Optimum conditions for hydrolysis were investigated to enhance water-solubilities of protein-bound polysaccharides in the basidiocarps of Ganoderma lucidum by treating chymotrypsin. We also attempted with Ganoderma lucidum residue remaining after extracting hot water-soluble compoents in Ganoderma lucidum. After hydrolyzing under optimum conditions (20 ppm chymotrypsin, 2% Gampderma lucidum or 6% Ganoderma lucidum residue, at pH 10 and at $ 40^{\circ}C$), the amounts of total protein and carbohydrate of hydrolysate were measured. Michaelis constant, $K_{m}$, and maximum rate, $V_{max}$, calculated by Lineweaver-Buck plot for the hydrolysis of Ganoderma lucidum were 1.73% and 0.073%/min respectively and those for hydrolysis of Ganoderma lucidum residue were 2.40% and 0.033%/min respectively. The amount of polysaccharide isolated from Ganoderma lucidum (100 g) treated with chymotrypsin was only 3.07 g, but significantly increased amount (14.34 g) of polysaccharides was isolated from Ganoderma lucidum residue (100 g) treated with chymotrypsin. The protein-bound polysaccharide was isolated from the non-hydrolyzed and hydrolyzed sample and molecular weights of the polysaccharide were measured by Sepharose CL-48 gel filtration.
We investigated the optimum conditions for conversion of water-insoluble components of basidiocarps of Ganoderma lucidum to water-soluble components by hydrolyzing with chitinase. We also tried it with Ganoderma luciclum residue remaining after extracting hot water-soluble components of Ganoderma lucidum. After hydrolyzing under optimum conditions (20 ppm chitinase, 2% Ganoderma lucidum or 6% Ganoderma lucidum residue, at pH 3 and at $ 35^{\circ}C$), the contents of total water-soluble components (polysaccharide or protein) were measured, and it was found that the contents of water-soluble components increased to 1.5-2.7 fold. Michaelis constant, $K_m$ and maximum rate, $V_max$ calculated by Lineweaver-Burk plot for hydrolysis of Ganoderma lucidum were 1.75% and 0.02%/min respectively and those for hydrolysis of Ganoderma lucidum residue were 53.15% and 0.53%/min respectively The protein-bound polysaccharide was isolated after hydrolysis and molecular weights were measured by Sepharose CL-4B gel filtration and compared with the molecular weights of polysaccharide before hydrolysis.
To examine influence of artificial digestive juice on the antitumor activity of Ganoderma lucidum-A(GL-A), protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum, we compared the digested protein-bound polysaccharide with undigested one both on immunopotentiating activity and influence of digestive juices. Protein-bound polysaccharide GL-B was obtained by digesting the antitumor component GL-A with artificial digestive Juices in vitro. When GL-A was administered orally to sarcoma 180 tumor-bearing ICR mice, the life prolonging effect was exhibited in a dose dependent manner Not only GL-A but GL-B increased the production of colony forming unit (CFU) to 10- and 8-fold of that of the control, respectively. Both of the protein-bound polysaccharides also showed the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 cell lines to 3.5-and 3.7-fold of that of the control, respectively: GL-A activated components of the alternative complement pathway, whereas GL-B did not. In humoral immunity GL-A increased the activity of alkaline phosphatase in differentiated B cells to 3 times and GL-B to 4 times of that of the control. These results showed that the artificial digestive juices had no influence on the antitumor activity of the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum and that its immunomodulating activity retained after treatment with artificial digestive juice. And this provides a basis of the protein-bound polysaccharide of Ganoderma lucidum as an peroral anticancer drug.
Park, Eun-Jeon;Ko, Geon-Il;Kim, Jae-Baek;Sohn, Dong-Hwan
YAKHAK HOEJI
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v.41
no.2
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pp.220-224
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1997
This study was carried out to investigate the dose dependent antifibrotic effects of polysaccharide from mycelium of Ganoderma lucidum. The experimental hepatic cirrhosis was induced by bile duct ligation/scission (BDL/S) in rats. BDL/S rats in each group were dosed 0.5 mg, 2.0 mg, 5.0 mg or 10.O mg/rat/day orally for 4 weeks after the operation. Antifibrotic effects were evaluated by serum biochemical values, hydroxyproline contents, and light microscopical histology. The results obtained were as follows: 1) Hydroxyproline contents in liver of 5.0 and 10.0mg polysaccharide-treated BDL/S rats were significantly reduced 2) In serum test, ALT, AST, ALP values in polysaccharide from Ganoderma lucidum-treated group were lower than BDL/S control group 3) The hepatic damage such as hepatocellular necrosis, inflammation, bile duct proliferation and fibrosis was less severe in the livers of 2.0 mg and 5.0 mg polysaccharide-treated rats. These results suggest that polysaccharide from mycelium of Ganoderma lucidum to be a promising agent for the inhibition of hepatic cirrhosis.
For the efficient production of a new exo-polysaccharide from Ganoderma lucidum ASI 7004, the optimum conditions and methods in submerged cultivation were investigated with an airlift fermenter system. The optimum aeration rate was 2.5 Wm at the initial pH 5.0 and 28$^{\circ}C$. The increase of dissolved oxygen concentration by pure oxygen supply during cultivation did not improved the exo-polysaccaride production and the mycelial growth. The maximum exo-polysaccharide production and the mycelial growth under the optimum culture condition were obtained in media of glucose 60g/L, yeast extract 6g/L, (NH4)2HPO4 1g/L and KH2PO4 0.5g/L. Under these optimum medium and culture conditions, about 7.15g/L of exo-polysaccharide and 13.9g/L of mycelial growth were producted, respectively.
The purpose of this study was to observe the effects of the polysaccharide (GLP) obtained from the liquid cultured Ganoderma lucidum on the lipidperoxidation in a rat liver microsome and hepatotoxicity in the primary cultured rat hepatocytes. It is well known that the polysaccharide of Ganoderma lucidum exhibits hepatoprotective activity, antitumor activity etc., which many suggest a relationship to lipidperoxidation. The effect of GLP on $CCl_4-$ and galactosamineintoxicated cytotoxicity in the primary cultured rat hepatocytes were reduced the GPT value. In order to the estimate the effects of anti-lipidperoxidation of the polysaccharide, enzymatic and nonenzymatic reaction assays were performed, in vitro, in the rat liver microsome. An enzymatic lipidperoxidation reaction by $ADP+FeCl_3+NADPH$ and $CCl_4+NADPH$, GLP (1 mg/mL) inhibited 77.4% and 39.4%, respectively, and the nonenzymatic reaction displayed a 97.4% strongly inhibition. In the enzymatic and nonenzymatic inducers treated with GLP, the formation of malondialdehyde (MDA) progressively decreased by raising the GLP concentration. These results suggest that the anti-lipidperoxidation and radical scavenging activity of GLP may play an important part in the liver protection action.
This study was carried out to Investigate the effects of Panax ginseng, Ganoderma lucidum extract and crude polysaccharide of G. lucidum on the growth of lactic acid bacteria. p. ginseng extract contained 60.7% carbohydrate and 27.5% protein, whereas G. lucidum contained 35.9% carbohydrate and 46.3% protein. The total sugar and protein content of crude polysaccharide of G. lucidum were 47.2% and 15.2%, respectively. Two amino acids(hg, Trp) were detected in p. ginseng extract and 11 amino acids (hg, Trp, Ua, Lys, Ser, etc.) in C. lucidum extract. By the addition of p. ginseng, 5. lucidum extract and crude polysaccharide, the cia. p. ginseng was more effective on the growth of 1. casei an: G. lucidum was more effective on that of S. thermophilus. The effect of free amino acids on the growth of tactic acid bacteria was also examined. Arginine and lysine stimulated the growth of L. casei, whereas Lysine, serine, arginine, and glutamic acid stimulated the growth of 5. thermophilus.
The popular edible mushroom Ganoderma lucidum was considered the most valuable medicine in ancient Asia and was belived to bring longevity, due to its mysterious power of healing the body and calming the mind. Today, Ganoderma lucidum is still widely revered as a valuable health supplement and herbal medicine worldwide, as studies (mostly conducted in China, Korea, Japan, America) into the medicinal and nutritional values of Ganoderma lucidum revealed that it does indeed contain certain bioactive ingredient (such as polysaccharide, triterpene) that might be benefical for the prevention and treatment of a variety of ailments, including diseases such as hypertension, diabetes, hepatitis, cancer, AIDS.
Exo-polysaccharide (BWS) obtained from submerged cultivation of Ganoderma lucidum mycelium was fractionated. Antitumor activity of their fractions was investigated in comparison with the mycelial polysaccharide fractions. Eight kinds (BWS-DN, BWS-DA, BWS-DN-GI, BWS- DA-GI, MWS-DN, MWS-DA, MWS-DN-GI and MWS-DA-GI) of polysaccharide fractions were obtained by DEAE-cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel chromatography from BWS and MWS, which were isolated from culture fiuid and mycelial cell, respectively. The anticomplementary activities (ITCH$_{50}$%) of the exo-polysaccharide fractions showing 15% to 30% were lower than those of mycelial polysaccharide fractions showing 15% to 70%. The acidic fractions of BWS-DA and BWS-DA-GI fractionated from BWS, showed the highest activity of 30%. In the MTT assay, BWS-DN and MWS against mouse leukemia L1210 exhibited high inhibition ratio of 86 and 89%, respectively at the concentration of 600 $\mu$g/ml. High inhibition ratio of 50% (IC$_{50}$) was achieved for BWS, BWS-DA and MWS-DA fractions against human colon adenocarcinoma COLO-205 and for BWS-DA, BWS-DN and MWS-DN fractions against human leukemia HL-60 at the concentra- tion of 300 $\mu$g/ml among the six polysaccharide fractions, respectively.
To determine contents of inorganic elements of Ganoderma lucidum, the horn-shaped carpophores and the pileus of Ganoderma lucidum were incinerated and analyzed by inductively coupled plasma atomic emission spectrophotometry. The ash contents of the pileus and the horn-shaped carpophore were 1.48% and 1.40%, respectively. The pileus contained calcium, magnesium, sodium, manganese, iron, zinc and germanium in that order. The horn-shaped carpophore contained magnesium, calcium, zinc, manganese, iron, copper and germanium in that order. To examine the protein-bound polysaccharide from Ganoderma lucidum for immunopotentiating activity, its fruit bodies were extracted with hot water. Purification of the extract was carried out by acetone precipitation and dialysis. The fraction obtained during the purification procedure consisted of a polysaccharide moiety (51%) and a protein moiety (5%). When the compound was administered intraperitoneally to the mice at a dose of 50mg/kg, it enhanced the accumulation of the peritoneal exudate cells, macrophage and polymorphonuclear leucocytes, thereby indicating immunopotentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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