Thyroid hormones play an important role in regulating metabolism and can affect homeostasis of fat depots. The gene encoding thyroglobulin (TG), producing the precursor for thyroid hormones, has been proposed as a positional and functional candidate gene for a QTL with an effect on fat deposition. The SNP occurs in the 5' promoter region of the TG gene and is widely used in marker assisted selection (MAS) programs to improve the predictability of marbling level and eating quality in beef cattle. In this study, we identified three SNPs at the 5' promoter region of the TG gene in Korean cattle. Of the three SNPs identified in TG gene, the C257T and A335G were previously unreported new SNPs. The sequence data were submitted to GenBank (GenBank accession number: AY615525). The previously reported C422T SNP showed three genotypes, CC, CT and TT, by digestion with the restriction enzyme MflI using the PCR-RFLP method. A new allelic variant corresponding to the C${\rightarrow}$T and A${\rightarrow}$G mutations at positions 257 and 335, respectively, could be detected by the SSCP analysis. The gene-specific SNP marker association analysis indicated that the C422T SNP marker was significantly associated (p<0.05) with marbling score. Animals with the CC and CT genotypes had higher marbling score than those with the TT genotype. Results from this study suggest that TG gene-specific SNP may be a useful marker for meat quality traits in future MAS programs in Korean cattle.
Min, Mi-Sook;Park, Sun-Kyung;Che, Jing;Park, Dae-Sik;Lee, Hang
Animal Systematics, Evolution and Diversity
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v.24
no.1
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pp.25-32
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2008
The Gold-spotted pond frog, Rana plancyi chosenica, designated as a vulnerable species by IUCN Red list. This species is a typical example facing local population threats and extinction due to human activities in South Korea. A strategic conservation plan for this endangered species is urgently needed. In order to provide information for future conservation planning, accurate information on the genetic diversity and taxonomic status is needed for the establishment of conservation units for this species. In this study, we used a molecular genetic approach using the mitochondrial cytochrome b gene and control region sequences to find the genetic diversity of gold-spotted pond frogs within South Korea. We sequenced the mitochondrial DNA cytochrome b gene and control region of 77 individuals from 11 populations in South Korea, and one from Chongqing, China. A total of 15 cytochrome b gene haplotypes and 34 control region haplotypes were identified from Korean gold-spotted pond frogs. Mean sequence diversity among Korean gold-spotted pond frogs was 0.31% (0.0-0.8%) and 0.51% (0.0-1.0%), respectively. Most Korean populations had at least one unique haplotype for each locus. The Taean, Ansan and Cheongwon populations had no haplotypes shared with other populations. There was a sequence divergence between Korean and Chinese gold-spotted pond frogs (1.3% for cyt b; 2.9% for control region). Analysis of genetic distances and phylogenetic trees based on both cytochrome b and control region sequences indicate that the Korean gold-spotted pond frog are genetically differentiated from those in China.
Grouper is one of the most economically important fishes with various morphological forms and characteristics, meaning it is often difficult to identify species and distinguish between life stages, sometimes leading to morphological misidentification. Therefore, identification using a molecular deoxyribose nucleic acid (DNA) approach was needed as an alternative means to identify closely related species. This study aims to determine the molecular phylogeny of grouper from the northern part of the Bird's Head Seascape of Papua. The DNA sequence of each cytochrome oxidase I (COI) gene was used to study the molecular relationship among closely related species of grouper. The results showed that there were 16 Epinephelinae that have been compared to a gene bank (National Centre for Biotechnology Information, NCBI) in the sequence length of 623 base pairs. The closest genetic distance was found between Cephalopholis miniata and Cephalopholis sexmaculata (0.036), while the furthest genetic distance was observed between Plectropomus laevis and Cephalopholis spiloparaea (0.247). This finding was further reinforced by the morphological characters of each species. This finding highlighted that five genera were represented as a monophyletic group (clade), i.e., Epinephelus, Cephalopholis, Plectropomus, Saloptia and Variola.
Cysteine proteinases play an essential role in plant growth and development but also in senescence and programmed cell death. They participate in both anabolic and catabolic processes. In addition, they are involved in signalling pathways and in the response to biotic and abiotic stresses. A cDNA clone encoding cysteine proteinase (CP) gene, designated PgCysP1, was isolated from Panax ginseng C. A. Meyer. Reverse transcriptase (RT)-PCR results showed that PgCysP1 expressed at different level in P. ginseng hairy root. Different stresses such as biotic as well as abiotic stresses triggered a significant induction of PgCysP1. The positive responses of PgCysP1 to the various stimuli suggested that PgCysP1 may help to protect the plant against reactive environmental stresses.
Bacterial 16S rRNA gene sequences have been widely used for the studies on molecular phylogeny, evolutional history, and molecular detections. Bacterial genomes have multiple rRNA operons, of which gene sequences sometimes are variable. In the present study, heterogeneity of the Vibrio 16S rRNA gene sequences were investigated. Vibrio 16S rRNA sequences were obtained from GenBank databases, considering the completion of gene annotation of Vibrio genome sequences. These included V. cholerae, V. harveyi, V. parahaemolyticus, V. splendidus, and V. vulnificus. Chromosome 1 of the studied Vibrio had 7~10 copies of the 16S rRNA gene, and their intragenomic variations were less than 0.9% dissimilarity (more than 99.1% DNA similarity). Chromosome 2 had none or single 16S rRNA gene. Intragenomic 16S rRNA genotypes were detected at least 5 types (V. vulnificus #CMCP6) to 8 types (V. parahaemolyticus #RIMD 2210633, V. harveyi #ATCC BAA-1116). These suggest that Vibrio has high heterogeneity of the 16S rRNA gene sequences.
Lee, Seo-Jin;Hyun, Jee Yun;Min, Mi-Sook;Lee, Mu-Yeong;Lee, Hang
Korean Journal of Veterinary Research
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v.53
no.4
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pp.239-243
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2013
Tigers are one of the most endangered species over the world and protected internationally or locally. However, they are still traded illegally for the Traditional East Asia Medicine or souvenirs / mementos as well as fake products. In the present study, to identify the species of the specimen known as the tiger's genitalia that was sold for mementos in China, two approaches of genetic tools and morphological comparisons were applied. On the basis of the entire sequences of mitochondrial cytochrome b gene (1,140 bp), the result of nucleotide comparisons showed that the specimen examined here is matched with banteng, Bos javanicus (Identities = 1,138/1,140; 99%). In addition, the examination of external morphological characters revealed that the genitalia of the specimen is much more similar to the one of cows, not to tigers. The outcomes highlighted that there are still some fake products of tigers traded in market and molecular genetic tools could help identifying species of wildlife products.
Generally, the direct sequencing through PCR is faster, easier, cheaper, and more practical than clone sequencing. Frequently, standard PCR amplification is usually interpreted by mispriming internal or external regions of the target template. Normally, DNA fragments were eluted from the gel using Gel extraction kit and subjected to direct sequencing or cloning sequencing. Cloning sequencing has often troublesome and needs more time to analyze for many samples. Since touchdown (TD) PCR can generate sufficient and highly specific amplification, it reduces unwanted amplicon generation. Accordingly, TD PCR is a good method for direct sequencing due to amplifying wanted fragment. In plants the 5S-rRNA gene is separated by simple spacers. The 5S-rRNA gene sequence is very well-conserved between plant species while the spacer is species-specific. Therefore, the sequence has been used for phylogenetic studies and species identification. But frequent occurrences of spurious bands caused by complex genomes are encountered in the product spectrum of standard PCR amplification. In conclusion, the TD PCR method can be applied easily to amplify main 5S-rRNA and direct sequencing of panax ginseng cultivars.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.145.1-145
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2003
This study was conducted to designing conserved regions of molecules for virus-derived resistance to transgenic Phlaenopsis orchids to protect against two major orchid viruses, Cymbidum mosaic virus (CymMV) and Odontoglossum ringspot virus (ORSV). Infected leaf samples of Phalaenopsis were randomly screened by the RT-PCR with specific primers to both of viruses. RT-PCR products of the viruses were cloned and their nucleotide sequences were determined. Multiple alignments of coat protein (CP) genes of the viruses revealed that over the 88 % and 94 % identities with CymMV and ORSV, respectively, were observed. These data can be useful for selection of highly conserved regions of CP gene of the viruses for transgenic orchid experiments.
Kim, Baek Jun;Lee, Yun-Sun;An, Jung-hwa;Park, Han-Chan;Okumura, Hideo;Lee, Hang;Min, Mi-Sook
Molecules and Cells
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v.26
no.3
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pp.314-318
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2008
Korean long-tailed goral (Nemorhaedus caudatus) is one of the most endangered species in South Korea. However, detailed species distribution and sex ratio data on the elusive goral are still lacking due to difficulty of identification of the species and sex in the field. The primary aim of this study was to develop an economical PCR-RFLP method to identify species using invasive or non-invasive samples from five Korean ungulates: goral (N. caudatus), roe deer (Capreolus pygargus), feral goat (Capra hircus), water deer (Hydropotes inermis) and musk deer (Moschus moschiferus). The secondary aim was to find more efficient molecular sexing techniques that may be applied to invasive or non-invasive samples of ungulate species. We successfully utilized PCR-RFLP of partial mitochondrial cytochrome b gene (376 bp) for species identification, and sex-specific amplification of ZFX/Y and AMELX/Y genes for sexing. Three species (goral, goat and water deer) showed distinctive band patterns by using three restriction enzymes (Xbal, Stul or Sspl). Three different sexing primer sets (LGL331/335 for ZFX/Y gene; SE47/48 or SE47/53 for AMELX/Y gene) produced sex-specific band patterns in goral, goat and roe deer. Our results suggest that the molecular analyses of non-invasive samples might provide us with potential tools for the further genetic and ecological study of Korean goral and related species.
Sesquiterpenes are found naturally in plants and insects as defensive agents or pheromones. They are produced in the cytosolic acetate/mevalonate pathway for isoprenoid biosynthesis. The inducible sesquiterpene synthases (STS), which are responsible for the transformation of the precursor farnesyl diphosphate, appear to generate very few olefinic products that are converted to biologically active metabolites. In this study, we isolated the STS gene from Panax ginseng C.A. Meyer, designated PgSTS, and investigated the correlation between its expression and various abiotic stresses using real-time PCR. PgSTS cDNA was observed to be 1,883 nucleotides long with an open reading frame of 1,707 bp, encoding a protein of 568 amino acids. The molecular mass of the mature protein was determined to be 65.5 kDa, with a predicted isoelectric point of 5.98. A GenBank BlastX search revealed the deduced amino acid sequence of PgSTS to be homologous to STS from other plants, with the highest similarity to an STS from Lycopersicon hirsutum (55% identity, 51% similarity). Real-time PCR analysis showed that different abiotic stresses triggered significant induction of PgSTS expression at different time points.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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