A GAL4 type transcription factor gene (formally annotated as AN3912) locating downstream of sndA (AN3911) was characterized. The putative transcription factor carries both Zn(II)2Cys6 binuclear cluster DNA-binding domain and transcription activator domain. The gene named gtfA (gal4 type transcription factor) had an open reading frame which consisted of 762 amino acids and was disrupted by three introns. The deletion mutant produced reduced amount of conidia but increased amount of fruiting bodies, suggesting that the GtfA make function in decision of asexual preferential to sexual development. The forced over expression of gtfA caused the retardation of fruiting body formation on high glucose concentration. The transcript level of gtfA was kept constant through the life cycle except late vegetative stage and early sexual development stage during which slight increase was found. The expression of gtfA was not significantly affected by sexual or asexual development regulators, such as VeA, NsdD or FluG, FadA, and SfaD. The GtfA repressed the nsdC transcription, which suggested that GftA control sexual development negatively via negative regulation of nsdC expression.
Fertilized egg, by successive cell divisions, differentiates into different tissues and organs with various structures and functions. Different cells and tissues contain different proteins, products of selective gene expression. Not all the genes in any genomes are equally active, temporal and spatial gene expression being the general rule. Present paper attempts to review the tanscriptional mechanisms or the initiations of transcription from several angles. In some of the organisms the genes in the process of transcription or the genes in the inactive state can be seen under the light microscope. Some bands of Drosophila polytene chromosomes may exhibit a swollen or puff appearance under certain conditions. A puff, unfolded or decondensed form of chromomere, represents sets of intense transcriptional activity or RNA synthesis. The heterochromatic X chromosome whose genes remain inactive in the female mammals can be visualized as a dark staining structure called Barr body, Configuration of chromatin differs between transcribed and nontranscribed chromatin. Modification to the chromatin facilitates RNA synthesis. The movement of large polymerase molecule along the DNA would probably be facilitated if some modifications of the chromatin configuration is effected. Methylation of cytosines in CG sequences is associated with inactive genes. Methylation can play a role in determination of mammalian cells during embryogenesis. Demethylation is necessary for the gene to be expressed during development A histone modification that is also known to be correlated with transcriptional capacity of chromatin is acetylation of the lysine residues of the core histones. Chromatin containing a high level of histone acetylation is very sensitive to DNase 1. For the transcription to occur TBP must first bind to the TATA box. Another TF, TF IIB, then binds to the promoter-TBP complex, facilitating the access of RNA polymerase to the transcription initiation site. As recently as eight years ago researchers assumed that histones were irrelevant to the regulation of gene expression. Histones combine with the DNA to form nucleosome of the chromatin. Histones are vital participant in gene regulation. Histone and basal factors compete for access to TATA box. When DNA is exposed to basal factors before histones are introduced, the basal factors assemble on TATA boxes preventing the access of histones, allowing transcription to occur, for transcription to begin, activator protein at the upstream activation sequence or enhancer must interact with the tail of histone H4 at TATA box and cause the histone role particle to dissociate from the TATA box leading to partial breakup of the histone core particle and allowing the basal factors to bind to the TATA box. New concept of genomic flux in contrast to the old concept of static genome has been developed based on the powerful new molecular techniques. Genomic changes such as repetitive DNAs and transposable elements, it is assumed but not yet proved, may affect some of the developmental patterns that characterize particular cells, tissues, organs, and organisms. In the last decade or so remarkable achievement have been made in the researches of the structures and functions of TFs and the specific target sequences located in promoters or enhancers where these TFs bind. TFs have independent domains that bind DNA and that activate transcription. DNA binding domain of TFs serves to bring the protein into the right location. There are many types of DNA binding domains. Common types of motifs can be found that are responsible for binding to DNA. The motifs are usually quite short and comprise only a small part of the protein structure. Steroid receptors have domains for hormone binding, DNA binding, and activating transcription. The zinc finger motif comprises a DNA binding domain. Leucine zipper consist of a stretch of amino acids with a leucine residue in every seventh position Two proteins form a dimer because they interact by means of leucine zippers on similar α-helical domain. This positions their DNA binding basic domains for interaction with the two halves of a DNA sequence with dyad symmetry of TGACTCA, ACTGAGT.
Silencing of Dicer1 by siRNA did not inhibit development up to the blastocyst stage, but decreased expression of selected transcription factors, including Oct-4, Sox2 and Nanog, suggesting that Dicer1 gene expression is associated with differentiation processes at the blastocyst stage (Cui et al., 2007). In order to get insights into genes which may be linked with microRNA system, we compared gene expression profiles in Gapdh and Dicer1 siRNA-microinjected blastocysts using the Applied Biosystem microarray technology. Our data showed that 397 and 737 out of 16354 genes were up- and down-regulated, respectively, following siRNA microinjection (p<0.05), including 24 up- and 28 down-regulated transcription factors. Identification of genes that are preferentially expressed at particular Dicer1 knock down embryos provides insights into the complex gene regulatory networks that drive differentiation processes in embryos at blastocyst stage.
Hypoxia affects various physiological and pathophyological processes. Hypoxia changes the expression of hypoxia-responsive genes through two main pathways. First, hypoxia activates transcription factors (TF) such as Hypoxia-inducible Factor (HIF). Second, hypoxia decreases the activity of Jumonji C domain-containing histone demethylases (JMJDs) that require $O_2$ and ${\alpha}$-Ketoglutarate (${\alpha}$-KG) as substrates. The JMJDs affect gene expression through their regulation of active or repressive histone methylations. Profiling of H3K4me3, H3K9me3, and H3K27me3 under both normoxia and hypoxia identified 75 TFs whose binding motifs were significantly enriched in the methylated regions of the genes. TFs showing similar binding strengths to their target genes might be under the 'metabolic control' which changes histone methylation and gene expression by instant changing catalytic activities of resident histone demethylases.
A subtracted cDNA library of a marine scuticociliate, Philasterides dicentrarchii, in response to 17β-estradiol exposure was constructed using suppression subtractive hybridization (SSH). As a result of SSH, 275 clones were isolated, and among them, only glutathione peroxidase (GPX) gene was isolated as an antioxidative enzyme responding to 17β-estradiol. The semi-quantitative reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis revealed that the transcription of GPX gene of P. dicentrarchii was clearly increased by exposure to 17β-estradiol. The GPX transcription was also clearly increased by exposure to xenoestrogens such as bisphenol A (BPA) and genistein.
Kim, Seong-Wan;Kim, Seong-Ryul;Goo, Tae-Won;Choi, Kwang-Ho
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.37
no.2
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pp.49-54
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2018
To artificially enhance antimicrobial peptide expression in Bombyx mori, we constructed genetically engineered silkworms overexpressing Rel family transcription factor. The truncated BmRelish1 (BmRelish1t) gene contained a Rel homolog domain (RHD), nuclear localization signal (NLS), acidic and hydrophobic amino acid (AHAA)-rich region, and death domain (DD), but no ankyrin-repeat (ANK) domain. The BmRelish1t gene was controlled by B. mori cytoplasmic actin 3 promoter in the PiggyBac transposon vector. Chromosome analysis of G1 generations of a transgenic silkworm with EGFP expression confirmed stable insertion of BmRelish1t. BmRelish1t gene overexpression in transgenic silkworms resulted in higher mRNA expression levels of B. mori antimicrobial peptides such as lebocin(~20.5-fold), moricin(~8.7-fold), and nuecin(~17.4-fold) than those in normal silkworms.
Allergic inflammation requires the orchestration of altered gene expression in the target tissue and in the infiltrating immune cells. The transcription factor STAT6 is critical in activating cytokine gene expression and cytokine signaling both in the immune cells and in target tissue cells including airway epithelia, keratinocytes and esophageal epithelial cells. STAT6 is activated by the cytokines IL-4 and IL-13 to mediate the pathogenesis of allergic disorders such as asthma, atopic dermatitis, food allergy and eosinophilic esophagitis (EoE). In this review, we summarize the role of STAT6 in allergic diseases, its interaction with the co-factor PARP14 and the molecular mechanisms by which STAT6 and PARP14 regulate gene transcription.
Park, Da Som;Kim, Se Eun;Koo, Deog-Bon;Kang, Man-Jong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.33
no.6
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pp.1023-1033
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2020
Objective: The efficiency of the knock-in process is very important to successful gene editing in domestic animals. Recently, it was reported that transient loosening of the nucleosomal folding of transcriptionally inactive chromatin might have the potential to enhance homologous recombination efficiency. The objective of this study was to determine whether histone deacetylases (HDAC) inhibitor and RAD51 recombinase (RAD51) expression were associated with increased knock-in efficiency on the β-casein (bCSN2) gene locus in mammary alveolar-large T antigen (MAC-T) cells using the transcription activator-like effector nucleases (TALEN) system. Methods: MAC-T cells were treated with HDAC inhibitors, valproic acid, trichostatin A, or sodium butyrate for 24 h, then transfected with a knock-in vector, RAD51 expression vector and TALEN to target the bCSN2 gene. After 3 days of transfection, the knock-in efficiency was confirmed by polymerase chain reaction and DNA sequencing of the target site. Results: The level of HDAC 2 protein in MAC-T cells was decreased by treatment with HDAC inhibitors. The knock-in efficiency in MAC-T cells treated with HDAC inhibitors was higher than in cells not treated with inhibitors. However, the length of the homologous arm of the knock-in vector made no difference in the knock-in efficiency. Furthermore, DNA sequencing confirmed that the precision of the knock-in was more efficient in MAC-T cells treated with sodium butyrate. Conclusion: These results indicate that chromatin modification by HDAC inhibition and RAD51 expression enhanced the homologous recombination efficiency on the bCSN2 gene locus in MAC-T cells.
Kim, Jin-Hong;Chung, Byung-Yeoup;Baek, Myung-Hwa;Wi, Seung-Gon;Yang, Dae-Hwa;Lee, Myung-Chul;Kim, Jae-Sung
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.48
no.1
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pp.1-6
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2005
Analysis of chlorophyll (Chl) fluorescence implicated treatment of 40 mM NaCl decreased maximal photochemical efficiency of photosystem II (PSII) (Fv/Fm), actual quantum yield of PSII (${\Phi}_{PSII}$), and photochemical quenching (qP) in rice, but increased non-photochemical quenching (NPQ). Decreases in Fv/Fm, ${\Phi}_{PSII}$, and qP were significantly alleviated by $30\;{\mu}M$ jasmonic acid (JA), while NPQ increase was enhanced. Transcription levels of antioxidant isoenzyme genes were differentially modulated by NaCl treatment. Expression of cCuZn-SOD2 gene increased, while those of cAPXb, CATb, and CATc genes decreased. JA prevented salt-induced decrease of pCuZn-SOD gene expression, but caused greater decrease in mRNA levels of cAPXa and Chl_tAPX genes. Investigation of vacuolar $Na^+/H^+$ exchanger (NHX2) and 1-pyrroline-5-carboxylate synthetase (P5CS) gene expressions revealed transcription level of NHX2 gene was increased by JA, regardless of NaCl presence, while that of P5CS gene slightly increased only in co-presence of JA and NaCl. Unlike JA, ${\gamma}$-radiation rarely affected expressions of antioxidant isoenzyme, NHX2, and P5CS genes, except for increase in mRNA level of Chl_tAPX and decrease in that of pCuZn-SOD. These results demonstrate enhanced salt-tolerance in JA-treated rice seedlings may be partly due to high transcription levels of pCuZn-SOD, NHX2, and P5CS genes under salt stress.
The AML1 gene is an essential transcription factor regulating the differentiation of hematopoietic stem cells into mature blood cells. Though at least 12 different alternatively spliced AML1 mRNAs are generated, three splice variants (AML1a, AML1b and AML1c) have been characterized. Here, using the reverse transcription-polymerase chain reaction with outward-facing primers, we identified a novel non-polyadenylated transcript from the AML1 gene, with exons 5 and 6 scrambled. The novel transcript resisted RNase R digestion, indicating it is a circular RNA structure that may originate from products of mRNA alternative splicing. The expression of the novel transcript in different cells or cell lines of human and a number of other species matched those of the canonical transcripts. The discovery provides additional evidence that circular RNA could stably exist in vivo in human, and may also help to understand the mechanism of the regulation of the AML1 gene transcription.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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