Total methanolic extract of Chrysanthemum coronarium L. var. spatiosum (Compositae) was revealed to have anti-hepatotoxic activity against galactosamine-induced toxicity on primary cultured rat hepatocytes. After successive partitioning with chloroform, n-butanol, and water, the chloroform fraction showed a significant inhibition activity of 51% at 50 ppm, compared with that of silybin, 45.9% at $100\;{\mu}M$. The chloroform fraction was subjected to silica gel column chromatography and yielded active CH-II, CH-V and CH-VI subfractions, and the anti-hepatotoxic activity of these subfractions were 47.6, 56.3, and 23.2%, respectively, at 50 ppm. Total glutathione contents of CH-II, CH-V, and CH-VI increased by 49.8, 43.9, and 47.5% of the control, respectively at 50 ppm, whereas that of silymarin was, 59.7% at $100\;{\mu}M$ after challenged with galactosamine. The ratio of (reduced glutathione) / (total glutathione) in CH-II, CH-V and CH-VI subfraction showed similar values of $0.86{\sim}0.87$ at 50 ppm, whereas that of silymarin was, 0.85 at $100\;{\mu}M$. The incorporation of $[^3H]-uridine$ uptake into RNA was not affected by these active subfractions.
Jo, Yun Ho;Lee, Hwan;Oh, Myeong Hwan;Lee, Gyeong Hee;Lee, You Jin;Lee, Ji Sun;Kim, Min Jung;Kim, Won Yong;Kim, Jin Seong;Yoo, Dae Seok;Cho, Sang Won;Cha, Seon Woo;Pyo, Mi Kyung
Nutrition Research and Practice
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v.14
no.4
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pp.334-351
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2020
BACKGROUND/OBJECTIVES: This study was designed to investigate the improvement effect of white ginseng extract (GS-KG9) on D-galactosamine (Ga1N)-induced oxidative stress and liver injury. SUBJECTS/METHODS: Sixty Sprague-Dawley rats were divided into 6 groups. Rats were orally administrated with GS-KG9 (300, 500, or 700 mg/kg) or silymarin (25 mg/kg) for 2 weeks. The rats of the GS-KG9- and silymarin-treated groups and a control group were then intraperitoneally injected Ga1N at a concentration of 650 mg/kg for 4 days. To investigate the protective effect of GS-KG9 against GalN-induced liver injury, blood liver function indicators, anti-oxidative stress indicators, and histopathological features were analyzed. RESULTS: Serum biochemical analysis indicated that GS-KG9 ameliorated the elevation of aspartate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), and lactate dehydrogenase (LDH) in GalN-treated rats. The hepatoprotective effects of GS-KG9 involved enhancing components of the hepatic antioxidant defense system, including glutathione, glutathione peroxidase (GPx), superoxide dismutase (SOD), and catalase (CAT). In addition, GS-KG9 treatment inhibited reactive oxygen species (ROS) production induced by GalN treatment in hepatocytes and significantly increased the expression levels of nuclear factor erythroid-2-related factor 2 (Nrf2) and heme oxygenase-1 (HO-1) proteins, which are antioxidant proteins. In particular, by histological analyses bases on hematoxylin and eosin, Masson's trichrome, α-smooth muscle actin, and transforming growth factor-β1 staining, we determined that the administration of 500 mg/kg GS-KG9 inhibited hepatic inflammation and fibrosis due to the excessive accumulation of collagen. CONCLUSIONS: These findings demonstrate that GS-KG9 improves GalN-induced liver inflammation, necrosis, and fibrosis by attenuating oxidative stress. Therefore, GS-KG9 may be considered a useful candidate in the development of a natural preventive agent against liver injury.
The lectins from mucilaginous jelly and green epidermis of Aloe vera were isolated by gel and affinity chromatography. The molecular weights of the lectins were determined by SDS-PAGE. The molecular weights of the lectins from mucilaginous jelly isolated by Sephadex G-100 were 58.7 kD and 33.3 kD, and that isolated by acid-treated Sepharose 4B was 176.4 kD. The molecular weights of the lectins from epidermis isolated by Sephadex G-100 were 221.1, 54.0 and 32.5 kD respectively. And that isolated by acid-treated Sepharose 4B was 222.0 and 158.0 kD. The agglutinating activity of lectin from jelly was inhibited by D-galactose, lactose and D-galactosamine, but that from epidermis was not inhibited by lactose. The activity was stable at the pH range of $7.0{\sim}9.0$ and at the temperature $0{\sim}60^{\circ}C$.
Experimental induction of apoptosis by bacterial lipopolysacchardie is useful for understanding the role of apoptosis cell death in clinical endotoxin shock or septic shock. Thirty three mice were injected intraperitoneally with D-galactosamine (20mg) and lipopolysac-charide ($5{\mu}g$) per mouse. Five to eight mice per each experimental group were sacrificed at 6, 12, 24, 48 and 72 hrs post administration. The cells with apoptotic bodies in H-E stained sections were investigated histologically. Development of the apoptotic bodies in livers was observed in 11 of 33 mice (33.3%). These cells were diffusely or collectively appeared only in liver but not observed in kidney, thymus and spleen. Mean percentage of the cells with apoptotic bodies in the livers were 0.32, 4.34 and 5.50% respectively at 6, 12, and 24 hrs post administration. But percentage of these apoptotic cells were fairly less in 48 and 72 hrs post administration. The percentages of cells with 3 to 9 apoptotic bodies per cell were 70~90% of all apoptotic cells. The cells with more apoptotic bodies than limit number at 12 to 72 hrs post administration were belived to be necrosed. The percentage of positive cells by TUTNEL methods were 0.00~0.08, 0.00~052, 1.63~4.18, 12.41~20.21 respectively at control, 6, 12 and 24 and less than 0.01% at 48 and 72 hrs. The above results suggest that development of liver cell apoptosis by lipopolysaccharide ($5{\mu}g$) and D-glatosamine (20mg) was less at 6 hrs and markedly increased at 12 to 24 hrs and then was fairly less at 48 and 72 hrs post administration.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2003.05a
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pp.105-106
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2003
콘드로이틴황산(Chondroitin sulfate)은 생물체내에 널리 분포하는 mucopoly-saccharide의 일종으로 N-acetyl galactosamine과 glucuronic acid의 이당체 단위가 반복적으로 되풀이되는 구조를 가지며, 황산기의 결합 위치에 따라 A타입(4-sulfate) 및 C타입(6-sulfate) 등으로 나누어진다(Mucci et al., 2000). 콘드로이틴황산은 피부노화방지, 골 형성단백질, 항종양 등의 생리활성작용이 우수하고(Bayliss et al., 1999 ; Ha et al., 1999), 특히 퇴행성관절염에 효과(Omata et al., 2000)가 높아 최근 화장품, 건강보조 식품 및 의약품으로 이용되고 있다. (중략)
$\alpha$-Linolenic acid ethylester, $C_{19}$ spiroketalenolether polyyne, herniarin and steroid were isolated from the leaves of Artemisia selengensis (Compositae). The structures of the compounds were elucidated on the basis of spectroscopic evidence. Liver protective effects of these constituents were studied using galactosamine and CCI$_{4}$-induced cytotoxicity in primary cultured rat hepatocytes.
Since lectin condense more easily cancer cell than normal cell, it has been investigated very actively. Recently, a lot of researchers gave attention to lectin in natural products especially because lectin has effects on T-cell activation and anticancer activity, and specificity on polysaccharide. The specificity is useful to confirm kind of polysaccharide of the cell surface and to study the polysaccharide. In this research, we purified lectin from shiitake, Lentinula edodes, and then characterized it. The molecular weight of the lectin was 23 kDa, and it was stable only under the $40^{\circ}C$ and in a alkaline solution. As for the specificity of polysaccharide, the lectin had specificity on galactose, fucose, glucose, lactose and N-acetyl-D-galactosamine. In addition, it was confirmed to be a glycoprotein.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.191-191
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1994
본 연구는 D-galactosamine을 이용한 중기발암성 모델에서 세포성면역중의 하나인 natural killer (NK) 세포활성과 c-myc 종양단백의 발현을 알아보기 위하여 실시하였다. 수컷 6주령의 SPF SD랫드 50마리를 3개군으로 각 군당 20마리씩 나누어 배치하였다. 실험 0일에 제 1,2 군에서 DEN을 복강내로 체중 kg당 200mg 1회 투여하여 발암유발을 하였으며 대조군인 제 3군에는 saline을 투여하였다. 제 2주에 제 1군에는 강력한 발암촉진물질인 2-acetylaminofluorene (AAF)을 사료에 0.01% 투여하였으며, 제 2군은 미약한 발암촉진물질인 phenobarbital (PB)을 0.05%로 음수에 6주간 투여하였다 제 8, 15, 36주에 경시적으로 부검하였다. 제 8주에 부검시 GST-P$^{+}$ 병변이 잘 유도되어 전암병변의 유도가 잘 되었음을 확인하였다. 제 15주에 부검시 AAF를 투여한 군에서 glutathione S-transferase placental form (GST-p)에 대한 면역조직화학적 염색에서 AAF와 PB를 투여한 제 1군 및 제 2군의 간장에서는 주위조직과 한계가 명료한 GST-P$^{+}$ 증식성 결절과 병소를 관찰할 수 있었으나 기초 사료만을 투여한 제 3군은 어떠한 GST-P$^{+}$ 증식성 결절 및 병소를 관찰할 수 없었다. 랫드에서 natural killer세포는 사람이나 마우스에서 주로 자연살생능 (natural killing activity)을 보이는 LGL(lure granular lymphocyte)의 형태를 띄고 있었으며 LGL 이라고 부르는 것처럼 특징적으로 세포질 대 핵의 비율이 높고 azurophilic 과립을 세포질내에 함유하고 있으며 일반적으로 신장 형태의 핵을 가지고 있었다. 또한 세포의 크기는 small lymphocyte와 대식세포 (macrophage)의 중간 크기였다. 15주와 시험종료시 정상대조군인 제 3군의 랫드로 부터 분리한 NK 세포활성도 (% cytotoxicity)에 비하여 발암물질 투여군의 NK 활성도는 PB 투여군들의 NK활성도 보다 약간 낮았다. 랫드에서 c-myc 종양단백은 65KD 와 671KD 에서 band가 형성된 것이 관찰되었다. 시험 개시후 15주에 부검한 랫드의 간에서 c-myc 종양단백의 발현은 모든 처리군들이 대조군에 비하여 높게 발현되는. 것이 관찰되었으나 시험개시후 26주에 부검한 랫드의 간에서 c-myc 종양단백의 발현은 대조군에 비하여 차이가 거의 없었다. 따라서 랫드에서 화학적으로 유도한 간암발생 과정에서 NK 세포활성이 현저하게 억제되는 것으로 생각되며, c-myc 종양단백의 발현은 시험개시후 15주에 그 발현이 확실한 것으로 사료되어 진다.
We investigated the morphological changes and TUNEL reaction of apoptotic cells in the liver of D-galactosamine (20 mg/mouse) and lipopolysaccharide (5 $\mu\textrm{g}$/mouse)-treated 30 mice (BALB/c), and in additioa also of apoptotic cells in kidney and spleen. The livers and other some organs of mice at 6, 12, 24, 48 and 72 hrs after treatment were collected and were fixed with 10% neutral formalin and paraffin sections were stained with hematoxylin-eosin or terminal deoxynucleotidly transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) method. Morphological changes in apoptotic hepatocytes were chondensation of nuclei and density of cytoplasms, then the margination and pyknosis of chromatin, the formation of half-moon- or horse-shoe- or ship-like shapes of condensed chromatin mass, lastly formation of apoptotic bodies, disappearance of nuclear envelopes, decrease of stainability, then lysis and disappearance of apoptotic bodies. TUNEL positive reactions of hepatocytes were appeared first moderate in uncondensed hepatocytes, severe in condensed hepatocytes, moderate in chromatin-marginated hepatocytes. These reactions also were appeared moderate in hepatocytes with half-moon- or horse-shoe- or ship-like pyknotic chromatin mass or apoptotic bodies, and mild or negative in hepatocytes with lysed apoptotic bodies or with disappeared nuclear envelopes. Consequently these results suggested that TUNEL positive reactions of hepatocytes appeared at more early stages than appearance of chromatin condensation and disappeared at more early stage than disappearance of histological findings of apoptosis. We also confirmed that the differentiation of apoptotic cells from normal healthy cells of Kupffer cells and vascular endothelial cells in liver, reticular cells and lymphocytes in spleen and epithelial cells of tubules and ducts in kidney was impossible in H-E preparations but was possible in TUNEL preparations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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