In order to find the new hepatoprotective agents preliminary screening of twelve prescriptions which have been used for the treatment of hepatic disease in Oriental traditional medicine has been carried out. Both DPPH free radical scavenging and hepatoprotective effect on tacrine-induced cytotoxicity in Hep G2 cells are performed. Osumokkya-tang which is one of the prescription belongs to interior-warming properties showed the DPPH free radical scavenging effect as well as hepatoprotective activity significantly. It is also suggested that its hepatoprotective effect is derived from Chaenomelis Fructus.
The human skin is constantly exposed to environmental irritants such as ultraviolet, smoke, chemicals. Free radicals and reactive oxygen species (ROS) caused by these environmen tal facts play critical roles in cellular damage. These irritants are in themselves damaging to the skin structure but they also participate the immensely complex inflammatory reaction. The purpose of this study was to investigate the skin cell protective effect of Campsis grandiflora extract on the UVB-irradiated human dermal fibroblasts (HDFs). We tested free radical and superoxide scavenging effect in vitro. C. grandiflora extracts had potent radical scavenging effect by 82% at $100{\mu}g/ml$, respectively. For testing intracellular ROS scavenging activity the cultured HDFs were analyzed by increase in DCF fluorescence upon exposure to UVB 20 $MJ/cm^2$ after treatment of C.grandiflora extracts. The results showed that oxidation of CM-DCFDA was inhibited by C.grandiflora extracts effectively and C.grandiflora extracts has a potent free radical scavenging activity in UVB- irradiated HDFs. In ROS imaging using confocal microscope we visualized DCF fluorescence in HDFs directly. In conclusion, our results suggest that C.grandiflora can be effectively used for the prevention of UV-induced adverse skin reactions such as radical production, and skin cell damage.
The polysaccharides from fruit body of Auricularia auricula and Tremella fuciformis were extracted using hot water, and partially purified through ethanol precipitation and dialysis. Free radical scavenging activities of the crude and purified polysaccharides were examined and compared each other. Free radical scavenging activities of the partially purified polysaccharides were higher than those of crude polysaccharides. DPPH free radical, ABTS radical and SOD-like activities of partially purified polysaccharide at 1 mg/mL of concentration from A. auricula were 61.7, 9.6 and 38.9%, respectively, while those of T. fuciformis were 9.6, 5.7 and 15.3%, respectively. Results of site and non-site specific hydroxyl radical scavenging activities indicated that the partially purified polysaccharide fractions from A. auricula and T. fuciformis exhibited the hydroxyl radical scavenging effect by hydrogen donating ability and iron ion chelating ability. Also, reducing powers of A. auricula and T. fuciformis were 77.1 and 14.7% of BHT (0.1%) as standard, respectively. It was suggested that antioxidant activities of A. auricula were about 1.4~6.4 times higher than those of T. fuciformis due to different levels of polyphenol content.
Tocotrienols (T3) are minor plant constituents found abundantly in rice bran, which provide a significant source of vitamin E in animal feeds. T3 was reported to have an intrinsic hypocholesterolemic effect by inhibiting HMG-Co A reductase. It has similar antioxidative properties as tocopherols in food and biological system due to their similar chemical structures. However, the antioxidant activity and mechanism of T3 to scavenge free radicals and to inhibit the peroxidation of linoleic acid are less understood. The purpose of this study was to investigate the scavenging effect of T3 on free radicals and its inhibition of peroxide formation. Free radical scavenging activity was monitored by the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method whereas inhibition of linoleic acid peroxidation was evaluated using the thiocyanate method. Thiobarbituric acid (TBA) test was used to determine malonaldehyde formation from linoleic acid peroxidation. Free radical scavenging activity increased with increasing concentration levels of T3. T3 exhibited 38.2, 78.6, 92.7 and 96.2% radical scavenging activity at concentrations of 2, 8, 32 and 128 ppm, respectively. At 128 ppm, it was highly effective in inhibiting linoleic acid peroxidation. The activity of T3 evaluated by the thiocyanate method showed low absorbance values indicating a high level of antioxidant activity. All treatments showed similar trends in antioxidant activity when evaluated by both the thiocyanate method and TBA test.
Previous studies have shown that methanol extract and its butanol fraction of Carthamus tinctorius L. Semen have the hepatoprotective effect on the CCl4-induced hepatotoxicity. The hepatoprotective effect of the subfractions of butanol fraction has been evaluated by analyzing oxygen free radical scavenging enzyme activities and histopathological examinations. In BS-5 subfraction treated group, the activity of superoxide dismutase has been significantly increased as compared with that of CCl4, treated rats. Antioxidant activity has been evaluated by the examination of the scavenging activity against 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical. BS-5 subfraction has shown strong antioxidant activities. The histopathological examination showed that the treatment of BS-5 subfraction has relieved the ballooning degeneration of hepatocytes which had been generated by CCl4. It appears that the protective effect of BS-5 subfraction would be mediated of the attenuation of lipid peroxidation by acting as a free radical scavenger, which were based on the increase of superoxide dismutase activity.
The optimization and microwave assisted extraction of stem bark of Terminalia arjuna, quantitative estimation of the marker compounds arjunic acid and arjunolic acid using HPTLC and the evaluation of free radical scavenging activity has been performed in this study. The central composite design was used for optimization and the values of parameters for optimized batch of microwave assisted extraction were 1000 W (Power), 3 minutes (Time) and 1/120 (Solid/solvent ratio). The solvent system to carry out the HPTLC was toluene: acetic acid: ethyl acetate (5: 5: 0.5) and quantitative estimation was done using standard equations obtained from the marker compounds. The in-vitro free radical scavenging activity was performed spectrophotometrically using ascorbic acid as standard. The value of estimated percentage yield of arjunic acid and arjunolic acid was 1.42% and 1.52% which upon experimentation was obtained as 1.38% and 1.51% respectively. The DPPH assay of the different batches of microwave assisted extraction and marker compounds taken suggested that the marker compounds arjunic acid and the arjunolic acid were responsible for the free radical scavenging activity as the batch having the maximum percentage yield of the marker compounds showed best free radical scavenging effect as compared to standard ascorbic acid. The $IC_{50}$ value of the optimized batch was found to be 24.72 while that of the standard ascorbic acid was 29.83. Hence, the yield of arjunic acid and arjunolic acid has direct correlation with the free radical scavenging activity of stem bark extract of Terminalia arjuna and have potential to serve as active lead compounds for free radical scavenging activity.
Quercetin and its glycosides showed a strong free radical scavenging effect to DPPH radical generation. However, there were not big differences between quercetin aglycone and glycosides under experimental condition of this study. On the other hand, quercetin had pro-oxidant effect in bleomycin-dependent DNA assay. Quercetin aglycone and its glycosides, quercitrin inhibited $H_2$$O_2$- induced DNA damage in CHL cells. They also have an anticlastogenicity toward DNA breakage agent by radical generation like bleomycin. These results indicate that quercetin aglycone and its glycosides are capable of protecting the free radical generation induced by reactive oxygen species like $H_2$$O_2$. The mechanism of inhibition in hydrogen peroxide-induced genotoxicity may be due to their free radical scavenging properties. Therefore, quercetin aglycone and its glycosides may be useful chemopreventive agents by protecting of free radical generation which are involved in carcinogenesis and aging. However, quercetin and its glycosides must also carefully examined for pro-oxidant properties before being proposed for use in vivo.
본 연구는 캠벨종 포도의 종자와 과피 에탄올 추출물의 추출조건과 그에 따른 DPPH법에 의한 free radical 소거 활성을 비교하여 최적의 추출 조건의 확립과 항산화 활성을 살펴보았다. 추출 조건은 추출 용매인 에탄올의 농도와 추출 온도를 달리 하여 각각의 수율을 비교하였으며, 각 분획물은 hexane 분획물, chloroform 분획물, ethyl acetate 분획물, butanol 분획물 및 물 분획물로 나누어, free radical 소거 활성을 RC$_{50}$으로 나타내었다. 추출 수율은 종자에서는 추출 온도 78$^{\circ}C$, 에탄올 농도 100%에서 11.4%로 다른 온도와 농도 조건에 비하여 높은 수율을 나타냈으며, 과피 에서도 역시 추출 온도 78$^{\circ}C$, 에탄올 농도 100%에서 44.5%로 다른 온도와 농도 조건에 비하여 높은 수율을 나타냈다. 각 분획물 중에서는 물 분획물이 종자에서는 39.2%인데 비하여 과피 에서는 85.6%로 다른 분획물에 비하여 많이 차지하였다. DPPH법에 의한free radical 소거 활성에서는 종자의 경우, 5$0^{\circ}C$ 에탄을 추출물이 RC$_{50}$=16.8 $\mu\textrm{g}$/mL로, 분획물에서는 ethyl acetate 분획물이 RC/syb 50/=15.4 $\mu\textrm{g}$/mL로 가장 높은 활성을 나타내었다. 과피의 경우, 78$^{\circ}C$ 에탄올 추출물이 RC$_{50}$=2437.5 $\mu\textrm{g}$/mL로, 분획물에서는 butanol 분획물이 RC$_{50}$=698.4 $\mu\textrm{g}$/mL로 가장 높은 활성을 나타내었다. 이상의 결과를 통하여 추출 온도와 용매 농도에 따른 수율의 차이가 있었으며 free radical 소거 활성에서는 종자 에탄을 추출물이 과피 에탄올 추출물 보다 145배 이상의 현저히 높은 활성을 나타내었다.을 나타내었다.
To examine the free radical scavenging activities from buckwheat, Suwon No. 5 was extracted with various solvents. The seed of Suwon No. 5 had a high contents of carbohydrate, but the vegetable of that had a 31.4% of protein, 28.6% of ash and 25.7% carbohydrate as moisture free basis. Phenols contents of vegetable extracts had higher than those of seed extracts. Acetone extract of vegetable showed the greatest electron donating ability. Butanol and acetone extracts of vegetable showed high inhibitory effect on lipid peroxidation. Acetone extract of vegetable has also excellent activity in the superoxide radical scavenging activity by xanthine/xanthine oxidase-cytochrome c reduction system. The inhibitory effects of extracts on xanthine oxidase were measured. Acetone extract had the strongest inhibitory effect on xanthine oxidase and $IC_{50}$ was 2.2$\mu\textrm{g}$.
The ethanol extracts of mixed vegetables (Bioactive Vegetables, BV), mixed fruits (Bioactive Fruits, BF) and their liquid formulation (Chungpae Plus , CP) were evaluated for their antioxidative and antigenotoxic activities. They were shown to possess the significant free radical scavenging effect against 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazine (DPPH) radical generation and were revealed to show the inhibitory effect of lipid peroxidation as measured by malondialdehyde (MDA) formation although the potencies were not higher than those of vitamin C. They did not possess any pro-oxidant effect on bleomycin-Fe(III) dependent DNA degradation, whereas vitamin C showed strong pro-oxidant effect. Furthermore, oral administration of BV and BF inhibited micronucleated reticulocyte (MNRET) formation of mouse peripheral blood induced by KBrO3 treatment in vivo. CP also showed significant inhibition under same experimental condition. Therefore, the liquid formulation (CP) containing BV and BF may be a useful natural antioxidative and antigenotoxic agent by scavenging free radicals, inhibition of lipid peroxidation and protecting chromosomal damage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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