Conventional staining and fluorescence in situ hybridization (FISH) karyotypes of the non-genetically modified (GM) parental rice line, 'Nakdong' (Oryza sativa L. japonica), and its four GM rice lines, LS28 (event LS30-32-20-1), Cry1Ac1 (event C7-1-9-1), and LS28 ${\times}$ Cry1Ac1 (events L/C1-1-3-1 and L/C1-3-1-1) were analyzed using 5S and 45S rDNAs as probes. Both parental and transgenic lines were diploids (2n=24) with one satellite chromosome pair. The lengths of the prometaphase chromosomes ranged from 1.50 to $6.30{\mu}m$. Four submetacentric and eight metacentric pairs comprised the karyotype of 'Nakdong' and its four GM lines. One pair of 5S rDNA signals was detected near the centromeric region of chromosome g in both the parental and transgenic lines. The 45S rDNA signals were detected on the secondary constrictions of the satellite chromosome pair in both the parental and transgenic lines. There was no significant difference in chromosome size, length, and composition between 'Nakdong' and its four GM lines. This research was conducted as a preliminary study for chromosomal detection of transgenes in GM rice lines and would be useful for their breeding programs.
The study of this experiment is focused on labor saving of healthy rice seedling production using PSF (polypropylene spunbonded fabrics) as thermal protection material. Several factors such as different compositions of nursery soil and PSF materials were tested to produce healthy rice seedlings. The inner thermal protection material in PE film (polyethylene film) showed $0.9-1.7^{\circ}C$ higher than that of PSF 40-100 $\textrm{gm}^{-2}$. The light transmittance-ratio also showed similar trends. It is considered that the appropriate PSF material density was 40 gm$\textrm{gm}^{-2}$ in accordance with economic values and healthy rice seedlings. Plant height and dry weight according to various nursery soil showed the rang-es of 8.5-14.2cm and 5.5-10.0mg, respectively. In composition of nursery soil, artificial soil combined with paddy soil was effective in producing healthy seedling for rice seedling production. The total sugar content also showed the difference between PSF 40, 60 $\textrm{gm}^{-2}$ PE film (0.43-0.52mg FW $\textrm{g}^{-1}$) and PSF 80, 100 $\textrm{gm}^{-2}$ (0.28-0.35mg FW $\textrm{g}^{-1}$) and it showed the same tendency among varieties as well as various nursery soil. These results demonstrate that PSF 40 $\textrm{gm}^{-2}$ economically affordable, and can be recommended as thermal protection material for producing good healthy rice seedling.
Kim, Seung Gyu;Ryu, Jin;Jung, Jae-Won;Sung, Myung-Hwan;Kim, Tae-Kyun
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.35
no.4
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pp.303-308
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2015
Cultivating genetically modified (GM) crops is believed to be a practical solution to meet the increasing food demand, but GM crops are not legal in Korea mainly due to food safety issues. Even though the general public might not be ready to consume GM food, GM crops are imported and consumed as food and feed. To analyze farmers's willingness to grow GM crops for feed, a survey was conducted among crop farmers and 640 valid responses were collected by mail. In the questionnaire, the farmers were asked to select either 'yes' or 'no' if they were willing or not willing to cultivate GM rice and GM grass, respectively, under the given hypothetical income increase rate (i.e., 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, or 70%). Logit regression was used to estimate the two dichotomous choices by explanatory variables including hypothetical income increase rate. The results show that farmers are willing to cultivate GM rice and grass when their income is expected to increase by 47% and 43%, respectively.
For the development of qualitative PCR detection method of genetically modified (CM) rice, rice species-specific gene, OsCc-1 (rice cytochrome c gene), was selected as suitable far use as an endogenous gene in rice. The primer pair OsCytC-5'/3'with 111 bp amplicon was used for PCR amplification of the rice endogenous gene, OsCc-1 and no amplified product was observed from 8 different crops as templates. Qualitative PCR method was carried out with stack traits of L528$\times$CryIAc1 GM rice developed in Korea. For the qualitative PCRs, some primer pairs were designed with a construct-specific and event-specific type based on T-DNA and junction sequences of T-DNA in GM rice. Actck-5'/3' amplifying between actin promoter and OsCK1 gene introduced in LS28 gave rise to an amplicon 306 bp; also, CrLB-5'/3' from CryIAcl and CKRB-5'/3'amplifying the junction region of T-DNA and genome sequence from LS28 as event-specific primers gave rise to an amplicon 142 bp and 91 bp, respectively. These primer pairs for the detection of event-specific targets not produced PCR amplicons on non-CM rice and various crops in contrast to event lines. Therefore, in this study we verified that event-specific primers were effective to specifically detect stack trait lines and demonstrated that this method presented could be provided with the detection-method data for risk assessment analysis of GM rice to be commercialized.
LEE BO-YE;LEE JEONG-HYUN;YOON HOON-SEOK;KANG KYUNG HO;KIM KYUNG-NAM;KIM JAE-HONG;KIM JU-KON;KIM JEONG-KOOK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.6
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pp.1304-1309
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2005
The production of therapeutic proteins for human diseases in plants results in many economic benefits, including reduced risk of animal virus contamination, high yields, and reduced production and storage costs. Human cytokines, interleukin-11 (hlL-11) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (hGM-CSF), cDNAs were introduced into rice or tobacco, using either the maize ubiquitin promoter or the 35S promoter. The primary hIL-11 transgenic rice plants exhibited stunted growth and a sterile phenotype, whereas the hIL-11 transgenic tobacco plants did not. This suggests that hIL-11 expression in rice disrupts the normal growth and development of the plant. The regeneration efficiency of rice calli transformed with hGM-CSF was found to be approximately a quarter of that seen with the hIL-11, suggesting that hGM-CSF expression is more deleterious to the regeneration of rice calli than is hIL-11. However, the surviving hGM-CSF transgenic rice plants exhibited a normal phenotype of growth. Therefore, it appears that only those transgenic rice lines that expressed the human cytokines in small quantities were able to survive the selection process.
Sharma Niti;Park Seung Moon;Kwon Tae Ho;Kim Dae Hyuk;Yang Moon Sik
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.9
no.6
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pp.423-427
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2004
A simple purification procedure of bioactive human granulocyte macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) secreted in rice cell suspension culture has previously been described. In this study the protein was purified to apparent homogeneity with an overall yield of $80.1\%$ by ammonium sulfate precipitation and a single chromatographic step involving FPLCanion exchange chromatography. The purified hGM-CSF revealed at least five glycosylated forms ranging from $21.5{\~}29$ kDa, and its biological activity was independent of the glycosylation pattern. This is the first purification report of recombinant hGM-CSF to apparent homogeneity from rice cell suspension cultures.
Recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) regulates proliferation and differentiation of hematopoietic progenitor cells and modulates function of the mature hematopoietic cells. In the previous study, we reported that hGM-CSF could be produced in transgenic rice cell suspension culture, termed rhGM-CSF. In the present study we examined the single and repeated dose toxicity of rice cells-derived hGM-CSF in SD rats. During single dose toxicity study for 7 days, there were no any toxic effects at any dose of from 10 to $1000{\mu}g/kg$. The lethal dose ($LD_{50}$) was not found in this range. Moreover, repeated dose toxicity study of 14-days period and at the doses of 50 and $200{\mu}g/kg$ (i. v.) of rhGM-CSF did not show any changes in food and water intake. There were also no significant changes in both body and organ weights between the control and the test groups. The hematological and blood biochemical parameters were statistically not different in all the groups. These results suggest that rhGM-CSF has no toxicity in SD rats.
GM-CSF is a multipotent growth factor, which also plays an important role during the process of wound healing. rrhGM-CSF was specifically produced from rice cell culture in our laboratory (Hanson Biotech Co., Ltd, Daejeon). The rrhGMCSF contains more oligosaccharide side chains than any other types of GM-CSF. This work was taken to evaluate the influence on wound healing of rrhGM-CSF in male golden hamsters. Full thickness skin defects of 9 mm in diameter were made in the back of hamsters, and 100 ${\mu}L$ ointment containing rrhGM-CSF 50 ${\mu}g/mL$ was applied. Control groups were given ointment without rrhGM-CSF. The wound sizes were relatively reduced and skin was well regenerated in the experimental group compared with the control group. Structurally, reepithelialization and architecture of the skin following injury were well accomplished in the experimental group. And also, positive reaction of PCNA of the skin following injury was more prominent in rrhGM-CSF containing ointment treatment group. Since this type of GM-CSF has highly glycosylated side chains, the effectiveness might be retain longer and stable, regarding acceleration of wound healing in the animal model. The present study has important implications for further development of the therapeutic manipulation of wound healing using rrhGM-CSF.
Woo, Hee-Jong;Shin, Kong-Sik;Lim, Myung-Ho;Park, Soon Ki
Journal of Plant Biotechnology
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v.41
no.4
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pp.206-211
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2014
Nutritional assessment of transgenic crops to improve safety evaluations is important for food production. An oxidative stress-tolerant rice was generated by stable insertion of the TC gene-a tocopherol cyclase isolated from tobacco-into the genome of a common variety of japonica colored rice. The nutritional composition of the brown rice grains from the transgenic TC line was compared with that of the parental rice cultivar Heugnambyeo and two different varieties of non-transgenic rice. The results indicate that the analyzed nutritional compositions of the brown grains from the transgenic TC line were within the range of values reported for other commercial lines, and measurements of nutritional compositions were equivalent to those of the non-transgenic rice.
Journal of the Korean Society of International Agriculture
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v.23
no.5
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pp.570-577
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2011
We developed insect-resistant GM rice(Bt transgenic rice) by inserting the mCry1Ac1 a modified gene from the soil bacterium, Bacillus thuringiensis. The Bt transgenic rice expressing the Bttoxin mCry1Ac1 was tested for the effects on survival of Misgurnus anguillicaudatus and Cyprinus carpio, commonly used as a model organism in ecotoxicological studies. M. anguillicaudatus and C. carpio fed 100% ground rice in suspension, using either Bt rice or non-GM counterpart rice(Nakdong). The Bt rice used for the test were confirmed to have the mCry1Ac1 gene expression by the immuno-strip and ELISA analysis. Feeding test showed that no significant differences in cumulative immobility and abnormal response of M. anguillicaudatus and C. carpio fed on between Bt rice and non-GM counterpart rice. The 96hr-LC50 values showed no difference between Bt rice(>1,000mg/L) and non-GM rice(>1,000mg/L). We concluded that there was no significant difference in toxicity for non-target organisms(M. anguillicaudatus and C. carpio) between Bt rice and non-GM counterparts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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