인삼 (Panax ginseng C.A. Meyer)은 우리나라의 전통약재로 수 세기 동안 사용되어 왔으며, 약효 및 성분에 대한 연구가 매우 활발하게 이루어져 왔으나, 인삼의 분자생물학적, 단백질 화학적 측면에서 생리연구는 매우 미미하였다. 본 연구에서는 프로테옴믹스를 이용한 인삼 단백질 군을 연구하기 위한 첫 단계로 인삼 (천풍)및 모상근의 단백질 추출 방법을 확립하고, 이차원 전기영동을 통하여 추출방법의 유용성을 확인하였다. Homogenizer와 황산암모늄 침전을 통한 단백질 추출과 액체질소 및 TCA를 이용한 단백질 추출 방법을 수행하여 비교해 본 결과 추출 단백질 양에는 큰 차이가 없으나 이차원 전기영동 수행 시 액체질소 및 TCA를 통한 방법이 프로테옴 연구에 적합하여 훨씬 해상도가 높은 gel 이미지를 얻었을 뿐 아니라, gel당 660개 이상의 단백질 sopt을 확인하였다. 또한 인삼과 모상근의 이차원 전기영동을 비교한 결과 상당히 다른 발현 패턴을 보여, 생장조건 등 외부 환경과 생리상태의 차이에 따라, 같은 유전자를 가지고 있는 조직체라 할지라도, 매우 다른 프로테옴 (proteome)을 보일 수 있음을 보여주었다.
Human genomic Deoxyribonucleic acid(DNA) was extracted from teeth by boiling, salting-out, phenol, boiling-phenol methods. The author compared DNA concentration and its purity, the accuracy of sex determination and the results of the D1S80 locus detection among above 4 methods. The following results were obtained : 1. DNA concentration was the highest in pulp with salting-out method and DNA purity was higher in pulp with salting-out and phenol methods than other 2 methods. 2. Sex determination was possible using of the pulp and the dentin of the teeth with four methods but, it was impossible in the enamel and some pulp with boiling method. 3. Amplification of D1S80 locus occurred from pulp and dentin with salting-out, phenol, and boiling-phenol methods. 4. There are no differences among the amplification of X-Y homologus amelogenin gene by application of 4 methods and salting-out, phenol methods efficiently makes available to amplification of D1S80 locus. From the investigation DNA extraction, sex determination, amplification of D1S80 locus was successfully accomplished with salting-out, phenol, boiling-phenol methods Therefore above 3 methods are available and applicable as forensic odontology for individual identification.
The common DNA extraction methods are indispensable for genotyping by molecular marker analysis. However, genotyping a large number of plants is painstaking. A modified 'NaOH-Tris' method used in this study reduces the extraction time while keeping the cost low and avoiding the use of hazardous chemicals. The endpoint analysis by realtime PCR tends to be fast and effective for the development of SNP markers linked to the 'Chunpoong' cultivar of Panax ginseng. The 'Chunpoong' marker was developed by a major latex-like protein gene sequence. From our results, we suggest that this method is successful in distinguishing 'Chunpoong' from a large number of ginseng cultivars.
본 논문에서는 급격히 증가하는 생의학 분야 비정형 텍스트에서 핵심적 내용을 추출할 수 있는 기계학습 기반 정보 추출시스템을 구축하기 위한 언어자원 수집 및 통합적 구조화 방안을 제안한다. 제안된 방법은 정보 추출 시스템을 크게 개체명 인식과 개체명 간 관계 추출 시스템으로 구분하고, 각각의 시스템에 적합한 학습데이터를 구성하기 위해 생의학 분야 개체명 사전과 학습 집합을 수집한다. 그리고 수집된 해당 자원들의 특성을 분석하여 개체 구별을 위해 필수적으로 포함시켜야 할 항목들을 도출하고 이를 통해 시스템 학습과정에서 사용될 학습 데이터를 구성하기 위한 항목을 선정한다. 이와 같이 선정된 학습데이터의 구성 내용에 따라 수집된 자원들을 가공하여 학습 데이터를 구축한다. 본 연구에서는 생의학 분야의 하위 분야인 유전자, 단백질, 질병, 약물 4개 분야에 대한 개체명 사전과 학습 집합을 수집하여 각각을 학습 데이터로 구축하였으며, 개체명 사전을 통해 구축된 개체명 인식용 학습 데이터를 대상으로 개체명 수용 범위를 측정하기 위한 검증 과정을 수행하였다.
The aim of this study was to identify strain KCOM 1265 isolated from subgingival plaque at the species level by comparing 16S ribosomal RNA gene (16S rDNA) and genome sequences. The whole genome of strain KCOM 1265 was extracted using the phenol-chloroform extraction method. 16S rDNA was amplified using polymerase chain reaction and sequenced using the dideoxy chain termination method. Pairwise genome comparison was performed using average nucleotide identity (ANI) and genome-to-genome distance (GGD) analyses. The data showed that the percent similarity of 16S rDNA sequence of strain KCOM 1265 was 99.6% as compared with those of Fusobacterium polymorphum ATCC 10953T and Fusobacterium hwasookii KCOM 1249T. The ANI values of strain KCOM 1265 with F. polymorphum ATCC 10953T and F. hwasookii KCOM 1249T were 95.8% and 93.0%, respectively. The GGD values of strain KCOM 1265 with F. polymorphum ATCC 10953T and F. hwasookii KCOM 1249T were 63.9% and 49.6%, respectively. These results indicate that strain KCOM 1265 belongs to F. polymorphum.
국내에서 시판되는 감자와 수입 감자스낵류로부터 상용 DNA 추출 kit 및 CTAB-phenol/chloroform 추출법등을 이용하여 시료특성에 따른 genomic DNA를 추출방법을 선정하고 PCR 정성검사를 실시하였다. 생감자의 경우 STE 용액으로 과량의 전분을 제거한 다음 DNA를 추출한 경우 순도 높은 DNA를 추출할 수 있었으며 상용 추출 kit를 이용한 경우 lysis buffer와 함께 ${\alpha}-/{\beta}$-amylase를 각각 또는 혼합으로 처리하거나 추출된 DNA 용액에 마지막 단계에서 효소를 처리한 시료군에서 고순도의 DNA를 추출할 수 있었으며, 효소 처리군에서는 ${\alpha}-/{\beta}$-amylase를 혼합으로 처리한 경우에 DNA 추출수율이 높았다. 냉동가공감자의 경우 silica-coated bead법을 이용하여 효소를 처리한 경우와 CTAB-페놀 클로로포름 처리군에서 DNA가 추출되었다. 또한, 각 방법으로 추출한 DNA에 대하여 감자의 내인성 유전자인 Pss 프라이머를 사용하여 PCR을 한 결과 모든 시료에서 추출된 DNA에 대하여 내부표준유전자 증폭산물이 검출되었다. 고도의 가공처리를 거친 수입 감자스낵(fabricated potato chips)과 냉동가공 감자(frozen fried potato) 등은 계면활성제인 CTAB(cetyl trimethyl ammonium bromide)과 페놀-클로로포름 혼합액을 이용하여 추출하고 이를 template로 하여 PCR 증폭을 실시하였다. 그 결과, Fig. 8에 제시한 바대로 감자의 내인성 유전자인 Pss 특이적 산물인 216bp의 산물이 냉동감자가공품과 감자칩에서 검출되었으며 재조합유전자인 New leaf plus 유래의 증폭산물(234bp)와 New lear Y유래의 증폭산물(225bp)는 검출되지 않았다. 본 실험의 결과 시료의 가공특성과 적용한 추출 kit 및 방법에 따라 genomic DNA 순도 및 추출수율이 크게 차이가 났으며 이것이 결국 PCR 결과에 의음성 혹은 의양성 등에 영향을 미치게 될 것으로 판단된다. 또한, 동일한 DNA추출방법에 의해서도 DNA가 추출되지 않은 경우가 있어서 동일한 시료에서 2회 반복 추출하는 것이 의음성결과를 피할 수 있는 방법으로 판단된다.
Objective:Attention deficit hyperactivity disorder(ADHD) is the most common childhood psychiatric disorder, affecting 3-5% of school-aged children. Although the biological basis of ADHD is unknown, family studies provide strong evidence that ADHD has a genetic basis. Recent genetic studies have suggested associations between ADHD and serotonin 1B(5HT1B) receptor gene G861C polymorphism. The aim of this study is to test for the association between ADHD and 5HT1B receptor gene G861C polymorphism in Korean population. Method:We processed DNA extraction and genotyping. 106 Korean children with ADHD and their parents were analyzed using the transmission disequilibrium test(TDT) and haplotype-based haplotype relative risk (HHRR). And the ADHD children were compared with 212 age and gender matched normal controls. Results:There was no statistical difference of distributions between ADHD cases and controls. We did not observe any preferential transmission of alleles of 5HT1B receptor gene G861C polymorphism in ADHD. Conclusions:Though there is the possibility of failing to detect small genetic effects, our results show no evidence of an association between ADHD and 5HT1B receptor gene G861C polymorphism in the Korean population and indicate that it is unlikely that the 5HT1B receptor is implicated in the susceptibility to ADHD.
Fatty acids (FAs) were considered in activating nuclear hormone receptors that play significant roles in the cellular lipid metabolism by the regulation of several genes. Previously, fatty acid synthase (FASN) and stearoyl-CoA desaturase (SCD) genes have been known to regulating the FA metabolism. In this study, associations of FASN and SCD genes with fatty acid (FA) composition in broilers were investigated. Tissue samples from 95 Cobb 500 broilers were used for DNA extraction. The g.1222 A>G SNP located in intron 42 of FASN gene and 2 SNPs in SCD gene, one in exon 2 (g.3728A>G) and the other in exon 4 (g.12903G>A), were subjected for genotyping using PCR-RFLP method. One of the SNPs in SCD gene, SNP g.3728A>G had significant association with myristoleic acid (C14:1; P<0.05), palmitic acid (C16:0; P<0.05), palmitoleic acid (C16:1; P<0.05) and saturated FA (SFA; P<0.05). However, the SNP g.1222A>G in FASN gene had only suggestive association with arachidic acid (C20:0; P=0.08). The findings in this study suggest that the SNP in exon 2 of SCD gene can be used as a molecular marker for selecting birds having desirable FA composition in broilers.
단백질이나 유전자들 간의 상호작용 인식은 생물학적 현상의 기술에 있어서 필수적이고, 이러한 상호작용의 네트웍 파악은 생물학 접근의 시작이라고 할 수 있다. 최근에, 대량의 생물학 관련 문서로부터 자연언어처리 기술을 사용하여 이러한 정보를 추출하려는 연구들이 많이 등장했다. 또한 이전 연구들은 언어학적 정보가 문서로부터 유전자 상호작용을 자동으로 추출하는 데 있어서 유용하다고 주장하고 있다. 하지만 기존의 방법들은 정확률에 비해 재현율이 많이 낮아서 성능이 그다지 좋지 못했다. 정확률의 감소 없이 재현율의 성능향상을 위해, 이 논문은 생물학관련 문서에서 구문관계에 기반하여 유전자 상호작용을 인식하는 방법을 제안한다. 생물학 도메인에 관련된 전문지식 없이, 우리의 방법은 단지 적은 양의 학습데이터를 사용하여 효과적인 성능을 보인다. LLL05(ICML05 Workshop on Learning Language in Logic)에서 제공한 데이터 포맷을 그대로 사용하여, 상호작용하는 두 유전자 중 작용의 주체가 되는 유전자를 에이전트라 하고 상호 작용의 대상이 되는 유전자를 타겟이라 한다. 본 논문에서 제안하는 첫 단계에서, 에이전트와 타겟 유전자에 대한 유전자-전이 구문관계를 인식한다. 두 번째 단계에서, 유전자 간의 상호작용이 있음을 암시하는 용언리스트를 구축한다. 마지막 단계에서, 상호작용하는 것으로 인식된 두 유전자 중 어느 것이 에이전트이고 타겟인지를 판단하기 위해 구문관계의 방향 정보를 학습한다. LLL05 데이터를 사용한 실험결과에서, 본 논문에서 제안한 방법이 학습 데이터에 대해서는 88%의 F-measure 성능을 보였고, 테스트 데이터에 대해서는 70.4%의 F-measure 성능을 보였다. 이 결과는 기존의 방법들보다 훨씬 더 좋은 성능이다. 우리는 성능에 대한 각 단계의 공헌도를 실험하여, 첫 단계는 재현율 향상에 기여를 하고 두 번째와 세 번째 단계는 정확률 향상에 기여했음을 보인다.
Increased attention has been paid to the presence of veterinary antibiotics in various environmental matrices due to their toxicological behavior in the ecosystem and development of antibiotic-resistant strains of pathogenic bacteria. In the this review, 37 target antimicrobials were selected based on annual sales of antibiotics for livestock in South Korea 2014. Also, extraction and clean-up methods for the determination of the antibiotic residues in liquid samples including water, milk, and honey were comprehensively reviewed in the literature. Solid-phase extraction (SPE) was commonly used as a pre-treatment method for the samples. Most of the analytes were extracted in acidic conditions (2.5~4.0) except for aminoglycosides, which were extracted in neutral conditions (7.0~8.0). ${\beta}-Lactams$ showed the highest recoveries in neutral pH due to their degradation characteristics in acidic media. Starta-X, Oasis HLB, and Oasis MCX were frequently applied as an SPE cartridge and Oasis HLB showed the highest recoveries for the majority of antibiotic classes. The homogenized honey and milk were extracted by mixing with acids for deproteinization. Solids and other interfering substances in the extract were eliminated by centrifugation followed by membrane filtration or SPE before injection into HPLC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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