Rapeseed is a typical winter crop, and its freezing stress tolerance is a major feature for winter survival. Therefore, it is important to comprehend clearly the physical and molecular mechanisms of rapeseed under freezing stress conditions. This study investigates the physical and transcriptome changes of two rapeseed lines, 'J8634-B-30' and 'EMS26', under cold acclimation and freezing temperature treatments. The proline content of 'J8634-B-30' at 5 ℃ increased 8.7-fold compared to that before treatment, and there was no significant change in that of 'EMS26' RNA-sequencing analysis revealed 5,083 differentially expressed genes (DEGs) of 'J8634-B-30' under cold acclimation condition. Among the genes, 2,784 (54.8%) were up-regulated and 2,299 (45.2%) were down-regulated. The DEGs of 'EMS26' under cold acclimation condition were 5,831 genes, and contained 2,199 up-regulated genes (37.7%) and 3,632 down-regulated genes (62.3%). Among them, only DEGs annotated in the cold response-related signaling pathways were selected, and their expression in the two rapeseed lines was compared. Comparative DEGs analysis indicated that cold response related signaling pathways are proline metabolism and ABA (Abscisic acid) signaling. And ICE (Inducer of CBF expression) - CBF (C-repeat-binding factor) - COR (Cold-regulated) signaling were the significantly differentially expressed transcripts in the two rapeseed lines. The major induced transcripts of 'J8634-B-30' induced P5CS (Δ'-pyrroline-5-carboxylate synthetase), which is related to proline biosynthesis, PYL (pyrabactin resistance-like protein, ABA receptor) and COR413 (cold-regulated 413 plasma membrane 1). In conclusion, these result provide a foundation for understanding the mechanisms of freezing stress tolerance in rapeseeds. Further functional studies should be performed on the freezing stress-related genes identified in this study, which can contribute to the transgenic and molecular breeding for freezing stress tolerance in rapeseed.
The objective of this experiment was to determine the effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFAs)-enriched diet supplemented with different levels of $\alpha$-tocopherol on the activities of hepatic lipogenic-related enzymes and the contents of liver and plasma lipid fractions in laying Tsaiya ducks. A total of 180 30-wk-old laying Tsaiya ducks, at the beginning of peak production, were allotted into 6 treatments with 3 replicates each. Ducks were fed one of the 6 experimental diets, containing 4% tallow (control), and 4% fish oil supplemented with graded levels of $\alpha$-tocopheryl acetate ($\alpha$-tocopherol) at 0, 100, 200, 300 and 400 mg/kg, respectively, for 6 wks. Feed and water were supplied ad libitum throughout the experimental period. The results indicated that the n-3 PUFAsenriched diet supplemented with different levels of $\alpha$-tocopherol did not affect (p>0.05) egg weight, feed intake, body weight change or liver and abdominal fat weights. Egg production, egg mass and feed efficiency significantly (p<0.05) improved as dietary $\alpha$-tocopherol levels increased. The activities of hepatic lipogenic-related enzymes including acetyl-CoA carboxylase (EC 6. 2. 1. 3; ACC), glucose-6-phosphate dehydrogenase (EC 1. 1. 1. 49; G-6-PDH), ATP-citrate cleavage enzyme (EC 4. 1. 3. 8; CCE), NADP-malate dehydrogenase (EC 1.1.1.40; NADP-MDH) and fatty acid synthetase (FAS) were higher (p<0.05) in birds fed with the tallow diet than in those fed with fish oil diets and increased with increasing dietary $\alpha$-tocopherol levels. None of the dietary treatments significantly affected the contents of triglyceride and total cholesterol in the liver, or total cholesterol, phospholipid and total lipid in the plasma. However, the contents of phospholipid and total lipid in the liver, and triglyceride in the plasma increased as dietary $\alpha$-tocopherol levels increased. Increasing dietary $\alpha$-tocopherol levels decreased the non-esterified fatty acid (NEFA) content in the plasma and trended to decrease the cholesterol contents in the egg yolk. The lipid metabolism of laying Tsaiya ducks was influenced not only by the dietary fat but also by the supplementation levels of $\alpha$-tocopherol.
The hepatoprotective activity of flavonol glycosides rich fraction (F-2), prepared from 70% alcohol extract of the aerial parts of V calcarata Desf., was evaluated in a rat model with a liver injury induced by daily oral administration of $CCl_4$ (100 mg/kg, b.w) for four weeks. Treatment of the animals with F-2 using a dose of (25 mg/kg, b.w) during the induction of hepatic damage by $CCl_4$ significantly reduced the indices of liver injuries. The hepatoprotective effects of F-2 significantly reduced the elevated levels of the following serum enzymes: alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), alkaline phosphatase (ALP) and lactate dehydrogenase (LDH). The antioxidant activity of F-2 markedly ameliorated the antioxidant parameters including glutathione (GSH) content, glutathione peroxidase (GSH-Px), superoxide dismutase (SOD), plasma catalase (CAT) and packed erythrocytes glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) to be comparable with normal control levels. In addition, it normalized liver malondialdehyde (MDA) levels and creatinine concentration. Chromatographic purification of F-2 resulted in the isolation of two flavonol glycosides that rarely occur in the plant kingdom, identified as quercetin-3,5-di-O-$\beta$-D-diglucoside (5) and kaempferol-3,5-di-O-$\beta$-D-diglucoside (4) in addition to the three known compounds identified as quercetin-3-O-$\alpha$-L-rhamnosyl- (${\rightarrow}6$)-$\beta$-D-glucoside [rutin, 3], quercetin-3-O-$\beta$-D-glucoside [isoquercitrin, 2] and kaempferol-3-O-$\beta$-D-glucoside [astragalin, 1]. These compounds were identified based on interpretation of their physical, chemical, and spectral data. Moreover, the spectrophotometric estimation of the flavonoids content revealed that the aerial parts of the plant contain an appreciable amount of flavonoids (0.89%) calculated as rutin. The data obtained from this study revealed that the flavonol glycosides of F-2 protect the rat liver from hepatic damage induced by $CCl_4$ through inhibition of lipid peroxidation caused by $CCl_4$ reactive free radicals.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.2
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pp.383-387
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2006
To investigate the effect of GyeongshinhaeGihwan 1(GGT1) frequently used as an anti-obesity herbal medicine in oriental medicine on the expression of obesity-related genes, we measured the changes in mRNA levels of these genes by GGT1 in human growth hormone transgenic (hGHTg) obese female rats, and these effects by GGT1 were compared with those of reductil (RD), an anti-obesity drug approved by FDA. Rats received once daily oral administrations of autoclaved water, RD, or GGT1 for 8 weeks. At the end of study, rats were sacrificed and tissues were harvested. Total RNA from adipose tissue, liver and kidney was prepared and the mRNA levels for LPL (lipoprotein lipase), $PPAR{\gamma}$ (peroxisome proliferator activated receptor-gamma), $PPAR{\delta}$ (peroxisome proliferator activated receptor-delta), leptin, $TNF{\alpha}$ (tumor necrosis factor-alpha), and internal standard G3PDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) were analyzed by RT-PCR. Compared with control group, $PPAR{\gamma}$ mRNA levels of liver and kidney were decreased in both RD and GGT1 groups, and the effects were more prominent in GGT1 group than in RD group, suggesting that GGT1 is effective in the inhibition of lipid storage by decreasing the $PPAR{\gamma}$ expression. $PPAR{\delta}$ mRNA levels of adipose tissue were increased by RD and GGT1 compared with DW, and the magnitude of increase were higher in GGT1 group than in RD group, indicating that GGT1 stimulates fatty acid oxidation and energy metabolism by activating $PPAR{\delta}$ expression. GGT1 group had higher concentrations of serum leptin, a well-known inhibitor of appetite, than control and RD groups. However, The mRNA levels of leptin, LPL, and $TNF{\alpha}$ were not changed by GGT1. These results indicate that GGT1 can prevent obesity in hGHTg obese female rats by down-regulating and up-regulating the mRNA expression of $PPAR{\gamma}$ and $PPAR{\delta}$, respectively, and that this anti-obesity effects were more pronounced in GGT1 group compared with RD group. In addition, GGT1 seems to inhibit obesity by increasing the circulating leptin levels.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.1
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pp.93-97
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2006
To investigate whether GyeongshinhaeGihwan 1(GGT1), an anti-obesity herbal medicine widely used in oriental medicine, regulates the expression of obesity-related genes, we measured the changes in mRNA levels of these genes by GGT1 in human growth hormone transgenic (hGHTg) obese male rats, and these effects by GGT1 were compared with those of reductil (RD), an anti-obesity drug approved by FDA. Rats received once daily oral administrations of autoclaved water, RD, or GGT1 for 8 weeks. At the end of study, rats were sacrificed and tissues were harvested. Total RNA from adipose tissue, liver and kidney was prepared and the mRNA levels for LPL (lipoprotein lipase), PPAR $\gamma$ (peroxisome proliferator activated receptor-gamma), PPAR$\delta$ (peroxisome proliferator activated receptor-delta), leptin, TNF$\alpha$ (tumor necrosis factor-alpha), and internal standard G3PDH (glyceraldehyde-3- phosphate dehydrogenase) were analyzed by RT-PCR. PPAR$\gamma$ mRNA levels of liver and kidney were decreased in drug-treated groups compared with control group and the decrease of PPAR$\gamma$ expression was more prominent in GGT1 group than in RD group, suggesting that GGT1 is effective in the inhibition of adipogenesis and lipid storage by decreasing the PPAR$\gamma$ expression. In contrast, PPAR$\delta$ mRNA levels of adipose tissue and kidney were increased by RD and GGT1 , and the magnitudes of increase were higher in GGT1 group than in RD group, indicating that GGT1 stimulates fatty acid oxidation and energy metabolism by activating PPAR$\delta$ expression, Compared with control and RD groups, GGT1 group had higher concentrations of serum leptin, a well-known inhibitor of appetite. However, The mRNA levels of leptin, LPL, and TNF$\alpha$ were not changed by GGT1 and RD, compared with DW. These results demonstrate that GGT1 not only decreases PPAR$\gamma$ expression of liver and kidney, but also increases PPAR$\delta$ expression of adipose tissue and kidney, leading to the regulation of obesity and that these effects were more pronounced in GGT1 group compared with RD group. In addition, GGT1 seems to prevent obesity by increasing the serum leptin levels.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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