In this study, we evaluated bacteriocidal effect of CaO (scallop shell powder) for the reduction of microorganism in Scomber japonicus and Pseudosciaena ciean manchurica, and compared with main chemical sanitizers such as chlorine, ethanol, hydrogen peroxide. As a result, the effectiveness of CaO showed dramatic reduction rate for total aerobic bacteria, Escherichia coli and Vibrio parahaemolyticus. The reduction rates of total aerobic bacteria for Scomber japonicus and Pseudosciaena ciean manchurica showed $2.6{\times}10^3\;and\;3.2{\times}10^4$ respectively; Those of Escherichia Coli were $6.3{\times}10^3\;and\;1.2{\times}10^4$, those of Vibrio parahaemolyticus were $5.4{\times}10^4\;and\;5.6{\times}\2.6{\times}10^310^4$, respectively. According to this result, bacteriocidal effect of CaO was about $10^4$ and was similar to bacteriocidal effects of other three chemical sanitizers. According to these results, CaO can alternate the currently used chemical sanitizers due to its natural origin as well as the effectiveness for sterilization.
Hwang-Bo, Hyun;Choi, Eun-Ok;Kim, Min Young;Ji, Seon Yeong;Hong, Su Hyun;Park, Cheol;Cha, Hee-Jae;Kim, Suhkmann;Kim, Heui-Soo;Hwang, Hye-Jin;Choi, Yung Hyun
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.11
no.2
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pp.42-51
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2019
We compared the antibacterial activities of spermidine and astaxanthin against two gram-positive bacteria such as Streptococcus parauberis and S. iniae to find new antibacterial candidates. We also evaluated the preventive effects of spermidine against oxidative stress-induced cytotoxicity in C2C12 myoblasts. Our results indicated that spermidine has more significant antibacterial activities than astaxanthin against both two fish pathogenic bacteria as well as gram-negative bacteria Escherichia coli used as a control group. Minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration of spermidine were 0.25 mM and 1 mM against S. parauberis, 1 mM and 3 mM against S. iniae, and 0.5 mM and 1.5 mM against E. coli, respectively. In addition, the postantibiotic effect lasted from 7 h, 5 h and 6 h for S. parauberis, S. iniae and E. coli, respectively. The results also showed that the decreased C2C12 cell viability by H2O2 could be attributed to the induction of DNA damage and apoptosis accompanied by the increased production of reactive oxygen species, which was remarkably protected by spermidine. Additionally, the antioxidant effect of spermidine was associated with the activation of Nrf2 signaling pathway. According to the data, spermidine may be a potential lead compound which can be further optimized to discover novel antibacterial and antioxidant agents.
The majority of freshwater ornamental fish are imported and distributed domestically, causing high risk of exposure to exotic pathogens and drug resistant bacteria in Korea. Aeromonas hydrophila is known as a common species of fresh water bacteria and opportunistic fish pathogen, as well as a species causing zoonotic infection. In this study, we isolated motile aeromonads from various imported freshwater ornamental fish and studied the characters of the isolates. Imported freshwater ornamental fish were purchased on day 1 after the fish were deposited in the aquarium. Bacteria were isolated from the liver, kidney and spleen of fish using 0.5% NaCl containing tryptic soy agar medium. Bacteria were grouped on the basis of their morphological characteristics. The colonies with clear zone on starch-ampicillin agar (SA agar) were tentatively identified as Aeromonas spp. Two hundred and twenty-six strains, about 70% of total isolates were assumed to be Aeromonas spp. Nine isolates were further identified based on the result of the API 20E test and PCR using primers specific for A. hydrophila 16S rRNA gene. The isolates were identified as A. hydrophila and the API 20E test showed differences in trisodium citrate, D-sucrose, D-melibiose, amygdalin and L-arabinose availability between the nine isolates and standard A. hydrophila. The susceptibilities of the isolated bacteria to 10 antibacterial agents were confirmed by the disk diffusion method. Isolated strains were found to be resistant to amoxicillin and ampicillin and sensitive to florfenicol. However, 7 isolates showed multiple drug resistances to erythromycin, oxytetracycline, nalidixic acid etc. Pathogenicity of the isolates was determined by the artificial challenge test on goldfish (Carassius auratus). Three isolates caused 60 ~ 80% mortality in goldfish within 5 days after the initiation of challenge. These results indicate that multiple drug resistant, highly pathogenic and exotic A. hydrophila can spread to domestic aquarium and the preventive treatment of fish before sale is necessary.
Biochemical characteristic of Streptococcus iniae and Streptococcus parauberis that are pathogens of streptococcosis of cultured flounder, Paralichthys olivaceus, in Jeju area was examined. The result of experiments on the grow according to temperatures showed that only S. parauberis grew at 10℃, the result of hemolysis test showed that only S. iniae bacteria showed β hemolysis. Only S. parauberis were positive in VP test and HIP test, both bacteria used α-D-glucose, D-mannose, D-psicose, D-trehalose, pyruvatic acid methyl ester, and glycerol as substrates. L-lactic acid was used only S. iniae bacteria, and β-methyl-D-glucosid was used only by S. parauberis. S. iniae exhibited acute infection patten, differently S. parauberis exhibited chronic infection patten in pathogenic test.
Kim, Ye Ji;Jun, Lyu Jin;Lee, Young Juhn;Ko, Ye Jin;Han, So Ri;Kim, Sung Hyun;Jeong, Joon Bum
Journal of fish pathology
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v.35
no.1
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pp.47-56
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2022
Lincomycin as one of the lincosamides antibiotics have been mainly used in human and livestock fields, but have not been used in aquaculture. In this study, the distribution of minimum inhibitory concentration (MIC) values against lincomycin and the detection of the macrolide-lincosamide-streptogramin (MLS) resistance gene were confirmed in bacterial pathogens isolated from cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus). Of the 107 strains isolated from Jeju, 36 strains of Gram-positive bacteria and 71 strains of Gram-negative bacteria were identified. Most of Streptococcus spp. was found to have a MIC value of less than or equal to 0.5 ㎍/mL, and Edwardsiella piscicida was found to have a MIC value higher than 1,024 ㎍/mL. V. harveyi and V. alginolyticus mostly showed MIC values of 256 ㎍/mL, but V. scophthalmi displayed values of 8~64 ㎍/mL. In the detection of MLS resistance gene, erm(B) was detected in 9 strains of Streptococcus spp., and erm(A) was confirmed in one strain.
Kim, Min-Sun;Park, So-Hyun;Kim, Dong-Hwi;Heo, Moon-Soo
Journal of Life Science
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v.24
no.8
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pp.880-886
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2014
In this study, we isolate and identify bacteria from seawater collected from Jeju coast, to evaluate the antimicrobial activity against the fish pathogenic bacteria. 14 bacterial strains were isolated and identified using physiological, biochemical and molecular tools. Antibacterial activity of all the 14 isolates were screened against four major fish pathogens namely, two Gram-positive: Streptococcus iniae, Streptococcus parauberis and two Gram-negative: Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda. Results revealed that among the 14 isolates, MK-11 was found to have antibacterial activity against S. iniae, S. parauberis, V. anguillarum Particularly, S. iniae was susceptibility with the MIC value of $250{\mu}g/ml$. The biochemical and physio-chemical results reveal that MK-11 had the sugar-alcohol disassemble ability of the D-sorbitol and D-mannitol. Also the utilization of the yeast extract, sorbitol and di-potassium phosphate were noted to be high. The optimum culture condition such as pH and temperature was recorded as pH 6.0, $25^{\circ}C$ and along with 1% NaCl which differs from the previous reports particularly in nutrient resolutions. As results of the analysis of 16S rDNA sequences, MK-11 show the high similarity with Paenibacillus polymyxa, P. jamilae, P. brasilensis 99.78%, 99.43%, 99.39%, repectively. Hence, in the present study, the isolated Paemibacillus sp. MK-11 from Jeju seawater possesses the antibacterial activity against fish pathogens and it could be used as a new antibiotic agents against the gram positive fish pathogens.
Olive flounder (Paralichthys olivaceus) is an important aquaculture fish species in Jeju Island, South Korea. Due to the intensification of flounder fish farming, huge amounts of chemical antibiotics are used against several fish diseases. This has many harmful side effects on fish, as well as human consumers. Hence, an alternative to chemical antibiotic agents is needed for disease control. In this study, three strains of rhizobacteria (BRH433-2, TRH415-2, and THJ609-3) were isolated from the rhizosphere of plants. Assays of their antibacterial activity against fish pathogens, such as S. iniae, S. parauberis, V. anguillarum, and E. tarda, were performed with untreated broth culture (without cell separation), supernatant, and precipitated pellets separated by centrifugation. Among these, the cell suspension prepared from the precipitated pellet showed significant antimicrobial activity when compared with that of the untreated broth culture and centrifugal supernatant. These results indicate that the three isolated rhizobacterial strains exhibit antibacterial activity. Analysis of the 16S rDNA sequences of the BRH-433-2, THJ609-3, and TRH415-2 strains showed the highest similarity to Burkholderia gladioli (99.5%), Pseudomonas baetica (97.7%), and P. koreensis and P. baetica (98.4%), respectively. We suggest that the strains hold promise in disease management of fish.
A lactic acid bacterium showing antimicrobial activity against fish pathogen was isolated from gastrointestinal tract of flounder for the purpose of use as an aquaculture probiotics. From the analysis of morphological and physiological characteristics, the isolated strain was named as Lactococcus sp. HM58. Antimicrobial substance (AMS) from Lactococcus sp. HM58 showed strong growth inhibitory activity against Streptococcus sp., which is a fish pathogenic bacterium. AMS was presumed a proteinaceous compound with stability in heat and wide pH range from 2 to 10. It was started to produce in exponential growth phase and was not produced any more in stationary phase. It showed comparatively broad antimicrobial spectrum against most of gram positive bacteria used for this study. About $84\%$ of Lactococcus sp. HM58 was able to survive in the artificial gastric juice though it was low to the extent in the artificial bile juice. In the sensitivity test for various antibiotics, this strain was highly sensitive for doxycycline, erythromycin, amoxicillin clavu1anic acid and ampicillin.
Biosensors consist of biochemical recognition agents like antibodies immobilized on the surfaces of transducers that change the recognition into a measurable electronic signal. Here we report a piezoelectric immunosensor made to detect Vibrio vulnificus. A 9MHz AT-cut piezoelectric wafer attached with two gold electrodes of 5mm diameter was used as the transducer of the QCM biosensor with a reproducibility of ${\pm}0.1Hz$ in frequency response. We have tried different approaches to immobilize antibody on the sensor chip. Concerning the orientation of antibody for the best antigen binding capacity, the antibody was immobilized by specific binding to protein G or by cross-linking through hydrazine. In addition, protein G was cross-linked on glutaraldehyde activated immine layer (PEI) or EDC/NHS activated sulfide monolayer (MPA). PEI was found to be more effective to immobilize protein G following glutaraldehyde activation than MPA. However, hydrazine chip showed a better capability to immobilize more IgG than protein G chip and a higher sensitivity. The sensor system was able to detect V. vulnificus in dose dependent manner and was able to detect bacterial cells within 5 minutes by monitoring frequency shifts in real time. The detection limit can be improved by preincubation to enrich the bacterial cell number.
The antibacterial activities of methanol extracts of 19 commercial herbal medicines were measured against the fish pathogens Vibrio ichthyoenteri and Streptococcus iniae, which cause several fish diseases. Rhus javanica showed the strongest antibacterial activity against V. ichthyoenteri and S. iniae. The methanol extract of R. javanica was extracted further using several organic solvents with different polarities. The extract from the ethyl acetate fraction showed strong activity against both fish pathogens. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the R. javanica extract was $32{\mu}g/mL$ for V. ichthyoenteri and $128{\mu}g/mL$ for S. iniae. Further purification and isolation of the active compound (s) responsible for these activities and further study of the synergistic effect using combinations of antibiotics against pathogenic bacteria are needed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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