Outbreaks of staphylococcal food poisoning (SFP) causing serious human diseases and economic losses have been reported globally. Furthermore, the spread of Staphylococcus aureus with increased resistance to multiple antimicrobial agents has become a major concern in the food industries and medicine. Here, we isolated an endolysin LysSAP8, as one of the peptidoglycan hydrolases, derived from the bacteriophage SAP8 infecting S. aureus. This endolysin was tagged with a 6×His at the C-terminal of the target protein and purified using affinity chromatography. LysSAP8 demonstrated lytic activity against a broad spectrum of bacteria, which included a majority of the staphylococcal strains tested in this study as well as the methicillin-resistant S. aureus (MRSA); however, no such activity was observed against other gram-positive or gram-negative bacteria. Additionally, LysSAP8 could maintain bactericidal activity until 0.1 nM working concentration and after heat treatment at 37℃ for 30 min. The ability of LysSAP8 to lyse cells under varying conditions of temperature (4-43℃), pH (3-9), and NaCl concentrations (0-1,000 mM), and divalent metal ions (Ca2+, Co2+, Cu2+, Mg2+, Mn2+, Hg2+, and Zn2+) was examined. At the optimized condition, LysSAP8 could disrupt approximately 3.46 log CFU/ml of the planktonic cells in their exponential phase of growth within 30 min. In this study, we have suggested that LysSAP8 could be a potent alternative as a biocontrol agent that can be used to combat MRSA.
Journal of agricultural medicine and community health
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v.40
no.2
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pp.53-61
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2015
Objectives: An outbreak of food poisoning occurred among the baseball club students at a high school in Ulsan city in 2014. An epidemiological investigation was carried out to examine the infection source and the transmission route of pathogen, and to prevent a recurrence. Methods: A questionnaire survey was conducted for 26 male students and 2 food handlers. Rectal swabs were examined in 7 students and the 2 food handlers, and an environmental investigation was performed. A retrospective cohort study was used to evaluate the association between risk factors and disease. Results: The attack rate was 35.7% (10 persons/28 persons) from June 9 to 14, and Enterotoxigenic E. coli ST/LT was isolated from 7 among 28 persons. The study revealed that no food was a significant risk factor for the outbreak. There were no connection between environmental factors and the outbreak. Conclusions: The major risk factors for this outbreak were presumed to be the contaminated ice cube and ice making machines and eating ice cube from the machines. More strict personal and environmental hygiene need to be enforced to prevent such outbreaks.
Objects: In July 2 2010, a diarrhea outbreak occurred among the workers in a company in Gyeungju city, Korea. An epidemiological investigation was performed to clarify the cause and transmission route of the outbreak. Methods: We conducted a questionnaire survey among 193 persons, and we examined 21 rectal swabs and 6 environmental specimens. We also delegated the Daegu Bukgu public health center to examine 3 food service employees and 5 environmental specimens from the P buffet which served a buffet on June 30. The patient case was defined as a worker of L Corporation and who participated in the company meal service and who had diarrhea more than one time. We also collected the underground water filter of the company on July 23. Results: The attack rate of diarrhea among the employees was 20.3%. The epidemic curve showed that a single exposure peaked on July 1. The relative risk of attendance and non-attendance by date was highest for the lunch of June 30 (35.62; 95% CI, 2.25 to 574.79). There was no specific food that was statistically regarded as the source of the outbreak. $Bacillus$$cereus$ was cultured from two of the rectal swabs, two of the preserved foods and the underground water filter. We thought the exposure date was lunch of June 30 according the latency period of $B.$$cereus$. Conclusions: We concluded the route of transmission was infection of dishes, spoons and chopsticks in the lunch buffet of June 30 by the underground water. At the lunch buffet, 50 dishes, 40 spoons, and chopsticks were served as cleaned and wiped with a dishcloth. We thought the underground water contaminated the dishes, spoons, chopsticks and the dishcloth. Those contaminated materials became the cause of this outbreak.
Gnanasekaran, Gopalsamy;Na, Eun Jung;Chung, Han Young;Kim, Suyeon;Kim, You-Tae;Kwak, Woori;Kim, Heebal;Ryu, Sangryeol;Choi, Sang Ho;Lee, Ju-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.2
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pp.262-270
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2017
Yersinia enterocolitica is a well-known foodborne pathogen causing gastrointestinal infections worldwide. The strain Y. enterocolitica FORC_002 was isolated from the gill of flatfish (plaice) and its genome was sequenced. The genomic DNA consists of 4,837,317 bp with a GC content of 47.1%, and is predicted to contain 4,221 open reading frames, 81 tRNA genes, and 26 rRNA genes. Interestingly, genomic analysis revealed pathogenesis and host immune evasion-associated genes encoding guanylate cyclase (Yst), invasin (Ail and Inv), outer membrane protein (Yops), autotransporter adhesin A (YadA), RTX-like toxins, and a type III secretion system. In particular, guanylate cyclase is a heat-stable enterotoxin causing Yersinia-associated diarrhea, and RTX-like toxins are responsible for attachment to integrin on the target cell for cytotoxic action. This genome can be used to identify virulence factors that can be applied for the development of novel biomarkers for the rapid detection of this pathogen in foods.
Seo, Sung-Min;Cho, Il-Hoon;Kim, Joo-Ho;Jeon, Jin-Woo;Oh, Eun-Gyoung;Yu, Hong-Sik;Shin, Soon-Bum;Lee, Hee-Jung;Paek, Se-Hwan
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.30
no.12
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pp.2993-2998
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2009
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)-on-a-chip (EOC) biosensor combined with cell concentration technology based on immuno-magnetic separation (IMS) was investigated for use as a potential tool for early screening of Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) in food products. The target analyte is a well-known pathogenic foodborne microorganism and outbreaks of the food poisoning typically occur due to contamination of normal food products. Thus, the aim of this study was to develop a rapid and reliable sensor that could be utilized on a daily basis to test food products for the presence of this pathogenic microorganism. The sensor was optimized to provide a high detection capability (e.g., 5.9 ${\times}\;10^3$ cells/mL) and, to eventually minimize cultivation time. The cell density was condensed using IMS prior to analysis. Since the concentration rate of IMS was greater than 100-fold, this combination resulted in a detection limit of 54 cells/mL. The EOC-IMS coupled analytical system was then applied to a real sample test of fish intestines. The system was able to detect L. monocytogenes at a concentration of 2.4 CFU/g after pre-enrichment for 6 h from the onset of cell cultivation. This may allow us to monitor the target analyte at a concentration less than 1 CFU/g within a 9 h-cultivation provided a doubling time of 40 min is typically maintained. Based on this estimation, the EOC-IMS system can screen and detect the presence of this microorganism in food products almost within working hours.
Staphylococcus aureus is spread worldwide and can result in food poisoning outbreaks. Among samples collected from soil, water, protected houses, packing houses, employees, strawberries, and leaves, and analyzed for S. aureus contamination, 16% samples 'showed S. aureus contamination, particularly on employees' hands, scissors, and strawberries. Examination of enterotoxins A, B, and C genes of S. aureus by PCR revealed sea and seb in 92 and 38% of total strains, respectively, whereas sec was not detected. In conclusion, implementation of Good Agricultural Practice is necessary for preventing food-borne diseases of staphylococcal origin, thereby ensuring the safety of farm-to-table products.
Norovirus causes acute gastroenteritis in all age groups and its food poisoning outbreaks are rapidly increasing in Korea. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) is most widely used for the rapid detection of foodborne viruses due to high sensitivity. However, the false positive results of RT-PCR obtained against already inactivated viruses could be a serious drawbacks in food safety area. In this study, we investigated a method to yield true positive RT-PCR results only with alive viruses. To decompose the RNA genes from dead viruses, the enzymatic treatments composed of proteinse K and Ribonuclease A were applied to the sanitized and inactivated virus particles. Another aim of this study was to quantify the efficiencies of several major sanitizing treatments using real-time RT-PCR. Feline calicivirus (FCV) that belongs to the same Caliciviridae family with norovirus was used as a surrogate model for norovirus. The initial level of virus in control suspension was approximately $10^4$ PFU/mL. Most of inactivated viruses treated with the enzymatic treatment for 30 min at $37^{\circ}C$ were not detected in RT-PCR, Quantification results to verify the inactivation efficiencies of sanitizing treatments using real-time RT-PCR showed no false positive in most cases. We could successfully develope a numerical quantification process for the inactivated viruses after major sanitizing treatments using real-time RT-PCR. The results obtained in this study could provide a novel basis of rapid virus quantification in food safety area.
Salmonella spp. is among the most important water-borne and food-borne pathogens and is one of the most common causes of human gastroenteritis and diarrheal diseases globally. In this study, Salmonella spp. isolated from food, environmental samples, and patients with food poisoning or diarrhea were investigated Salmonella serovars, antibiotic resistance using Vitek2, and genetic characteristics through pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Salmonella spp. of 339 strains, including 26 strains from food or environmental samples and 313 strains from patients, were isolated from Jeju Island of South Korea between 2020 and 2023. The monthly number of isolated Salmonella spp. gradually increased from March, with the highest number being in August. No significant differences in Salmonella spp. isolated from patients according to gender was observed. However, Salmonella spp. was most frequently isolated from people aged 70 years or older and least frequently isolated from those between ages 10 and 19 years. Salmonella spp. isolated from food or environmental samples were distributed among eight different serovars and the main serovars were identified in the order of S. Bareilly (26.9%), S. Rissen (23.1%), and S. Thompson (19.3%). Salmonella spp. isolated from patients were distributed among 27 different serovars and the main serovars were identified in the order of S. Bareilly (31.0%), S. Typhimurium (24.6%), and S. Enteritidis (11.5%). The main cause serovars of Salmonella spp. outbreaks are S. Bareilly, S. Enteritidis, S. Thompson. Antibiotic resistance tests indicated resistance to various antibiotics and some Salmonella spp. exhibited multidrug resistance. Salmonella spp. showed various genetic correlations among the 17 serovars. These results indicate that they can be used as basic data for epidemiological investigations by predicting the appearance of Salmonella spp. and providing a scientific basis.
Objectives : A few culture-confirmed cases of S. sonnei have been notified from Korean hospitals. The source of epidemic can't be firmly determined in such cases because of the rarity of this illness in the local communities and the timing of the outbreaks. The objective of this study is to estimate the source of epidemic by investigating the patients' lifestyles. Methods : Alibi verification was used to access the presumed source of the epidemic. PCR (Polymerase Chain Reaction) was used to rapidly detect the genes of Shigella in water specimens. Results : The common lifestyle trait among the Shigella infected patients was connected with Mt. Martyr in J city, Korea. The first patient's son had gone on a pilgrimage to Mt. Martyr with 41 friends and he had only eaten rice cakes on April 5th; the second patients had visited Mt. Martyr with their mother for a picnic on April 12th; the third patient had visited Mt. Martyr with 22 friends for a pilgrimage and the patient had only drunk holy water on April 13th. Therefore, the holy water of Mt. Martyr was reckoned to be the source of the epidemic. PCR detected the genes of Shigella two days before the S. sonnei was confirmed. Conclusion : The patients' lifestyles for 7 days before the onset of symptoms should be determined in terms of time, place and contacted people to find the source of infection when cases with food poisoning are seen in the hospital setting.
Salmonella remains a primary cause of food poisoning worldwide, and massive outbreaks have been witnessed in recent years. Therefore, this study investigated the antimicrobial activity of methyl gallate (MG), which exhibited good antibacterial activity ($MIC=3.9-125{\mu}g/ml$) against all the bacterial strains tested. In a checkerboard dilution test, MG markedly lowered the MICs of ciprofloxacin (CPFX) against Salmonella. The combined activity of CPFX and MG against Salmonella resulted in fractional inhibitory concentrations (FICs) ranging from 0.0037 to 0.015 and from 0.24 to $7.8{\mu}g/ml$, respectively. Meanwhile, the FIC index ranged from 0.31-0.37, indicating a marked synergistic relationship between CPFX and MG against Salmonella. Time-kill assays also showed a decrease in the CFU/ml between the combination and the more active compound. Therefore, this study demonstrated that MG and CPFX can act synergistically in inhibiting Salmonella in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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