In this study, we investigated the number of follicles, oocyte recovery rate and oocyte competence after in vitro maturation according to the size of follicle. And equine oocyte competence after in vitro maturation was investigated in terms of the diameter of follicle with criteria of maturation: nuclear stage after Hoechst staining. The average number of follicles per ovary with middle size (11-20 mm, 2.68) was higher than those of small (5-10 mm, 0.74) and large size follicle (> 21 mm, 1.63), therefore medium follicle (53.1%) had higher proportion than other size of follicles. The average numbers of follicle per ovary was 5.05. The rate of oocyte recovery in small (54.5%) and middle follicle (50%) was higher than that in large follicle (40.9%). After culture for 48 h in Medium 199, 50%, 45.5%, and 44.4% of oocytes from the follicles with diameters of 5-10, 11-20, > 21 mm, respectively reached the metaphase II stage. This is the first report showing number of follicle, oocyte recovery rate according to follicular size, and in vitro oocyte maturation in Jeju mare in Korea. To fulfill in vitro equine embryo production, further studies such as the seasonal effect, in vitro fertilization etc is need.
The follicles (1.8 to 7.8 mm in diameter) were recovered from the ovaries in marketed pigs and the number of granulosa cells, the diameter of oocytes obtained from different development stages of the follicles and follicular fluid levels were determined. Correlations between size measurements and cell counts as well as the diameter of antral follicles and oocytes were also investigated. The results indicated that, while expanding in size, follicle numbers decreased with a greater atretic proportion. Granulosa cells increased in numbers continuously and remained unchanged beyond the size of 200 ${mm}^3$ in non-atretic follicles, whereas a sudden drop of granulosa counts was observed in atretic follicles. Follicular fluid, on the other hand, linearly increased its volume with follicle size and differed little between those of non-atretic and atretic follicles. Diameters of oocytes in non-atretic follicles increased to its maximum when follicles expanded to 150 ${mm}^3$ and maintained its size during later follicular expansion. It is concluded that, for in vitro culture, the optimal size of porcine follicle should be between 150 to 180 ${mm}^3$if they are collected from pre-pubertal gilts of marketing size slaughtered in an abattoir.
Nine cows were superovulated by administration of 8 injections of Folltropin each (2.5 ml/injection, 1.75 mg/ml) i.m spread over 4 days, beginning on Day 10 of oestrous cycle, and 30 and 20 mg prostaglandin $F_{2{\alpha}}$ was given along with the 5th and 6th injections of Folltropin, respectively, to induce luteolysis. The animals were artificially inseminated 48, 60 and 72 h after the first prostaglandin $F_{2{\alpha}}$ injection. The number of corpora lutea was recorded by palpation per rectum and by ultrasonography on Day 6 (Day 0 = day of oestrus). The ovaries were examined daily by ultrasonography on Days 3-9 of the oestrous cycle for following the growth and regression of the largest follicle, which was considered the morphologically dominant follicle. The animals were classified into two groups depending upon the presence (n = 4) and absence of a dominant follicle (n = 5). There was a high correlation (r = 0.97, p < 0.001) between the number of corpora lutea observed by palpation per rectum and that determined by ultrasonography. Mean (${\pm}SEM$) number of corpora lutea determined by ultrasonography ($11.20{\pm}3.71$ vs $3.25{\pm}0.75$) and by palpation per rectum ($10.40{\pm}3.91$ vs $2.25{\pm}0.75$) was significantly higher (p < 0.05) in the nondominant group compared to that in the dominant group. There was no difference in the numbers of follicles 2-3 mm ($13.80{\pm}4.49$ vs $8.00{\pm}1.08$), 4-6 mm ($7.00{\pm}1.87$ vs $3.50{\pm}1.33$), and the total number of follicles ${\geq}2mm$ ($22.00{\pm}5.95$ vs $12.50{\pm}1.26$) between the two groups, one day prior to initiation of superovulation. There was, however, a significant (p<0.01) positive correlation between the number of corpora lutea with the numbers of follicles 2-3 mm (r = 0.83), 4-6 mm (r = 0.80) and the total number of follicles ${\geq}2mm$ (r = 0.89) observed one day prior to initiation of superovulation. The results of this study indicate that the presence of a dominant follicle adversely affects the superovulatory response in cattle.
BP201, porcine lung tissue-derived phospholipids, consists of phosphatidylcholine as a major phospholipid species. BP201 promoted hair growth after application onto the shaved backs of BALB/c and C3H mice. Its effect was enhanced when applied together with minoxidil (MNX) in C3H mice. When the tissue specimens prepared from the shaved skins of BP201-treated and control mice were microscopically examined, the total numbers of hair follicles in both anagen and telogen phases of BP201-treated mice were significantly higher than those of control mice. The numbers of hair follicles in the anagen phase of BP201-treated mice were also higher than those of control mice. In combination with MNX, BP201 further increased the total number of hair follicles, but did not alter the percentage of hair follicles in the anagenic phase. BP201 also increased the proliferation of human hair follicle dermal papilla cells. Collectively, BP201 possesses hair growth promoting potential, which would suggest its use singly or in combination for hair growth products.
목 적: 자궁강 내 인공수정을 위한 과배란유도 시 혈청 vascular endothelial growth factor (VEGF) 농도가 과배란유도의 결과를 반영할 수 있는지를 확인해 보고자 하였다. 연구방법: 과배란유도 후 자궁강 내 인공수정을 시행 받은 49 명의 불임여성을 대상으로 hCG 투여 일에 혈청을 얻어 VEGF-A 및 estradiol 농도를 측정하였다. 과배란유도는 clomiphene citrate (100 mg/d on day 3$\sim$7) 와 human menopausal gonadotropin (150 IU every other day starting on day 5) 병합요법을 이용하였다. hCG 투여 일에 17mm 이상의 성숙난포 수와 자궁내막 두께를 동시에 측정하였다. 결 과: 혈청 VEGF-A 농도는 성숙난포 수, estradiol 농도 및 자궁내막 두께와는 무관하였던 반면 성숙난포 수와 estradiol 농도는 양의 비례관계를 보였다. 혈청 VEGF-A 농도는 성숙난포 수가 2 개 이하인 저 반응 군과 6 개 이상인 고 반응 군에서 통계적으로 유의하지는 않지만 낮은 수치를 보였다. 결 론: 혈청 VEGF-A 농도는 자궁강 내 인공수정 시술 시 과배란유도의 결과와 무관한 것으로 사료되지만 저 반응 군과 고 반응 군에서 낮은 농도를 보이는 것으로 보아 이들을 대상으로 한 추가 연구가 필요할 것으로 판단된다.
The main purpose of this study was to improve the efficiency and quality of in vitro embryo production in Korean Native Cows (KNC). We examined the effects of ovarian morphologies (Experiment 1) and the culture vessel (Experiment 2) on in vitro maturation (IVM). We measured the subsequent development rates and cell numbers of blastocysts. In Experiment 1, the ovaries of KNC were divided into six groups, based on follicle and corpus luteum (CL) morphology. The development rates to the 2- and 8-cell stages were similar among the six groups. The development rates to blastocyst stages were significantly higher in the group without a CL or follicle (WOCL/F) than in the groups with follicular cysts (FCs), regressive CLs (RCLs) or cystic CLs (CCLs) (p<0.05). The cell number of the inner cell mass (ICM) of blastocysts in the FCs and RCLs groups, and the number of cells in the trophectoderm (TE) in the WOCL/F group, FCs, growing CLs (GCLs) and RCLs were significantly higher than in other groups (p<0.05). The total cell number (TCN) in the WOCL/F, FC and RCL groups was also significantly higher than in other groups (p<0.05). The ICM cell number/TCN ratio was significantly higher in the FC and RCL groups than in the GCL and DF groups (p<0.05). In Experiment 2, oocyte IVM was carried out in culture dishes, in 0.25- or 0.5-ml straws used for freezing sperm. The development rate to the 2-cell stage was significantly higher in the 0.5-ml straw group than in the 0.25-ml straw group. The development rates to the blastocyst stage were similar in the dish and the two straw groups. There were no differences in the cell numbers of ICM, TE or TCN or ICM cell number/TCN ratios between groups.
Burckhardt (1987)는 분명하게 과들을 구분해 주는 형질이 없기 때문에 날개 및 생식기의 기본구조가 비슷한 Aphalaridae (모나무이과)와 Spondyliaspididae (호주나무이과)를 Psyllidae (나무이과)의 아과로 통합하였다. 나무이를 대상으로 형질의 기울기와 진화패턴을 분석하기 위해, 호주를 포함한 전세계의 나무이를 분석하면서 호주나무이아과에 관하여 Burckhardt와는 다른 결과를 얻었다. 특히 호주나무이아과에 대한 분류학적 위치를 검토하기 위해 호주전역에서 채집된 28속 52종의 호주산나무이의 정소를 해부한 결과, 나무이의 정소 소포수 형질은 변이가 1-4개까지 나타났으며, 특히 Spondyliaspidinae (호주나무이아과)는 정소소포수가 공통적으로 1개였다. 호주나무이아과가 최근 신생대에 진화한 Eucalyptus 식물군을 기주로 하고, Gondwana 지역에서 폭발적인 종분화를 하였으며, 이 아과의 속 과 종 모두가 1개의 정소 소포수를 공통적으로 가진다는 점에서 호주나무이아과는 나무이과에서 독립된 호주나무이과로 분리하여야 한다.
This study was designed to examine the effect of Lactilactobacillus curvatus LB-P9 on hair regeneration. The treatment of LB-P9 conditioned medium increased the proliferation of both hair follicle dermal papilla cells and hair germinal matrix cells (hGMCs). Moreover, the expression levels of hair growth factors such as vascular endothelial growth factor (VEGF) and fibroblast growth factor 7 were significantly elevated in hGMCs co-cultured with LB-P9. After time-synchronized depilation, mice were orally administered with either 4×107 colony forming unit (CFU) of LB-P9 (low dose) or 4×108 CFU of LB-P9 (high dose), once daily for 4 weeks. Compared with the vehicle (phosphate-buffered saline)-administrated group, the LB-P9-treated groups exhibited accelerated hair regrowth rate and enhanced hair thickness in a dose-dependent manner. Supporting this observation, both hair follicle numbers and the dermal thickness in skin tissues of the LB-P9-treated groups were increased, compared to those of the vehicle-treated group. These results might be explained by the increased level of β-catenin and number of hair follicle stem cells (CD34+ CD49f+ cells) in the skin tissues of mice administered with LB-P9, compared to the vehicle-treated mice. Also, increased serum levels of hair growth factors such as VEGF and insulin-like growth factor-1, and superoxide dismutase were found in the LB-P9-treated groups, compared to those of the vehicle-treated group. Taken together, these results might demonstrate that the oral administration of LB-P9 promotes hair regeneration by the enhancement of dermal papilla proliferation through the stimulation of hair growth factor production.
Recently the application of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonist to superovulation in previous poor responders has resulted in the improved outcomes after in vitro fertilization (IVF) outcome. However, poor responders with poor estradiol $(E_2)$ rise or single dominant follicle are a particularly challenging group. Recent reports have also shown that patients with higher basal serum follicle stimulating hormone (FSH) level, result in poorer ovarian response and lower pregnancy rate. Analysis of the differences of superovulation outcomes according to the different protocols of GnRH agonist, long (L, n = 18) and short (S, n = 16) protocols, in patients with high basal FSH levels (>20mIU/ml) were undertaken at Seoul National University Hospital from June to October 1990. The administration of GnRH agonist was begun on day 21 of the cycle in long protocol, and on day 2 in short protocol. Ages of patients and husbands, basal FSH and luteinizing hormone (LH) levels and FSH/LH ratio did not differ significantly. Types and causes of infertility were evenly distributed. Whereas the duration of stimulation and the amounts of gonadotropins administered were significantly reduced in short protocol, the numbers of oocytes retrieved and cleaved, the cleavage rate and the number of embryos transferred were higher in long protocol without statistical signifieance. The pregnancy rate per ET was 16.7% (2/12) in short protocol, and 17.6% (3/17) in long protocol. These data suggest that both protocols result in the similar superovulation outcomes in patients with higher basal serum FSH levels.
The present study aimed at determining the effective dose of Folltropin, a follicle timulating hormone (FSH), on superovulation in indigenous cows of Bangladesh. Fifteen regularly cycling 5~7 years old dry cows, weighing 200~250 kg with 2.5~3.0 body condition scores (BCS) were divided into three groups (n=5). Individual groups were superovulated with 100, 200 or 300 mg of Folltropin per animal. The superovulation treatment was initiated at Day 10 or Day 11 of the estrous cycle (Day 0=day of estrus). Alfaprostol (6 mg) was injected to each cow 72 h after the initiation of superovulation treatment to induce eestrus. After confirming standing estrus, the cows were inseminated 2~3 times, 12 h apart, depending on the duration of estrus. At Day 6 or Day 7, individual horns of the uterus were flushed with 150~200 $m\ell$ of phosphate buffered saline supplemented with BSA (0.2%), penicillin (100 IU/$m\ell$) and streptomycin (100 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) using a two-way foley catheter. The embryos were concentrated, removing the excess medium through an embryo filter, and identified under a stereomicroscope. The identified embryos were collected, washed four times, evaluated and graded as excellent, good, fair or poor. The excellent, good and fair embryos were considered as transferable quality embryos. The mean (range). numbers of embryos collected vs. transferable quality embryos far 100, 200 and 300 mg of Folltropin were 4.5 (1~10) vs. 3.5 (1~8); 2.5 (1~4) vs. 1 (0~2) and 0.0 (0~0) vs. 0.0 (0~0), respectively, Folltropin at a dose of 100 or 200 mg produced suitable ovarian stimulation for superovulation in indigenous zebu cows of Bangladesh. A dose of 300 mg or more Folltropin consistently caused preovulatory corpora lutea formation in the ovaries and resulted in zero embryo recovery.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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