To evaluate the effect of cyclohexane(CH) treatment on the serum levels of glutathion S-transferase(GST) activity in liver damaged animals, damaged liver was induced with pretreatment of 50% $CCl_4$ dissolved in olive oil (0.1 m1/100g body weight) intraperitoneally 17 times every other day. To $CCl_4$-treated rats, CH (1.56 g/kg body weight, i.p) was injected once and then the animals were sacrificed at 4 hours after injection of CH. The $CCl_4$-treated animals were identified as severe liver damage on the basis of liver functional findings, 1,e, increased serum levels of alanine aminotransferase(ALT), alkaline phosphate(ALP) and xanthine oxidase(XO) activities. On the other hand, $CCl_4$-treated animals injected with CH once($CCl_4$-pretreated animals) showed more decreased serum levels of ALT and XO, and more increased those of ALP rather than $CCl_4$-treated animals. In case of comparing the GST with ALT activity in liver, both $CCl_4$-treated and pretreated animals showed similar changing pattern of enzyme actvity. Especially $CCl_4$-pretreated animals showed significantly increased serum level of GST actvity compared with the $CCl_4$-treated those, whereas those of ALT showed reversed tendency. In aspects of GST enzyme kinetics, $CCl_4$-pretreated animals showed higher Vmax of liver GST enzyme than $CCl_4$-treated animals. In conclusion, injection of CH to the liver damaged rats led to enhanced liver damage and more increased activity of serum GST which may be chiefly caused by the enzyme induction.
To verify the association between GSTM1/GSTT1 gene polymorphisms and susceptibility to autoimmune diseases in Asian population. 18 published reports cited in EMBASE, Google, KISS, MEDLINE and PubMed up to December 2015 were collected for a meta-analysis. The GSTM1/GSTT1 polymorphism for null and present type were analysed separately. The significant association was found between the GST polymorphism and autoimmune diseases in an overall population (GSTM1, OR=1.334, 95% CI=1.137-1.567, p=0.000; GSTT1, OR=1.212, 95% CI=1.012-1.452, p=0.037). Asian population showed the significant association of GSTM1 in the autoimmune diseases, especially vitiligo and atopic dermatitis but non-significant association of GSTT1 in RA and SLE. The GSTM1 null and the GSTT1 present type showed the association with autoimmune diseases in Asian population. The null type frequency of the combination of GSTM1-GSTT1 polymorphism in autoimmune diseases in Asian population was higher than that of the control group. This result indicated that null type of GSTM1-GSTT1 combination can be a risk factor of autoimmune diseases in Asian population.
The mitogen-activated protein(MAP) kinase signal transduction pathway represents an important mechanism by which mitogen, such as serum and PMA, regulate cell proliferation and differentiation. Target substrates of the MAP kinase are located within several compartments containing plasma membranes and nucleus. We now report that serum addition induces proliferation of the P388 murine leukemia cell, but PMA does not, while both serum and PMA treatment cause translocation of the MAP kinase, mainly p42$^{mapk}$ isoform, from cytosol into the nucleus, which was monitored by immunoblot analysis using polyclonal anti-ERK1 antibodies. We investigated whether the MAP kinase was capable of phosphorylating c-Jun protein and GST-fusion proteins, the P562$^{kk}$N-terminal peptides (1-77 or 1-123 domain) of the T cell tyrosine kinase, using the partially purified MAP kinase by SP-sephadex C-50, phenyl superose and Mono Q column chromatography. We found that the partially purified MAP kinase was able to phosphorylate c-Jun protein and the GST-fusion protein expressed using E.coli DH5$\alpha$ which is transformed with pGEX-3Xb plasmid vector carrying of p562$^{kk}$N-terminal peptide-encoding DNA. These results imply that tyrosine kinase receptor/Ras/Raf/MAP kinase pathway is a major mechanism for mitogen-induced cell proliferation in P388 murine leukemia cell and that the various MAP kinase isoforms may have their own target substrates located in distinct subcellular compartments.
To assess effects of contaminants on fish in Nakdong river, feral yellowfin goby Acanthogobius flavimanus were caugt in two different sites and its hepatic monooxygenase enzyme, including cytochrome P450 (CYP), NADPH-cytochrome P450 reductase (P450R), NADH-cytochrome b5 reductase (b5R), ethoxyresorufin deethylase (EROD), glutathione S-transferase (GST) were quantitatively determined. Gonadosomatic index (GSI), hepatosomatic index (HSI) and three sex steroid hormone (17$\beta$-estradiol, E2; testosterone, T; 11-ketotestosterone, 11-KT) levels of the fish were also investigated. HSI of fish from polluted site (site 1) were significantly higher than that of unpolluted site (site 2), but GSI levels were significantly lower in polluted site. No significant differences in plasma 11-KT and T levels were observed in two sites surveyed. E2 level was, however, significantly (p<0.05) higher in female fish from site 1 than site 2. In addition, hepatic EROD activity and CYP level of site 1 fish were lower than those of site 2 fish, whereas relatively high levels of P450R, b5R and GST activities were found in site 1. The results imply that yellowfin goby, especially female fish in Nakdong river estuary are affected from contaminants disrupting sex steroid hormone system.
The delta sleep-inducing peptides (DSIP, Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu) is an important regulatory hormone, controlling hypothalamus and pituitary functions. In the current study, an expression system was designed for the rapid and economic expression oi recombinant DSIP for biophysical studies. Artificially synthesized oligonucleotides encoding DSIP were cloned into a pGEX-KG vector and expressed in E. coli (BL21). The recombinant GST-DSIP was then readily purified using a GST affinity column. To obtain intact DSIP from the GST-DSIP, thrombin cleavage and a CNBr reaction were successively carried out. The DSIP in the CNBr reaction mixture was subjected to RP-HPLC purification to yield 1.2 mg DSIP from a 1 liter culture of E. coli. Identification of the DSIP was peformed using MALDI-MS and an amino acid composition analysis.
Glutathione S-transferase (GST) enzyme levels are associated with risk of many cancers, including hematologic tumours. We here aimed to investigate the relationships between GSTM1, GSTT1 and GSTP1 polymorphisms and the risk of AML. Genotyping of GSTs was based upon duplex polymerase-chain-reactions with the confronting-two-pair primer (PCR-CTPP) method in 163 cases and 204 controls. Individuals carrying null GSTT1 genotype had a 1.64 fold risk of acute leukemia relative to a non-null genotype (P<0.05). A heavy risk was observed in those carrying combination of null genotypes of GSTM1 and GSTT1 and GSTP1 Val allele genotypes when compared with those carrying wild genotypes, with an OR (95% CI) of 3.39 (1.26-9.26) (P<0.05). These findings indicate that genetic variants of GST and especially the GSTT1 gene have a critical function in the development of AML. Our study offers important insights into the molecular etiology of AML.
Scenedesmus spp. were cultured for 51 days in newly developed medium, KEP I (Kim and Ecopeace: initials of corresponding author and environmental company) made with Bacterio-Mineral-Water (3%, v/v) that had been bio-reacted with swine urine medium to 10% (v/v) Bold's Basal medium, and investigated for cancer chemopreventive potential by measuring the induction of quinone reductase (QR), glutathione S-transferase (GST), and reduced glutathione (GSH), and inhibition of cytochrome P450 (CYP) 1A1 activity. The activitives of QR and GST of Scenedesmus spp. cultured in KEP I medium were increased by 3.0-fold and 1.5-fold, respectively. However, Scenedesmus spp. cultured in control medium (CT) increased the activitives of QR and GST by 1.8-fold and 1.3-fold, respectively. Scenedesmus spp. in KEP I medium strongly inhibited CYP 1Al activity. These results show that Scenedesmus spp. in KEP I medium has cancer chemopreventive potential and may be a candidate for further development as a chemopreventive agent.
This study was performed to elucidate the possible antioxidative effects of several wild plant extracts. Wild plants were extracted with methanol or water using general method. In first experiments, antioxidative effects were measured by lipid peroxidation using rat brain homogenate. Coptis japonica extract showed the highest antioxidative activity among the 15 wild plant extracts. In second experiments, rats were fed on the semipurified diets with or without Coptis japonica extracts at the level of 0.5% for 4 weeks. MDA production of liver homogenate were significantly lower in the rats fed Coptis japonica extracts (P<0.05). Cytosolic catalase. GPX, and SOD activities were not changed, whereas the activities of GST and glutathione level were significantly higher in rats fed Coptis japonica extracts (P<0.05). These results suggest that Coptis japonica extract has an antioxidative effect through increasing GST activity and glutathione level and decreasing MDA production.
Induction of phase II enzymes such as quinone reductase (QR) or glutathione S-transferase (GST) is considered a major mechanism of protection against initiation of carcingenesis. This study was desinged to investigate the potential of Astragali Radix Aqua-acupuncture Solution (ARAS) to induce phase II enzymes and glutathione (GSH) in murine hepatoma cells grown in microtiter plate wells. ARAS was potent inducers of QR activity. ARAS was induced about 2.6-fold at concentration of $5{\times}$. In addition, GST activity was increased with ARAS. GSH levels were increased about 1.2-fold with ARAS at concentration of $0.1{\times}$. These results suggested that ARAS may act as blocking agents against carcinogenesis by induction of phase II marker enzymes.
Four-week-old male Korean native chicks (KNC) were assigned to 3 groups with 6 replicates (8 birds/replicate) in each group: a basal diet (CON, 100 ppm of Zn), basal diet fortified with 50 ppm of Zn with zinc oxide (ZnO), or basal diet fortified with 50 ppm of Zn with Zn-methionine (ZnM). Immediately after a 4-week-feeding trial, 6 birds per group were used to evaluate the effects of zinc supplements on antioxidant indicators and the mRNA expression of zinc transport genes. The nitrogen components, lipid peroxidation, and total antioxidant status in blood were not influenced by Zn fortified diets. However, the ZnM group showed a significant (P<0.05) increase in uric acid levels than those in the ZnO group. In the small intestine, superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPX) activities, and malondialdehyde (MDA) level were unaffected by zinc supplements. The activity of glutathione S-transferase (GST) was significantly (P<0.05) enhanced by Zn-methionine supplementation. In the liver, the activity of GST was significantly (P<0.05) increased by Zn-methionine supplement without affecting SOD, GPX, and MDA levels. With respect to the mRNA expression of zinc transport genes, the ZnM group displayed a strong tendency for increases in intestinal ZnT-1 (P=0.09) and ZnT-5 (P=0.06) levels, compared to those in the CON group. Moreover, the ZnM group showed a tendency (P=0.10) for up-regulation of hepatic metallothionein mRNA as compared with the CON group. In conclusion, the Zn-fortified diet with 50 ppm of Zn-methionine helped to improve GST activity and Zn transport gene expression in the small intestine or liver of KNC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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