Purpose: Alpha-amanitin induces potent oxidative stress and apoptosis, and may play a significant role in the pathogenesis of hepatotoxicity. This study examined the mechanisms of α-amanitin-induced apoptosis in vitro, and whether green tea extract (GTE) offers protection against hepatic damage caused by α-amanitin (AMA) induced apoptosis in vivo. Methods: The effects of GTE and SIL on the cell viability of cultured murine hepatocytes induced by AMA were evaluated using an MTT assay. Apoptosis was assessed by an analysis of DNA fragmentation and caspase-3. In the in vivo protocol, mice were divided into the following four groups: control group (0.9% saline injection), AMA group (α-amanitin 0.6 mg/kg), AMA+SIL group (α-amanitin and silibinin 50 mg/kg), and AMA+GTE group (α-amanitin and green tea extract 25 mg/kg). After 48 hours of treatment, the hepatic aminotransferase and the extent of hepatonecrosis of each subject was evaluated. Results: In the hepatocytes exposed to AMA and the tested antidotes, the cell viability was significantly lower than the AMA only group. An analysis of DNA fragmentation showed distinctive cleavage of hepatocyte nuclear DNA in the cells exposed to AMA. In addition, the AMA and GTE or SIL groups showed more relief of the cleavage of the nuclear DNA ladder. Similarly, values of caspase-3 in the AMA+GTE and AMA+SIL groups were significantly lower than in the AMA group. The serum AST and ALT levels were significantly higher in the AMA group than in the control and significantly lower in the AMA+GTE group. In addition, AMA+GTE induced a significant decrease in hepatonecrosis compared to the controls when a histologic grading scale was used. Conclusion: GTE is effective against AMA-induced hepatotoxicity with its apoptosis regulatory properties under in vitro and in vivo conditions.
녹차 추출물이 에탄올에 의한 조기 간세포에 미치는 영향을 관찰하기 위해 흰쥐에 에탄올과 녹차 추출물을 투여하고 1시간 및 3시간 후 흰쥐의 간 글루타치온과 TNF-$\alpha$량, 간항산화효소 활성도, 지질과산화물량 및 혈청 AST 및 ALT 활성도를 측정하였다. 또한 에탄올에 의한 만성 간 손상에 미치는 영향을 관찰하기 위해서 에탄올과 녹차 추출물을 2일 간격 투여 20일 후 흰쥐의 간 글루타치온과 TNF-$\alpha$량, 간 항산화 효소활성도, 지질과산화물량 및 혈청 AST 및 ALT 활성도를 측정하였다. 간 글루타치온량은 대조군에 비하여 에탄올 투여군에서 1시간, 3시간 및 20일 경과 후에 모두 감소되었고, 에탄올과 녹차추출물 혼합투여로 간 글루타치온량이 에탄올 투여군에 비하여 증가되어 녹차추출물이 에탄올에 의한 간 글루타치온량 감소를 억제시킴을 알 수 있다. 간 TNF-$\alpha$량은 에탄올 투여 1시간, 3시간 및 20일경과 후 증가되었고, 녹차추출물과 에탄올 혼합투여군은 에탄올 투여군에 비하여 1시간, 3시간 및 20일 경과 후 모두 감소되어 녹차추출물 투여로 에탄올 투여에 의한 간조직의 TNF-$\alpha$량 증가가 억제됨을 알 수 있다. 에탄올 투여군의 간조직 TBARS량을 측정한 결과 에탄올을 투여한 후 1시간 경과 및 3시간 경과 후 대조군과 유의한 차이가 없었다. 에탄올 투여군의 간 조직 항산화효소(SOD, catalase, GPx) 활성도를 측정한 결과 에탄올을 투여한 후 1시간 경과 및 3시간 경과 후 대조군과 유의한 차이가 없었다. 에탄올 투여군의 혈청 ALT와 AST 활성도를 측정한 결과 에탄올을 투여한 후 1시간 경과 및 3시간 경과 후 대조군과 유의한 차이가 없었다. 이상의 실험 결과 녹차 추출물은 간에서 에탄올에 의해서 조기에 일어나는 글루타치온량 감소 및 TNF-$\alpha$량 증가를 억제시키는 작용이 있는 것을 알 수 있는데, 녹차 추출물의 이러한 효과는 녹차 추출물이 에탄올에 의한 간 손상을 억제하는데 중요한 작용을 할 수 있을 것으로 기대된다. 녹차 추출물에 함유된 에탄올에 의한 간 손상 방지 물질의 검색과 글루타치온 및 TNF-$\alpha$에 대한 작용 기전 및 특성에 대한 연구가 계속된다면 우수한 간 손상 방지작용을 가진 물질이 개발될 수 있을 것으로 추측된다.
Various neurotransmitters are involved in regulating stress systems. In this study, we investigated the combination relieving effect of green tea extract(GTE) and L-theanine on the stress induced by electric foot shock. Four week oral administration of GTE (24 mg/kg), L-theanine (4 mg/kg) or their combination reduced the levels of dopamine, noradrenaline and corticosterone in blood, brain cortex, hippocampus, and striatum, wherease increased serotonin level. The combination of GTE and L-theanine showed much greater effects than single treatment of each component, and the effects are comparable to diazepam (2 mg/kg). Therefore, this study suggests that the combination of GTE and L-theanine may act effective and be useful for stress relieving treatment.
We examined the effect of green tea extract (GTE) and L-theanine combination on the $A{\beta}_{1-42}$-induced memory dysfunction. GTE and combination were administrated into mice for 3 weeks followed by injection of $A{\beta}_{1-42}$ to induce memory impairment. GTE and L-theanine administration significantly improved cognitive ability and reduced $A{\beta}_{1-42}$ level accompanied with the inhibition of neuronal cell death and activities of secretase. These results suggest that GTE and L-theanine combination may be a useful for preventing for the development or progression of Alzheimer's disease.
A facile and convenient method was developed for the mass production of epigallocatechin gallate (EGCG) rich green tea extract (Er-GTE). The Er-GTE was successfully obtained from the crude water extract of green tea by the combination of two step purification, i.e., a simple adsorption process on the cation exchange resins (Trilite SCR-B) followed by the chromatography with Diaion HP-20 resins. The green tea extract produced by water extraction under $45^{\circ}C$ was subjected to adsorb on the strongly acidic cation exchange resin, Trilite SCR-B. The eluate passed through the resin was reabsorbed on Diaion HP-20 resin, which was subjected to elute with a mixture of water and alcohol by conventional chromatographical manner. The EGCG content in Er-GTE was estimated above 97% by HP-LC analysis and the newly developed method was regarded as the most suitable and appropriate process for the mass production of epigallocatechin gallate rich green tea extract (Er-GTE).
Kim, Mun Jun;Ahn, Jong Hoon;Kim, Seon Beom;Jo, Yang Hee;Liu, Qing;Hwang, Bang Yeon;Lee, Mi Kyeong
Natural Product Sciences
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제22권4호
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pp.270-274
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2016
Green tea, the leaves of Camellia sinsneis (Theaceae), is generally acknowledged as the most consumed beverage with multiple pharmacological functions including antioxidant activity. This study was performed to analyze the effect of extraction conditions of green tea on its antioxidant effects using DPPH assay. Three extraction factors such as extraction solvent (EtOH, 0 - 100%), extraction time (3 - 15 min) and extraction temperature ($10-70^{\circ}C$) were analyzed and optimized extraction condition for antioxidant activity of green tea extract (GTE) was determined using response surface methodology with three-level-three-factor Box-Behnken design (BBD). Regression analysis showed a good fit of data and the optimal conditions of extraction were found to be 57.7% EtOH, 15 min and $70^{\circ}C$. Under this condition, antioxidant activity of experimental data was 88.4% which was almost fit to the ideal value of 88.6%. As epigallocatechin gallate (EGCG) is known for the major ingredient for antioxidant activity of green tea, we investigated the effect of EGCG on antioxidant activity of GTE. EGCG showed antioxidant activity with the $IC_{50}$ value of $4.2{\mu}g/ml$ and a positive correlation was observed between EGCG content and the antioxidant activity of GTE with $R^2=0.7134$. Interestingly, however, GTE with 50 - 70% antioxidant activity contain less than $1.0{\mu}g/ml$ of EGCG, which is much lower than $IC_{50}$ value of EGCG. Therefore, we suppose that EGCG together with other constituents contribute to antioxidant activity of GTE. Taken together, these results suggest that green tea is more beneficial than EGCG alone for antioxidant ability and optimal extraction condition of green tea will be useful for the development of food and pharmaceutical applications
The application of polyphenols has attracted great interest in the field of functional foods and nutraceuticals due to their potential health benefits in humans. However, the effectiveness of polyphenols depends on their bioactivity and bioavailability. In the present study, the bioactive component from green tea extract (GTE) was administrated orally (50 mg/kg body weight/day) as free or in a microencapsulated form with maltodextrin in rats fed a high fructose diet. High fructose diet induced features of metabolic syndrome including hypertriglyceridemia, hyperuricemia, increased serum total cholesterol, and retroperitoneal obesity. In addition, myocardial fibrosis was increased. In rats receiving high fructose diet, the lowering of blood triglycerides, total cholesterol, non esterified fatty acid (NEFA) and uric acid, as well as the reduction in final body weight and retroperitoneal fat weight associated with the administration of GTE, led to a reversal of the features of metabolic syndrome (P < 0.05). In particular, the administration of microencapsulated GTE decreased myocardial fibrosis and increased liver catalase activity consistent with a further alleviation of serum NEFA, and hyperuricemia compared to administration of GTE. Taken together, our results suggest that microencapsulation of the bioactive components of GTE might have a protective effect on cardiovasucular system by attenuating the adverse features of myocardial fibrosis, decreasing uric acid levels and increasing hepatic catalase activity effectively by protecting their bioactivities.
Kim, Chul-Eung;Mo, Ji-Won;Kim, Jin;Kang, Ju-Hee;Park, Chang-Shin
Molecular & Cellular Toxicology
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제3권2호
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pp.127-131
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2007
Chronic treatment with olanzapine (OLZ), an atypical antipsychotic drug, is associated with the adverse effects of weight gain, hyperglycemia and/or hypertriglyceridemia. Green tea or epigallocatechin gallate (EGCG), one of the most abundant green tea polyphenols, significantly reduces or prevents an increase in glucose levels, lipid markers and/or body weight. We hypothesized that combined treatment with OLZ and green tea extract (GTE) or EGCG may prevent body weight gain and increase of the lipid markers. ICR male mice weighing an average of 30.51 g (n=32) at the beginning of the experiment were used. OLZ, OLZ+GTE and OLZ+EGCG were administered for 27 d in the drinking water, and then the levels of fasting glucose, nitric oxide (NO), and a typical lipid marker triglyceride (TG) were determined in plasma. The body weight and food intake were also compared. The chronic treatment of OLZ increased the average body weight compared with that of controls. In the presence of GTE or EGCG, the OLZ-induced increase in body weight was significantly prevented. Furthermore, in the OLZ group, the plasma levels of glucose, NO and TG were significantly increased, whereas GTE or EGCG prevented these increases. These results implicate that OLZ may induce systematic inflammatory reaction, and suggest that GTE or EGCG can protect against OLZinduced weight gain, hyperglycemia and hypertriglyceridemia.
During storage, boar spermatozoa undergo several changes including diminished motility and viability and accumulated reactive oxygen species (ROS). In this study, we investigated the effects of green tea extract (GTE) supplementation in the Sui Dil extender on the sperm motility, viability, ROS and lipid peroxidation (LPO) of long-term preserved boar semen at $17^{\circ}C$. A total number of eight boars were used for this experiment. Pooled ejaculates were diluted to $20{\times}10^6sperm/ml$ in the Sui Dil extender containing 0 (control), 1, 10, 100 or 500 mg/l GTE and were preserved at $17^{\circ}C$ for 24, 72, 120 and 168 h, respectively. At each storage time, sperm motility and viability were estimated by microscopic examination and the fluorescent double stain $Fertilight^{(R)}$, respectively. Sperm ROS level and LPO were assessed using the 2', 7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate ($H_2DCFDA$)/propidium iodide (PI) and C11-BODIPY581/591/PI with flow cytometry, respectively. Compared to that of the 500 mg group, there were higher sperm motility and viability in the 1, 10 and 100 mg GTE groups during the preservation from 24 to 168 h (p < 0.05). The ROS levels of the 10 and 100 mg groups during the 168 h preservation were lower than those of the 0, 1 and 500 mg groups (p < 0.05). There were no significant differences in LPO regardless of the preservation period or the GTE concentration. In conclusion, the optimal concentrations (10 and 100 mg/l) of GTE that led to lower ROS levels may be useful for liquid boar sperm preservation at $17^{\circ}C$ for a period of 168 h.
잔류성이 강하고 높은 지용성질을 가지는 식품오염물질인 benzo[a]pyrene(BaP)은 녹차 섭취에 의해서 소장에서 흡수가 억제되고 총담관으로의 배출이 증가되는 것으로 최근에 보고하였다. 이번 연구는 흰쥐를 이용해서 $^{14}C$-BaP를 복강주사한 후, 사람과 비교해서 1잔에 해당하는 녹차추출물을 4주간 매일 지속적으로 공급하였을 때, $^{14}C$-BaP의 조직분배 및 잔류에 미치는 영향을 조사하였다. 27.4 kBq $^{14}C$-BaP를 복강주사한 후 표준식이와 증류수만 공급된 동물군을 대조군, 표준식이와 녹차추출물(4.7 mg catechins/day)을 공급받은 동물군을 녹차군으로 하여 4주간 사육하였다. 그리고 4주째에 심장, 간장, 뇌, 비장, 신장, 후복막지방, 고환, 부고환지방 조직을 적출하여 무게를 측정하고 각 조직에 잔류하는 $^{14}C$-BaP의 방사선 활성도를 측정하였다. 대조군과 녹차군 모두 연구 시작부터 종료 시까지 지속적으로 체중이 증가하였으나 동물군 간에 유의적인 차이는 없었다. 장기의 무게 또한 각 조직 모두 동물군 간에 유의적인 차이가 없었다. 조직 g당 $^{14}C$-BaP의 잔류량은 심장에서 가장 높았고 다음으로 뇌, 부고환지방, 비장, 신장, 간장, 후복막지방, 고환 순으로 높았으며, 조직 전체의 $^{14}C$-BaP의 잔류량은 부고환지방에서 가장 높았고 다음으로 간장, 후복막지방, 심장, 뇌, 신장, 고환, 비장 순으로 나타났다. 녹차 섭취에 의해서 조직 g당 $^{14}C$-BaP의 방사선 활성도와 조직 전체 당 $^{14}C$-BaP 방사선 활성도 모두 심장, 간장, 뇌, 비장, 부고환지방에서 급격하게 감소된 것으로 나타났다. 이상의 실험결과들을 종합해 볼 때, 4주 동안 하루 1잔에 해당하는 녹차추출물 섭취가 BaP의 조직 분배를 유의적으로 감소시켜 조직 잔류에 영향을 미치는 것을 이 실험을 통해서 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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