Objectives : Transient inflammation has been demonstrated to alter visceral sensory function in animal models and acute mucosal inflammation may precede the manifestation of visceral hyperalgesia. Thus in this study we compared effects of herbal acupuncture of Nidus Vespae (NV) applied to the different acupoints in the acute colitis induced by trinitrobenzenesulphonic acid (TNBS) intracolonic injection in rats. Methods : In Male Sprague-Dawley rats, weighing 250 ~ 400 g, TNBS (5 mg/kg) was infused intrarectally through a silicon rubber catheter into the anus under isoflurane anaesthesia. Under general anesthesia, acupoints of LI4 (Hapkok), SI25 (Cheonchu), ST36 (Joksamni), BL25 (Daejangsu) were intramuscularly injected by NV. Expressions of cFos protein in the periaqueductal gray (PAG), locus coeruleus (LC), nucleus of solitary tract (Sol), and the 6th lumbar spinal cord (L6 s.c.) were observed at 24 hrs after TNBS induced colitis by immunohistochemistry. Results : The expression of c-Fos protein in L6 s.c., Sol, LC and PAG increased 24 hrs after TNBS injection into colorectum as compared to normal group. NV herbal acupuncture also inhibited the expression of c-Fos protein in Sol but not L6 s.c., LC, and PAG. NV to ST36 inhibited significantly the c-Fos expression in Sol and PAG. NV to ST25 inhibited the c-Fos protein expression all over the observation area. NV to BL25 showed the inhibitory effects in the areas except LC. Whether or not a role of endogenous opioids, intrathecal injection of naltrexone (30 ug / 30 ul) was applied before the 2nd herbal acupuncture treatment 24 hrs after TNBS-induced colitis in rat. Naltrexone reversed the inhibition of c-Fos protein expression in the spinal cord and brainstem under different conditions such as type of herbal acupuncture compound and choice of acupoint. Conclusions : In summary, these data show that herbal acupuncture of NV inhibits signal pathways such as spinal cord and brain stem ascending hypersensitivity of colorectum after TNBS induced colitis. This effect may be mediated by acupoints through the endogenous opioid system involving the pain modulation.
목 적 : Ataxia-Telangiectasia (AT) 증은 여러 가지 유전적 결함을 갖는 질병으로 방사선 민감도가 비정상적으로 상승되어 있는 것이 특징이다 AT 환자에서 공통적으로 존재하는 ATM 유전자는 현재까지 방사선 신호전달에 관여하는 것으로 알려진 Pl-3 kinase와 유사한 구조임이 알려져 ATM이 방사선 신호전달경로에 중요한 작용을 할 것으로 추정하게 되었다. 본 연구에서는 AT 세포와 정상세포에 PKCI를 과발현 시킴으로써 방사선 신호전달에 관여하는 PKC를 억제하여 이것이 방사선 민감도에 미치는 영향을 관찰하고, 방사선에 의해 유도되는 early response gene인 c-fos transcription의 차이를 측정하여 ATM과 PKCI에 의한 신호전달이 c-fos 유전자 전사에 미치는 영향을 분석하고자 하였다. 대상 및 방법 : PKCI expression vector를 작제한 후 정상세포인 LM217과 AT세포인 AT5BIVA에 transfection 시킨 후 plasmid의 genomic DNA에 결합된 것은 polymerase chain reaction (PCR) 방법으로 확인하였고 PKCI의 mRNA 발현 여부는 northern blotting으로 확인하였다. 방사선 민감도는 아포토시스로 측정하였으며 PKCI가 과발현된 각 세포주에 5 Gy의 방사선을 조사한 후 48시간에 세포를 모아 TUNEL방법으로 아포토시스 세포의 수를 측정하였다. c-fos 유전자의 전사는 reporter 유전자로 c-fos CAT plsmid를 $\beta$-gal expression vector와 같이 각 세포주에 transfection 시키고 36시간이 지난 후 CAT assay를 하여 activity를 측정하고 동시에 $\beta$-gal assay를 시행하여 transfection 효율을 보정해 주었다. PKCI, Ras의 영향을 보기 위하여는 PKCI, Ras expression vector와 c-fos CAT plasmid를 cotransfection하고 CAT activity로 측정 하였다. 결 과 : 이 실험의 결과 LM과 AT 세포에서 PKCI가 방사선 민감도에 미치는 영향과 c-fos 전사에 미치는 영향을 처음으로 보여주었다. PKCI의 과발현이 LM 세포에서는 방사선 민감도를 증가시켰지만 AT세포에서는 오히려 약간 감소시키는 작용을 나타내었다. c-fos 전사는 AT 세포에서 LM 세포에 비하여 70배 낮게 나타났는데 PKCI가 과발현 됨으로써 LM 에서는 c-fos의 전사가 감소되었지만 AT 세포에서는 영향이 없었다. Ras 단백으로 c-fos를 유도시키고 여기에 PKCI 발현 백터를 contransfection 하면 LM세포에서는 induction 이 감소되었지만 AT 세포에서는 영향이 없었다. 즉 LM과 AT 세포에서의 PKCI에 의한 반응의 차이는 Ras와 관련된 signal transduction pathway라는 것을 알 수 있었다. 결 론 : PKCI는 정상세포에서는 방사선에 의한 세포 손상을 증가시키지만 AT 세포에서는 별 영향을 보이지 않는 것을 알 수 있었으며, 두 세포간의 이러한 차이는 c-fos proto-oncogene의 전사차이로 설명할 수 있겠다. 이러한 차이가 AT 세포의 방사선 민감도의 한 원인일 것으로 생각된다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.89.2-89.2
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2003
Ral GDP dissociation stimulator (Ral GDS) has been found to be an effector protein of Ras, and Ral, a member of small GTP-binding protein (G protein) superfamily, has been suggested to act downstream of Ras. Ral GDP dissociation stimulator-like (RGL) shares 50% amino acid identity with Ral GDP dissociation stimulator, and assumed to possess similar functional role. Using yeast two-hybrid screening, we found that dopamine D3 receptor interacts with RGL. Since RGL is known to regulate the expression of c-fos promoter, effects of D3R on gene expression of c-fos promoter was studied. (omitted)
To determine the anti-stress effect of KCG(加味天麻鉤藤飮) extract on sprague-dawley rats. we conducted a research about the change of weight, activity, reactivity, c-fos protein, cytotoxicity against PC12 cell line and heal shock protein. 1) KCG extract siginificantly inhibited the decrease of body weight induced by stress, compared with the control group. 2) KCG extract had no siginificant effect in the activity and reactivity of rats between the control and the experimental groups. 3) KCG extract siginificantly restrained c-fos protein manifestation, compared with the control group. 4) KCG extract siginificantly restrained heat shock protein, compared with the control group. These results suggested that KCG might be usefully anti-stress effect.
Park, Jin-Ah;Na, Han-Heom;Jin, Hyeon-Ok;Kim, Keun-Cheol
Molecules and Cells
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제42권12호
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pp.884-892
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2019
Piperlongumine (PL), a natural alkaloid compound isolated from long pepper (Piper longum), can selectively kill cancer cells, but not normal cells, by accumulation of reactive oxygen species (ROS). The objective of this study was to investigate functional roles of expression of SETDB1 and FosB during PL treatment in MCF7 breast cancer cells. PL downregulates SETDB1 expression, and decreased SETDB1 expression enhanced caspase 9 dependent-PARP cleavage during PL-induced cell death. PL treatment generated ROS. ROS inhibitor NAC (N-acetyl cysteine) recovered SETDB1 expression decreased by PL. Decreased SETDB1 expression induced transcriptional activity of FosB during PL treatment. PARP cleavage and positive annexin V level were increased during PL treatment with FosB overexpression whereas PARP cleavage and positive annexin V level were decreased during PL treatment with siFosB transfection, implying that FosB might be a pro-apoptotic protein for induction of cell death in PL-treated MCF7 breast cancer cells. PL induced cell death in A549 lung cancer cells, but molecular changes involved in the induction of these cell deaths might be different. These results suggest that SETDB1 mediated FosB expression may induce cell death in PL-treated MCF7 breast cancer cells.
Objective : Acupuncture and herbal medicine have been used to prevent and treat cerebrovascular accident, such as stroke, and many studies of acupuncture and moxibustion concerning stroke have been undertaken in humans and various animals. However, the protective effect of the electroacupuncture (EA) of Huan-do (GB30) on the transient forebrain ischemia injury has not been published. Methods : The nenroprotective effects of EA (2 ms, 10 Hz, and 1 - 2 mA) of GB30 on the transient forebrain ischemia injury were investigated by immunohistochemistry of c-Fos-like protein in Sprague-Dawley rats. Results : The transient forebrain ischemia injury resulted in increased expression of c-Fos-like protein (cFL) in the dentate gyms (DG) and CAl for 6 hrs after ischemia, and EA increased significantly expression of cFL in the CAl and DG. For 48 hrs after, there was delayed expression of cFL at the CAl and DG, representing the sign of neuronal cell death, but EA decreased the delayed expression of cFL, significantly. Conclusion : These results suggest that the nenroprotective effects of EA on transient forebrain ischemia injury may be related to excitatory regulation of cFL at the early stage and inhibitory regulation in the long term.
Phorbol ester, growth factors activities are mediated by unclear transcription factors, the c-Fos and c-Jun, which can regulate transcriptional activation through specific DNA sites and by forming the transcription factor AP-l, which usually mediates cell proliferation and differentiation signals. We explored effects of Pini Folium extract (API-l) on AP-l activity. Western blot analysis confirmed that API-l decreased levels of c-Fos or c-Jun protein induced by the tumor promoter Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA; 200 nM). Transient transfection assays with a c-fos promoter reporter construct showed that API-l decreased transcription activity by ore than 50~60%. However, treatment of API-l activity studied further. The main substances were fractionated into dichloromethane layer. Futhermore, API-l extract repressed the [$^3H$]-thymidine uptake in C6 glioma cells, indicating that this extract could be included in a new type of modulator in the mitogenesis.
c-Fos is known to related to synaptic plasticity and apoptosis in damage from ischemia or external injury. The purpose of this study was to investigate whether needle electrode electrical stimulation(NEES) is effective in increasing the number of c-Fos response cells and c-Fos expression in striatum after global ischemia in rats. There were no treatment and occlusion in the control group, global ischemia(GI) group were no treatment after carotid artery occlusion, and needle electrode electrical stimulation(NEES) group were treated with NEES after GI induced. The number of striatum c-Fos response cells and c-Fos protein expression significantly decreased in the NEES group compared to the GI group after 12, 24, 48 hours. The results of the present study suggest that NEES is ineffective in improving global ischemia in rats and may also be ineffective in the globally ischemic human brain.
FosB (FBJ murine osteosarcoma viral oncogene homolog B) 유전자는 사람의 19번 염색체에 위치하고 있으며 약 43 KD의 단백질을 코딩하며, 발생 및 분화과정, 개체 유지, 발병 진행 등을 조절한다고 알려져 왔다. 본 연구에서는 바이오 마커 등의 가능성이 있다고 보고된 FosB 유전자의 프로모터를 클로닝하여 활성도를 분석하고자 하였다. FosB genomic DNA 서열을 확인한 결과, TSS upstream 방향의 약 1 Kb 안쪽 부위에 FosB 유전자 발현을 위한 중요한 요소들이 있을 것으로 추정하였고, 따라서 FosB genomic DNA의 upstream -1,555 부위부터 exon 1의 +73까지 부위에 대한 PCR 증폭을 수행하였다. 또한 클로닝 성공을 높이기 위하여 일차로 $TA-1^{st}FosBp$ plasmid를 얻은 후, 다시 $TA-1^{st}FosBp$ plasmid를 template로 Kpn1과 Nhe1 제한 효소 절단부위를 프라이머에 삽입한 후 제작하여 2차 PCR을 수행하였으며, $TA-2^{nd}FosBp$ 플라스미드를 제작한 후 제한 효소로 절단하여 pGL3-luc vector로 subcloning하였다. 제작된 pGL3-FosBp-luc를 이용하여 항암제에 대한 활성도를 분석하고자 A549 사람 폐암세포주에 pGL3-FosBp-luc 플라스미드를 transfection 한 후 luciferase 활성도 분석을 수행하였다. Luciferase 활성도 증가는 doxorubicin, taxol 등을 처리한 후 단백질 발현 양상과 비교 하였을 때도 일치되는 결과를 얻을 수 있었다. 그러므로 FosB프로모터 클로닝은 향후 유전자 발현 연구, 마커분석 등에 유용할 것으로 사료된다.
Immunohistochemical technique of the c-fos primary gene protein, Fos, was used to analyze the effects of external factors on the neuronal activities in the periaqueductal gray(PAG) of the intact rats, sham-operated rats and post-operated stress control rats. In addition, the number of Fos positive neurons has been evaluated to verify the effects of cannula implantation and veratridine treatment on the neuronal activities in PAG area. The results were summerized as follow : 1. There was no significant difference in the number of Fos positive neurons observed in the caudal and middle portion of lateroventral PAG from cannula implanted rats and sham operated rats. 2. The number of Fos positive neurons in the PAG was not changed by the stress induced by connection of collecting tube to rats for 12 hours as compared to that of intact rats. 3. In the saline treated group, the Fos immunoreactivity in the PAG did not changed at 30 minutes and 1 hour after saline treatment as compared to that of intact rats. However, the number of Fos positive neurons was significantly increased at 2 hours after treatment compared to that of saline treated rats at 30 minutes after treatment. 4. The Fos immunoreactivity was dramatically increased at 30 minutes, 1 hour and 2 hours after veratridine treatment as compared to those of saline treated groups. The number of Fos immunoreative neurons showed the maximal level at 2 hours after veratridine treatment. 5. The Fos positive neurons induced by saline and veratridine treatment were mainly distributed in front of the microdialysis window. These results suggest that new microdialysis demonstrated in this study improves efficiency and accuracy to confine the neuronal activity in front of microdialysis window site. Moreover, this directional specificity allows us to locate probe tips adjacent to the brain area of the interest site rather than centering the probes within that brain area. Finally, This microdialysis method can be used to dialyse the neurotransmitters using concious and freely moving rats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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