We isolated nine endophytic fungi from the roots of salt-stressed soybean cultivar Daewonkong and screened them for growth-promoting secondary metabolites. Of all fungal isolates, P-4-3 induced maximum growth promotion of waito-c rice and soybean. Analysis of the culture filtrate of P-4-3 showed the presence of physiologically active gibberellins $GA_1$, $GA_3$, $GA_4$, and $GA_7$, along with physiologically inactive $GA_{15}$ and $GA_{24}$. The plant growth promotion and gibberellin-producing capacity of P-4-3 was much higher than wild-type Gibberella fujikuroi, which was taken as the control during the present study. The fungal isolate P-4-3 was identified as a new strain of Scolecobasidium tshawytschae through the morphological characteristics and phylogenetic analysis of 18S rDNA sequence. Gibberellins production and plant growth promoting ability of genus Scolecobasidium was reported for the first time in the present study.
본 연구에서는 키토메이트, 다이균, IC-66D, 골드보르도, 바이오스팟 등 5종의 친환경농자재의 포도 주요 균류병 병원균 7가지에 대한 생장억제 효과를 검정하였다. 병원균의 생장억제 효과는 친환경농자재 별로 차이를 보였는데, 천연 식물추출물성분인 다이균의 생장억제 효과가 가장 우수하였다. 다이균은 $2,500{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$을 포함한 PDA 배지에서 C. gloeosporioides 04-159를 제외한 병원균의 균사생장을 75% 이상 억제하였다. 키토메이트의 생장억제 효과는 병원균에 따라 큰 차이가 있었는데 $40,000{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$을 함유한 PDA 배지에서 B. cinerea 06-063의 균사생장을 81.1% 억제한 반면에 탄저병균인 C. gloeosporioides 04-159는 6.5% 균사 생장억제율을 보였다. 두 가지 보르도액 제제인 IC-66D와 골드보르도의 생장억제 효과는 흰얼룩 증상의 원인균인 Acremonium sp.을 제외하고 IC-66D가 골드보르도보다 약간 높았다. 바이오스팟은 다이균 다음으로 생장억제 효과가 높았는데 특히 탄저병균인 C. gloeosporioides 04-159에 대해서는 사용한 농자재 중에서 가장 높았다. 키토메이트, 바이오스팟, 골드보르도의 갈색무의병 포자 발아억제율은 같은 농도에서의 균사 생장억제율보다 월등히 높았다. 본 실험은 포도 친환경적병 방제를 위해서는 한 가지 친환경농자재를 사용할 것이 아니라 여러 가지 제제를 다양하게 사용할 것을 제안한다.
Fluctuation of fungal zoospores on agar strips were observed in the rumen of sheep fed three different levels of dietary concentrate, timothy hay: concentrate = 3:0 (AF diet), timothy hay: concentrate = 2:1 (MC diet), timothy hay : concentrate = 1:2 (HC diet) respectively. The number of zoospores on the strip was drastically decreased after morning feed with AF diet. The number was the highest at 0 h ($1.34{\times}10^2/cm^2$), then declined to $2.0{\times}10^3/cm^2$ at 9 h after feeding. In the rumen of animals fed MC diet, the number of zoospores decreased with time after feeding, although the decrement was slower than that with AF diet. During 0-3 h after feeding, number of zoospores was $1.6{\times}10^4/cm^2$. Although the number slightly decreased at 6 and 9 h, relatively high levels were maintained. It seems that the inducers for zoospore-release were maintained at relatively high concentration throughout incubation period. The fluctuation pattern of number of germinated zoospores was different in the rumen of animals fed HC diet from those of AF and MC diets. The number of zoospores was constantly maintained at lower level ($1.0{\times}10^3/cm^2$) than the other diets. For MC diet, continuous high number of germinated zoospores may be due to the continuous release of zoospores by hemes in timothy hay and concentrate feed, and by unknown mechanisms. Unlike AF diet which promoted relatively rapid decline of zoosporogenesis, supplementation of concentrate feed to the timothy hay did not promote such rapid decline of zoosporogenesis. It was suggested that release of inducers for zoosporogenesis from concentrate feed persisted longer time than from timothy hay. HC diet promoted the lowest zoospore production, suggested the lowest fungal population size in this experiment. These results show that an appropriate amount of concentrate may support fungal growth and stimulate zoosporogenesis in the rumen.
Iron plays a key role in host-pathogen interactions. Microbial pathogens require iron for survival and virulence, whereas mammalian hosts sequester and withhold iron as a means of nutritional immunity. We previously identified two paralogous genes, CFT1 and CFT2, which encode homologs of a fungal iron permease, Cft1 and Cft2, respectively, in the human fungal pathogen Cryptococcus neoformans. Cft1 was shown to play a role in the high-affinity reductive iron uptake system, and was required for transferrin utilization and full virulence in mammalian hosts. However, no role of Cft2 has been suggested yet. Here, we identified the third gene, CFT3, that produces an additional fungal iron permease homolog in C. neoformans, and we also generated the cft3 mutant for functional characterization. We aimed to reveal distinct functions of Cft1, Cft2 and Cft3 by analyzing phenotypes of the mutants lacking CFT1, CFT2 and CFT3, respectively. The endogenous promoter of CFT1, CFT2 and CFT3 was replaced with the inducible GAL7 promoter in the wild-type strain or in the cft1 mutant for gain-of-function analysis. Using these strains, we were able to find that CFT2 is required for growth in low-iron conditions in the absence of CFT1 and that overexpression of CFT2 compensates for deficiency of the cft1 mutant in iron uptake and various cellular stress conditions. However, unlike CFT2, no clear phenotypic characteristic of the cft3 mutant and the strain overexpressing CFT3 was observed. Overall, our data suggested a redundant role of Cft2 in the high-affinity iron uptake and stress responses in C. neoformans.
Tricholoma matsutake is an ectomycorrhizal fungus that has a symbiotic relationship with the root of Pinus densiflora. Soil microbial communities greatly affect the growth of T. matsutake, however, few studies have examined the characteristics of these communities. In the present study, we analyzed soil fungal communities from Gyeongju and Yeongdeok using metagenomic pyrosequencing to investigate differences in fungal species diversity, richness, and taxonomic composition between the soil under T. matsutake fruiting bodies (Sample 2) and soil where the fairy ring of T. matsutake was no longer present (Sample 1). The same spot was investigated three times at intervals of four months to observe changes in the community. In the samples from Yeongdeok, the number of valid reads was lower than that at Gyeongju. The operational taxonomic units of most Sample 2 groups were less than those of Sample 1 groups, indicating that fungal diversity was low in the T. matsutake-dominant soil. The soil under the T. matsutake fruiting bodies was dominated by more than 51% T. matsutake. From fall to the following spring, the ratio of T. matsutake decreased. Basidiomycota was the dominant phylum in most samples. G-F1-2, G-F2-2, and Y-F1-2 had the genera Tricholoma, Umbelopsis, Oidiodendron, Sagenomella, Cladophialophora, and Phialocephala in common. G-F1-1, G-F2-1, and Y-F1-1 had 10 genera including Umbelopsis and Sagenomella in common. From fall to the following spring, the amount of phyla Basidiomycota and Mucoromycota gradually decreased but that of phylum Ascomycota increased. We suggest that the genus Umbelopsis is positively related to T. matsutake.
Shuhan Zhang;Junyou Han;Ning Liu;Jingyuan Sun;Huchen Chen;Jinglin Xia;Huiyan Ju;Shouan Liu
Journal of Ginseng Research
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제47권6호
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pp.773-783
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2023
Background: Gray mold, caused by Botrytis cinerea, is one of the major fungal diseases in agriculture. Biological methods are preferred over chemical fungicides to control gray mold since they are less toxic to the environment and could induce the resistance to pathogens in plants. In this work, we try to understand if ginseng defense to B. cinerea could be induced by fungal hypovirulent strain △BcSpd1. BcSpd1 encodes Zn(II)2Cys6 transcription factor which regulates fungal pathogenicity and we recently reported △BcSpd1 mutants reduced fungal virulence. Methods: We performed transcriptomic analysis of the host to investigate the induced defense response of ginseng treated by B. cinerea △BcSpd1. The metabolites in ginseng flavonoids pathway were determined by UPLC-ESI-MS/MS and the antifungal activates were then performed. Results: We found that △BcSpd1 enhanced the ginseng defense response when applied to healthy ginseng leaves and further changed the metabolism of flavonoids. Compared with untreated plants, the application of △BcSpd1 on ginseng leaves significantly increased the accumulation of p-coumaric acid and myricetin, which could inhibit the fungal growth. Conclusion: B. cinerea △BcSpd1 could effectively induce the medicinal plant defense and is referred to as the biological control agent in ginseng disease management.
Park, Sook-Young;Chi, Myoung-Hwan;Milgroom, Michael G.;Kim, Hyo-Jung;Han, Seong-Sook;Kang, Seog-Chan;Lee, Yong-Hwan
The Plant Pathology Journal
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제26권4호
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pp.313-320
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2010
Genetic instability of the rice blast fungus Magnaporthe oryzae has been suggested as a major factor underlying the rapid breakdown of host resistance in the field. However, little information is available on the mechanism of genetic instability. In this study, we assessed the stability of repetitive DNA elements and several key phenotypic traits important for pathogenesis after serially transferring two isolates though rice plants and an artificial medium. Using isolate 70-15, we obtained a total of 176 single-spore isolates from 10 successive rounds of culturing on artificial medium. Another 20 isolates were obtained from germ tubes formed at the basal and apical cells of 10 three-celled conidia. Additionally, 60 isolates were obtained from isolate KJ201 after serial transfers through rice plants and an artificial medium. No apparent differences in phenotypes, including mycelial growth, conidial morphologies, conidiation, conidial germination, appressorium formation, and virulence, or in DNA fingerprints using MGR586, MAGGY, Pot2, LINE, MG-SINE and PWL2 as probes were observed among isolates from the same parent isolate. Southern hybridization and sequence analysis of two avirulence genes, AVR-Pita1 and AVR-Pikm, showed that both genes were also maintained stably during 10 successive generations on medium and plants. However, one reversible loss of restriction fragments was found in the telomere-linked helicase gene (TLH1) family, suggesting some telomere regions may be more unstable than the rest of the genome. Taken together, our results suggest that phenotype and genotype of M. oryzae isolates do not noticeably change, at least up to 10 successive generations on a cultural medium and in host plants.
Zhao, Xinshan;Huang, Xianjun;Yao, Juntao;Zhou, Yue;Jia, Rong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권6호
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pp.803-813
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2015
The growth of Irpex lacteus F17 and manganese peroxidase (MnP) production in a selfdesigned tray bioreactor, operating in solid-state conditions at a laboratory scale, were studied. The bioreactor was divided into three layers by three perforated trays. Agroindustrial residues were used both as the carrier of bound mycelia and as a nutrient medium for the growth of I. lacteus F17. The maximum biomass production in the bioreactor was detected at 60 h of fermentation, which was consistent with the CO2 releasing rate by the fungus. During the stationary phase of fungal growth, the maximum MnP activity was observed, reaching 950 U/l at 84 h. Scanning electron microscopy images clearly showed the growth situation of mycelia on the support matrix. Furthermore, the MnP produced by I. lacteus F17 in the bioreactor was isolated and purified, and the internal peptide sequences were also identified with mass spectrometry. The optimal activity of the enzyme was detected at pH 7 and 25℃, with a long half-life time of 9 days. In addition, the MnP exhibited significant stability within a broad pH range of 4-7 and at temperature up to 55℃. Besides this, the MnP showed the ability to decolorize the polymeric model dye Poly R-478 in vitro.
Polyphosphate의 Candida albicans와 Trichophyton mentagrophytes에 대한 항진균 작용에 대하여 연구하였다. 평균 사슬길이가 15, 45, 75인 polyphosphate는 진균에 대하여 성장억제 효과를 나타낸 반면, pyrophosphate는 성장억제 효과가 없었다. 사슬길이가 증가함에 따라서 진균 성장억제 효과가 증가하는 것으로 관찰되었으며 $800\;{\mu}g/ml$ 농도에서는 균주의 성장을 완전히 억제시켰다. $Mg^{2+}$나 $Ca^{2+}$의 첨가는 polyphosphate의 성장억제 효과를 감소시켰다. Polyphosphate를 처리한 C. albicans에서는 핵산물질의 유리가 관찰되었으며, 세포 swelling이나 표면돌출과 같은 세포형태 변화도 관찰되었다. 세포막 불투과성 물질인 propidium iodide는 Polyphosphate를 처리한 C. albicans의 핵을 염색하는 것이 관찰되었다. Polyphosphate의 항진균 작용은 polyphosphate가 진균 세포벽이나 세포막의 필수 양이온에 대한 chelation 효과에 의한 것으로 사려된다.
Recently, strategies for controlling Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), the causal agent of Fusarium wilt of tomato, focus on using effective biocontrol agents. In this study, an analysis of the biocontrol and plant growth promoting (PGP) attributes of 11 isolates of loamy soil Bacillus spp. has been conducted. Among them, the isolates B.PNR1 and B.PNR2 inhibited the mycelial growth of Fol by inducing abnormal fungal cell wall structures and cell wall collapse. Moreover, broad-spectrum activity against four other plant pathogenic fungi, F. oxysporum f. sp. cubense race 1 (Foc), Sclerotium rolfsii, Colletotrichum musae, and C. gloeosporioides were noted for these isolates. These two Bacillus isolates produced indole acetic acid, phosphate solubilization enzymes, and amylolytic and cellulolytic enzymes. In the pot experiment, the culture filtrate from B.PNR1 showed greater inhibition of the fungal pathogens and significantly promoted the growth of tomato plants more than those of the other treatments. Isolate B.PNR1, the best biocontrol and PGP, was identified as Bacillus stercoris by its 16S rRNA gene sequence and whole genome sequencing analysis (WGS). The WGS, through genome mining, confirmed that the B.PNR1 genome contained genes/gene cluster of a nonribosomal peptide synthetase/polyketide synthase, such as fengycin, surfactin, bacillaene, subtilosin A, bacilysin, and bacillibactin, which are involved in antagonistic and PGP activities. Therefore, our finding demonstrates the effectiveness of B. stercoris strain B.PNR1 as an antagonist and for plant growth promotion, highlighting the use of this microorganism as a biocontrol agent against the Fusarium wilt pathogen and PGP abilities in tomatoes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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