resulting in a high density of over $6{\times}10^7{\;}cells/ml$. The effects of pH, bile content, and induction time were evaluated; A cyst conversion of over 25% and 107 time were evaluated; A cyst conversion of over 25% and 107 cysts/ml were routinely obtained using the optimized encystation conditions including a slightly slkaline pH, 10 to 15 mg/ml of bile concentration, and 48-50 h of induction time.
The standard procedure outlined by the United States Environmental Protection Agency (US EPA) in Method 1623 for analyzing Giardia lamblia cysts and Cryptosporidium parvum oocysts in water samples consists of filtration, elution, centrifugal concentration, immunomagnetic separation (IMS), and immunofluorescence assay (IFA) followed by microscopic examination. In this study, the extent of (oo)cyst loss in each step of this procedure was evaluated by comparing recovery yields in segmented analyses: (i) IMS + IFA, (ii) concentration + IMS + IFA, and (iii) filtration/elution + concentration + IMS + IFA. The complete (oo)cyst recovery by the full procedure was $52{\sim}57%$. The (oo) cyst loss in the IMS step was only $0{\sim}6%$, implying that IMS is a fairly reliable method for (oo)cyst purification. Centrifugal concentration of the eluted sample and pellet collection before IMS resulted in a loss of $8{\sim}14%$ of the (oo)cysts. The largest (oo)cyst loss occurred in the elution step, with $68{\sim}71%$ of the total loss. The permeated loss of (oo)cysts was negligible during filtration of the water sample with a $1.0-{\mu}m$ pore polyethersulfone (PES) capsule. These results demonstrated that the largest fraction of (oo)cyst loss in this procedure occurred due to poor elution from the filter matrix. Improvements in the elution methodology are therefore required to enhance the overall recovery yield and the reliability of the detection of these parasitic protozoa.
Giardia lamblia, a human pathogen causing outbreaks of diarrhea, recently became a focus of great concerns in the fields of both medical and environmental microbioloty. To develop the experimental tools to study giardiasis, encystation, one of the major processes in its life cycle, was reconstituted by inducing an axenic culture of a flagellated form of G. lamblia into a cyst from under high concentration of bile and alkaline pH condition. The successful induction was confirmed by Northern analysis of resulting increased expression of the CWPl gene encoding the cyst wall protein 1. An examination of the encystation process with SEM (scanning electron microscopy) and TEM (transmission electron microscopy) revealed that the trophozoite, a flagellate with a bilateral symmetry, was transformed to a cyst form with an oval-shape and defined filamentous wall. The encystation was found to cause a disappearance of the flagella and an invagination of the adhesive disc. An extensive formation of rER (rough endoplasmic reticulum) was observed after 24h of induction, indication an active synthesis and export of proteins during this process. The vital staining of the invitro-induced systs showed that most cysts maintained their viability.
The protozoan parasite Giardia lamblia has been implicated as the causative agents of many outbreaks of waterborne intestinal illness. Accurate evaluation of Giardia lamblia removal in water treatment process requires a reliable method for measuring the concentrations of these pathogens in water. The relative recovery of Giardia cysts was assessed for seeded samples of distilled water. Cysts preparation was done by encystment in vitro. Membrane filtration was evaulated with cellulose acetate, polycarbonate, polypropylene, polyethersulfone, nylon membranes. Elution conditions were varied to improve cyst recovery.
Giardia lamblia is a parasitic protozoa which is transmitted in the form of a cyst through untreated water and also treated drinking water. Since its presence in water has led to frequent outbreaks of giardiasis and death in many countries, the removal and disinfection of this protozoan cyst from the water supply are of great concern for public health. This study examined the disinfection characteristics of G. lamblia cysts isolated from a Korean patient with giardiasis. When using sodium hypochlorite including 5 or 10 ppm chlorine, the killing rate was initially rapid, however, the disinfection slowed down and a 3log reduction could not be achieved even after 2h. The disinfection effectiveness was also reduced at a lower temperature, thereby implying that the risk o a giardiasis outbreak will be higher in the winter season. A CT (concentration$.$time) curve was constructed based on the results with sodium hypochlorite for use in designing and predicting disinfection performance. The organic chlorination disinfectant SDIS (sodium dichloroisocyanurate) produced a lower pH and a much higher residual effect than sodium hypochlorite. The disinfection of cysts by SDIC continued steadily throughout 2h of contact, although the initial killing rate was lower than that with sodium hypochlorite.
Cyclospora cayetanensis is an agent of emerging infectious disease, and a recognized cause of diarrhea in some patients. Also, the flagellated protozoan, Giardia intestinalis, induces a diarrheal illness of the small intestine. Cases of cyclosporiasis are frequently missed, primarily due to the fact that the parasite can be quite difficult to detect in human fecal samples, despite an increasing amount of data regarding this parasite. On the other hand, G. intestinalis can be readily recognized via the microscopic visualization of its trophozoite or cyst forms in stained preparations or unstained wet mounts. In this report, we describe an uncommon case of co-infection with G. intestinalis and C. cayetanensis in an immunocompetent patient with prolonged diarrhea, living in a non-tropical region of Turkey.
The present study has been designed as a basic study on laboratory diagnosis of giardiasis and to demonstrate a more effective method for the detection of Giardia lamblia cyst with the inherent advantages of minimizing both the number of stool examinations required and the interval of stool collections for estimating the real state of prevalence in the shortest time possible. There were 3 subject groups of 75 children each currently residing in an orphanage in Gunsan city, Jeonbuk province from which stool specimens were collected every day, every other day, and every 3 days. The procedure is as follows: 1) resuspend the InKed sample after fixation with SAF solution 2) centrifuge the sediment for 1 min. at 2, 000 rpm after straining through gauze into a tube 3) divide the sediment into 3 parts and use them for direct fecal smear, formalin-ether concentration (MGL) and zinc sulfate ($ZnSO_4$) floatation techniques. The results are summarized as follows: 1. Overall infection rate after 10 trials showed a 60% positive indication. The positive rate among children under 4 years old was significantly higher than the rate in children over 4 years old. No significant difference in rate by sex was observed. 2. The results of eBaminations by direct fecal smear and MGL techniques appeared more accurate than that obtained by $ZnSO_4$ ftoatation method as indicated by a higher positive rate. Of all three methods concerned, combinations of two demonstrated a higher positive rate than that shown by any one alone. 3. In three consecutive examinations under varying conditions such as different days, the cyst detection rate by MGL technique indicated 83%. In 5 examinations under the same varying conditions, the indicated rate was 94%. 4. The interval of stool collection proved to be insignificant for the cyst detection rate. In conclusion, both MGL method and modified fecal direct smear can provide a good cyst detection rate of G. lamblia provided that more than 3 consecutive examinations of stool under varying conditions are carried out.
병원성 원생동물인 지아디아 람블리아는 수인성 질병을 야기하는 주요 원인이 되고 있다. 본 연구는 PCR 및 RT-PCR 기법을 적용하여 한강본류 하천수 시료에서 사람감염성 종인 지아디아 람블리아를 동정하고, 활성 여부를 판별하여 현 표준시험방법을 보완하고자 하였다. PCR과 RT-PCR에는 지아디아의 복부 흡반 구성 유전자를 증폭하는 giardin primer를 사용하였으며, DNA/RNA 추출 및 PCR/RT-PCR 과정에서의 민감도 검사를 수행한 결과, 1포낭까지 검출가능한 것으로 나타났다. 또한 한강본류 및 유입지천 시료 48점에 적용하여 면역형광항체법과 PCR 및 RT-PCR 방법을 비교하였다. 면역형광항체법을 이용한 현미경관찰 결과 48개 시료의 지아디아 총포낭수의 평균 농도는 6.3 cysts/10 L이었고 양성율은 62.5%였으며, 속빈 포낭을 제외한 지아디아의 평균 농도는 4.5 cysts/10 L이었고 양성율은 52.1%였다. PCR 수행결과 48개 시료 중 24개(50%)의 시료에서 지아디아 람볼리아가 검출되었으며, RT-PCR 수행결과 10개(21%) 시료가 살아있는 G. lamblia를 포함한 것으로 나타났다. 본 연구를 통해 PCR/RT-PCR 기법이 지아디아 포낭을 저농도로 포함하고 있는 하천수 시료에 적용가능하며 원생동물 표준시험방법을 보완하여 종(species) 및 활성에 대한 정보를 제공할 수 있을 것으로 결과되었다.
Giardia lamblia is a pathogenic flagellate causing intestinal disorders such as diarrhea, abdominal pain and malabsorption of nutrients. Giardia is mainly infected by the ingestion of contaminated foods per os. Craun (1979) has recently reported that mass infection of this flagellate through the contaminated water supply systems is one of public health hazards. Also, so-called traveller's diarrhea is sometimes caused by Giardia infection (CDC, U.S.A., 1971). However, a few epidemiological studies figuring out the mode of infection or control measures of Giardia infection has been done so far in Korea. The present study was aimed to know the prevalence of Giardia infection in several Korean populations, detectability of this flagellate in water systems and the viability of the cysts against sewages and disinfectants applying to drinking water. In the present study, 388 stool specimens from orphanage children in Chun-joo, Chung-joo, On-yang and Chun-an areas and 538 stool specimens from inhabitants in Woo-do, In-chon, and Chun-joo were examined by formalin-ether concentration technique to detect out Giardia cysts. On the other hand, water samples from 14 sites of Han River and its tributaries were collected in May through July, 1984. Fifty liter of water sample in each sampling site was then filtered through water filtering system deviced by U.S. Environmental Proutection Agency and the sediments rinsed out from the thread rolls, a part of water filtering system, were examined to detect out the Giardia cysts. In order to observe the viability of Giardia cysts in the sewage samples, the cysts were treated in it at $4^{\circ}C$ or $25^{\circ}C$ for 7 through 28 days. For this purpose, the cysts were also exposed to various concentrations of disinfectants such as chlorine, iodine and ozone gas for proper time intervals. After treatment, the viability test of the Giardia cysts were carried out by method of Rice and Schaefer (1981) with minor modification. The results obtained in this study were as follows : 1) The detection rates of G lamblia cysts in the stool specimens were 18.3% in orphans and 4.3% in general examinees. 2) The prevalences of Giardia Infection were higher in the young age groups than in-adults. The highest positive rate was 18.4% in the age group less than 10. 3) Of 14 water specimens sampled from Han River system and its tributaries around the Seoul area, the Giardia cysts were detected from 4 samples, and no cyst was found in the water supply systems. 4) The cysts treated in the sewage survived for 28 days at $4^{\circ}C$ and for 13 days at $25^{\circ}C$. 5) The cysts were completely destroyed within 60 minutes by exposure to 8 mg/l of residual chlorine at 4g and within 30 minutes by exposure to the same concentration of chlorine at $25^{\circ}C$. 6) The cysts were all dead when exposed to 1 mg/1 of iodine for 60 minutes at $4^{\circ}C$ or $25^{\circ}C$. 7) The cysts were destroyed after 10 minute exposure in 0.15 mg to 0.25mg of residual ozone gas per liter. Summarizing the above results, it is considered that Giardia infection is regarded as water-borne disease and the cysts are able to be controlled by the application with the disinfectants in the water supply systems.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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