Park, Dong-Suk;Go, Seung-Joo;Ryu, Jin-Chang;Sung, Jae-Mo
The Korean Journal of Mycology
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v.27
no.1
s.88
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pp.39-43
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1999
The internal transcribed spacer II regions (ITS II) of the ribosomal DNA gene repeat from Ganoderma spp. were amplified using polymerase chain reaction (PCR) and sequenced. Sequences from 9 species including Ganoderma lucidum, G. tsugae, G. pfeifferi, G. resinaceum, G. australe-applanatum, G. oregonense, G. neo-japonicum, G. applanatum and Inonotus xeranticus as an out-group were compared. The spacer regions of them were $247{\sim}257$ nucleotides in length and contained partial sequences of 5.8S and 25S gene. The reciprocal homologies of each ITS II sequence of the species were in the range of $70{\sim}100%$ except outgroup species, I. xeranticus. According to the analysis of ITS II sequences, Ganoderma spp. constructed 5 clusters. Ganoderma lucidum isolates were to be divided into two groups. One group was consisted of isolates from South Korea. The other group comprised isolates from UK. G. lucidum isolates belonging to the group I were closely related with G. tsugae. These results suggested that G. lucidum from Korea should be G. tsugae, otherwise G. tsugae was to be synonym of G. lucidum.
The tRNA structure contains conserved modifications that are responsible for its stability and are involved in the initiation and accuracy of the translation process. tRNA modification enzymes are prevalent in bacteria, archaea, and eukaryotes. tRNA Gm18 methyltransferase (TrmH) and tRNA $m^1G37$ methyltransferase (TrmD) are prevalent and essential enzymes in bacterial populations. TrmH involves itself in methylation process at the 2'-OH group of ribose at the 18th position of guanosine (G) in tRNAs. TrmD methylates the G residue next to the anticodon in selected tRNA subsets. Initially, $m^1G37$ modification was reported to take place on three conserved tRNA subsets ($tRNA^{Arg}$, $tRNA^{Leu}$, $tRNA^{Pro}$); later on, few archaea and eukaryotes organisms revealed that other tRNAs also have the $m^1G37$ modification. The present study reveals Gm18, $m^1G37$ modification, and positions of $m^1G$ that take place next to the anticodon in tRNA sequences. We selected extremophile organisms and attempted to retrieve the $m^1G$ and Gm18 modification bases in tRNA sequences. Results showed that the Gm18 modification G residue occurs in all tRNA subsets except three tRNAs ($tRNA^{Met}$, $tRNA^{Pro}$, $tRNA^{Val}$). Whereas the $m^1G37$ modification base G is formed only on $tRNA^{Arg}$, $tRNA^{Leu}$, $tRNA^{Pro}$, and $tRNA^{His}$, the rest of the tRNAs contain adenine (A) next to the anticodon. Thus, we hypothesize that Gm18 modification and $m^1G$ modification occur irrespective of a G residue in tRNAs.
The internal regions of nuclear small subunit rRNA from 6 plaeurotus species and 5 Pleurotus ostreatus strains were amplified by PCR and sequenced. The DNA sequences of 8 Pleurotus strains (P. ostreatus NFFA2, NFFA4501, NFFA4001, KFFA4001, KFCC11635, P florida, P. florida, P. sajor-cuju, P. pulmonarius, and P. spodoleucus) were idential, but P. cornucopiae differed from them in two bases out of 605 bases. However, p[hylogenetic analysis of the sequences by DNA-distance matrix and UPGMA methods showed that P. ostreatus NFFA2m1 and NFFA2m2, known as mutants of P. ostreatus NFFA2, belonged to anther group of Basidiomycotina, which is close to the genus Auricularia. The difference of the SSU rDNA sequences of P. cornucopiae from other Pleurotus species tested corresponds to the difference of mitochondrial plasmid type present in Pleurotus species as observed by Kim et al. (1993, Korean J. Microbiol. 31, 141-147).ishement of silencing at the HMR/hsp82 locus can occur in G1-arrested cells. Cell cycle arrest at G1 phase was achieved by treatment of early log a cell cultures with .alpha.-factor mating pheromone, which induces G1 arrest. The result suggests that passage through S phase (and therefore DNA replication) is nor required for re-establishing silencer-mediated repression at the HMNRa/HSP82 locus. Finally, to test whether de nono protein synthesis is required for re-establishment of silencer-mediated repression, cells were pretreated with cycloheximide (500 /.mu.g/ml) 120 min. It was apparent that inhibiting protein synthesis delays, but does not prevent, re-establishment of silencer-mediated repression. Altogether, these results indicate that re-establishment of silencer-mediated repression is not dependent on the DNA replication and has no requirement for protein synthesis.
Prolactin is considered to influence the taking of pauses in between ovulatory sequences in White Leghorn hens. Therefore modulating concentrations of prolactin using bromocriptine - a dopamine agonist during early life (17 to 36 weeks of age) could overcome the inhibitory effects of high concentration of prolactin on ovarian activity. The effect of modulation of prolactin concentration on egg production, sequence length and inter sequence pauses were studied by analyzing the oviposition records from 19 to 72 weeks were studied and compared with untreated controls. Bromocriptine administered subcutaneously (100 $\mu$g kg$^{-1}$ body weight or orally through feed (640 $\mu$g day$^{-1}$ bird$^{-1}$) resulted in a steady and sustained decrease in prolactin levels (p<0.01) during and after the withdrawal of treatment up to one reproductive cycle (72 weeks of age). The treated birds had comparatively longer sequences (p<0.01) and fewer pauses (p<0.01). Egg production increased (p<0.01) by fourteen per cent through subcutaneous administration and eleven per cent through oral feeding, over the control birds. It is concluded that the physiological pauses that occur during ovulatory sequences can be disrupted effectively using bromocriptine. Prolactin levels are modulated which may interfere with the follicular recruitment and subsequent oviposition thereby improve egg laying potential of the bird.
The function of 5S rRNA, a constituent of a large subunit of ribosome, is not clearly known yet. To identify RNA motifs interacting with 5S rRNA, and thereby to get an insight into the function of 5S rRNA in the ribosome, a SELEX (Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment) experiment was performed. RNA molecules binding to Escherichia coli 5S rRNA were selected from a 48-mer random sequence library through 12 rounds of selection, cloned, and sequenced. Two groups of the selected RNA molecules had the consensus sequences GCGG and GUGAAA, respectively, which are present in the segment, G688 through A696, of E. coli 16S rRNA. The gel mobility shift assay showed that 5S rRNA interacted with the 16S rRNA fragment containing the GCGG and GUGAAA sequences. The enzymatic protection experiment shows that the A29CCUGA34 and G51AAGUG56 sequences of 5S rRNA and the C680AGG683 and G688CGG691 sequences of the 16S rRNA fragment are involved in the interaction between the two RNA molecules. On the basis of this observation, we suggest that 5S rRNA and 16S rRNA play a role for the association of two ribosomal subunits.
Kim, Iksoo;Lee, Kwang-Sik;Jin, Byung-Rae;Lee, Young-Sin;Ryu, Kang-Sun
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.7
no.1
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pp.37-44
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2003
Alcohol dehydrogenases (AHDs) are enzymes responsible for the catalysis of the reversible conversion of various alcohols to their corresponding aldehydes and ketonesis. Until now cDNA sequences of ADH gene is informed exclusively from several diptean species. We describe here the cDNA sequence and mRNA expression of a putative ADH gene from the mole cricket, Gryllotalpa orientalis, and phylogenetic relationships among known insect ADHs. The G. orientalis ADH cDNA sequences comprised of 798 bp encoding 266 amino acid residues. The multiple sequence alignment of G. orientalis ADH gene and known dipteran ADHs shared 100% identity in the nine amino acid residues that are important for the enzymatic activity in Drosophila melanogaster. Percent sequence identity ranged from 25% to 32% among all insect ADHs including both types of ADHs. G. orientalis ADH gene showed no clear resemblance to any dipteran species and type. Phylogenetic analysis of the deduced amino acid sequences of G. orientalis ADH gene with available dipteran ADH genes including both types of ADHs further confirmed that the G. orientalis ADH gene is not clearly assigned to either type of ADHs. Northern blot analysis revealed a stronger signal in the fat body than midgut and epidermis, indicating that the fat body possibly is a main site for the synthesis of the G. orientalis ADH protein.
Previously, we reported that the osmolarity conditions in the satellite region were affected CpG DNA methylation status while Pre-1 sequence was not affected CpG DNA methylation in pNT blastocyst stage. This study was conducted to investigate the DNA methylation status of repeat sequences in pig nuclear transfer (pNT) embryos produced under different osmolarity culture conditions. Control group of pNT embryos was cultured in PZM-3 for six days. Other two treatment groups of pNT embryos were cultured in modified PZM-3 with 138 mM NaCl or 0.05 M sucrose (mPZM-3, 320 mOsmol) for two days, and then cultured in PZM-3 (270 mOsmol) for four days. The DNA methylation status of the Pre-1 sequences in blastocysts was characterized using a bisulfite-sequencing method. Intriguingly, in the present study, we found the unique DNA methylation at several non-CpG sequences at the Pre-1 sequences in all groups. The non-CpG methylation was hypermethylated in all three groups, including in vivo group (86.90% of PZM-3; 83.87% of NaCl; 84.82% of sucrose; 90.94% of in vivo embryos). To determine whether certain non-CpG methylated sites were preferentially methylated, we also investigated the methylation degree of CpA, CpT and CpC. Excepting in vivo group, preference of methylation was CpT>CpC>CpA in all three groups investigated. These results indicate that DNA methylation of Pre-1 sequences was hypermethylated in CpG as well as non-CpG site, regardless modification of osmolarity in a culture media.
Only one natural promoter that interacts with bacteriophage K11 RNA polymerase has so far been identified. To identify more, in the present study restriction fragments of the phage genome were individually assayed for transcription activity in vitro. The K11 genome was digested with two 4-bp-recognizing restriction enzymes, and the fragments cloned in pUC119 were assayed with purified K11 RNA polymerase. Eight K11 promoter-bearing fragments were isolated and sequenced. We report that the nine K11 promoter sequences (including the one previously identified) were highly homologous from -17 to +4, relative to the initiation site at +1. Interestingly, five had -10G and -8A, while the other four had -10A and -8C. The consensus sequences with the natural -10G/-8A and -10A/-8C, and their variants with -10G/-8C and -10A/-8A, showed nearly equal transcription activity, suggesting residues at -10 and -8 do not regulate promoter activity. Using hybridization methods, physical positions of the cloned promoter-bearing sequences were mapped on SalI-and KpnI-restriction maps of the K11 genome. The flanking sequences of six cloned K11 promoters were found to be orthologous with T7 or T3 genomic sequences.
Background: Infections of cats with Echinococcus granulosus is uncommon because the cat is not part of the parasite life cycle that a carnivorous and another herbivore represent. Nevertheless, it occurs incidentally when eating food or drinking water contaminated with the worm's larva, especially with the presence of the definitive host (dogs), in this case, the infections are concentrated in stray or outside cats. For this reason, this study examined the possibility of cat infection with E. granulosus and diagnosed the common genotype of this infection. Objective: This study examined the possibility of cat infection with E. granulosus and diagnosed the common genotype of this infection. Methods: Four of the 37 cats that had died in different accidents developed cystic echinococcosis (CE). The cytochrome c oxidase subunit I (COX1) gene was initially amplified and sequenced to determine if these cysts belonged to E. granulosus, in beginning. The DNA fragments resulting from sequencing were then compared and aligned with other sequences using the Gene Bank database. Finally, a phylogenetic tree was drawn according to the sequence data obtained from cox1 genes sequencing, and the MEGA 7.0 phylogenetic analysis program was utilized. Results: Four different sequences were deposited in the Gen Bank with accession numbers (ON795961 to ON795964), all of which belong to the G1 genotype. Approximately 84% and 100% of these sequences aligned with G1 (AB622277.1) and G1 (MG722980.1), respectively. Conclusions: G1 is the dominant genotype that causes cat infections, even though the cat's EC infection was incidental.
Kim Gi Young;Ha Myoung-Gyu;Cho Eun Seob;Lee Tae-Ho;Lee Sang Jun;Lee Jae-Dong
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.2
no.1
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pp.66-77
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1999
The sequences coding for the 5.8S rDNA and the internal transcribed spacers (ITS1 and ITS 2) from the isolates of nine isolates of Gyrodinium impudicum and two isolates of Gymnodinium sanguineum species were amplified, sequenced and compared with the previously known Alexandrium species and Gymnodinium catenatum. The genetic distance analyses based on the sequence alignment indicated that Gymnodinium catenatum and Gyrodinium impudicum species were some related, Alexandrium species was distant. G. catenatum and G. sanguineum were quite separate, but these two species belonged to the same genus. G. impudicum and G. catenatum forming the closet cluster showed some variation in the alignment of ITS regions. The length of ITS1 varied more than that of ITS2 and the length of ITS1 and ITS2 was different for each G. impudicum, Gymnodinium and Alexandrium species. Also, the length of ITS1 was shorter than that of ITS2. However, on the sequences of G. sanguineum, the length of ITS1 was longer about 23 nucleotides than that of ITS2. The phylogenetic analysis and rDNA similarity of G. impudicum and G. catenatum $(59\%)$ is higher than the that of G. catenatum and G. sanguineum $(55\%)$. It was thought that the phylogenetic analysis and the genetic distance revealed that G. impudicum and G. catenatum were clearly different species and G. impudicum may belong to the genus of Gymnodinium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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