To develop a natural antibacterial agent for fish bacterial diseases, antibacterial activity, minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and bactericidal effect of cinnamon bark extract were examined against fish pathogenic bacteria. The antimicrobial effect of the extract to the fish diet was also estimated, Cinnamon bark extract showed the broad spectrum of antibacterial activity against fish pathogenic bacteria, especially, it had strong activity against Streptococcus iniae, Edwardsiella tarda and Listonella anguillarum. Its MIC was $75.8\sim189.6{\mu}g/mL$ against Cram positive bacteria, and $75.8\sim113.8{\mu}g/mL$ against Gram negative bacteria in liquid medium, It was found to show stronger bactericidal action against Gram negative bacteria than Cram positive bacteria. According to increasing concentrations of the extract, it resulted in a proportional reduction of viable cell counts of both S. iniae and L. anguillarum. The former was not detected by addition of $189.6{\mu}g/mL$ after 12 hours incubation and the latter by addition of $151.6{\mu}g/mL$ after 24 hours incubation, respectively. It was reasonable that fish diet was soaked in cinnamon bark extract for ten minutes. The relationship formula between the weight of fish diet and the extract absorbed to fish diet was Y=7.2726X+4.5083 ($R^2=0.9998$). The fish diet soaked in the extract inhibited the growth of all strains used in this study. Its antibacterial activity was stable at the range from $10^{\circ}C\;to\;35^{\circ}C$ during the storage period of 28 days. When the diet soaked in the extract was incubated in liquid medium at $35^{\circ}C$, it inhibited the growth of microorganisms inhabited in the diet.
The ethanol extract of root bark of Morus alba strongly inhibited the Gram positive bacteria like Streptococcus sp., Lactococcus garvieae and Staphylococcus sp., but weakly the Gram negative bacteria like Listonella anguillarm and Edwardsiella tarda. It was more effective in liquid medium than in solid medium. The minimum inhibition concentration (MIC) of the extract in liquid medium was 19.8 and 790~1185 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for the Gram positive and Gram negative bacteria, respectively. The extract concentration, at which the growth was totally inhibited, was 67.2~403.0 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for the Gram positive bacteria but it was as high as 1185 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for L. anguillarum and almost ineffective against E. tarda. For diet supplementation of the extract, effective soaking duration was 3 minutes. The fish diet soaked in the extract inhibited the growth of all the tested Gram positive strains, but not the Gram negative strains. The relationship between the weight of fish diet and absorption of the extract by the fish diet was Y=7.5757X + 4.6962($R^2$ = 0.9998).
This study examined the effects of dietary glycoprotein extracted from Porphyra yezoensi on growth performance and resistance against the pathogenic bacteria Edwardsiella tarda in olive flounder. A porphyra-originated glycoprotein (P) was extracted using sequential processes of water and ethanol treatment. P extracts were added to a fish-meal-based diet at concentrations of 0.0, 0.5, and 1.0% (designated as Con, $P_{0.5}$, and $P_{1.0}$, respectively). Fish were fed one of the three experimental diets for 10 weeks. All fish groups exhibited over 96.7% survival during the experimental period. Results indicated that the fish fed diets containing P showed an increase in growth performance, including enhanced weight gain, specific growth rate, and feed efficiency. An increase in insulin-like growth factor (IGF-1) was observed in the fish fed the $P_{1.0}$ diet, as compared to those fed Con. At the end of the 10-week feeding trial, all fish were infected with E. tarda, and accumulated mortality was monitored for 8 days. Fish fed the Con diet exhibited increasing mortality from day 3 to the end of the challenge test, whereas the mortality of P-fed fish ceased at day 5. We suggest that supplementation with P-originated glycoprotein in aquafeed may increase growth performance and resistance against pathogenic bacteria in olive flounder juveniles.
This study was examined the microbiological adequacy of fish feed treated with high-dose irradiation (5 kGy). 125 flounder (Paralichthys olivaceus) were grouped into 5 and then the fishes were fed the following feeds for 28 days: (1)standard feed; (2)standard feed, inoculated with Edwardsiella tarda ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFU/g$ of feed); (3)standard feed, inoculated with Vibrio anguilarum ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFIT/g$ of feed); (4)standard feed, inoculated with Streptococcus faecalis ($1{\times}10^8-1{\times}10^9CFU/g$ of feed); (5)standard feed, inoculated with Edwardsiella tarda, Vibrio anguillarum and Streptococcus faecalis, and then irradiated the mixed feed to 5 kGy. The flounders feed the mixed diet with Edwardsiella tarda, Wbrio anguillarum or Streptococcus faecalis inoculated feed were showed severe cumulative mortalities of 60, 48 and 52% respectively. The gross and histological changes were observed on the fishes. However, fishs fed with the feed of bacteria inoculation before irradiation demonstrated excellent protection against the bacteria-related disease. The results from experiments with bacteria inoculated feed indicated that the irradiation methods employed were capable of preventing contamination of the fishs with pathogenic bacteria.
Celebes rainbow (Marosantherina ladigesi) is one of Indonesia's exported ornamental fish commodities, but the exploitation of this fish only relies on wild catches. The rise of unlimited fishing, especially those using poison, has changed the aquatic environment, threatening sustainability and causing fish extinction. This study aimed to evaluate the effectiveness of several types of feed in improving the absolute growth rate (AGR), specific growth rate (SGR), survival rate (SR), feed conversion ratio (FCR), feed efficiency (FE), hematology, and immune response of Celebes rainbow. The fish used in this study were male ornamental Celebes rainbow (M. ladigesi) weighing 1.32 ± 0.21 g/ind, reared in 54 L-aquariums at a stocking density of 30 individuals/aquarium for six weeks. The fish were fed according to the test diet consisting of live Tubifex sp worms, dry Tubifex sp worms, Spirulina platensis, and crumble pellets. The parameters observed were AGR, SGR, SR, FCR, FE, hematology, intestinal histology, liver histology, and a challenge test with the pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila. The results showed that fish-fed live Tubifex sp worms had better AGR, SGR, SR, FCR, FE, hematology, and disease resistance compared to all other treatments. These results indicate that live Tubifex sp worms are the best feed for rearing Celebes rainbow.
Park, Jin Yeong;Kim, Wi-Sik;Kim, Heung Yun;Kim, Eunheui
Journal of fish pathology
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v.29
no.1
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pp.35-43
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2016
In comparison to the numbers of such studies of fish, few studies have been carried out on the immunity, physiology and ecology of abalone, while studies on abalone disease are also extremely rare. Moreover, mass mortality of cultured abalone due to pathogenic bacteria has not been reported in the southern coast of Korea. However, Vibrio-like bacteria have been isolated from dead abalone, which indicates that a review is required in order to determine the cause of abalone mortality. Use of an antimicrobial agent to minimize the damage caused by disease in abalone farms is common, but the therapeutic effects are insignificant. Demand for probiotics has increased, but research on the development of probiotics for use in abalone culture is very rare. Therefore, the present study isolated KC16-2 from fermented kimchi soup and investigated the characteristics of the isolate as a candidate probiotic bacterium in abalone. KC16-2 was identified as Bacillus amyloliquefaciens (B. amyloliquefaciens KC16-2) based on its biochemical properties and 16S rRNA gene sequence. B. amyloliquefaciens KC16-2 showed inhibitory effects against the growth of various vibrios in vitro, and kept the numbers constant until four days after inoculation in marine water at a temperature of $15{\sim}25^{\circ}C$, indicating the possible use of KC16-2 as a probiotic, except in the winter. The growth of KC16-2 was inhibited by bile salt, but the numbers increased over time suggesting the bacteria were still alive in the abalone's digestive tract. Abalone fed with a diet including KC16-2 for 12 weeks showed good growth, but showed no significant differences from the control group. However, the mortality of the abalone supplied the probiotic diet was reduced to half that of the control group in a challenge test with Vibrio tubiashii. Therefore, we suggest that B. amyloliquefaciens KC16-2 could be used as a probiotic bacterium for control of the mortality of abalone caused by opportunistic pathogenic vibrios.
The biological characteristics of Bacillus sp.CPB-St as a probiotic strain to control fish streptococcosis was determined. Based on 16S rRNA sequencing, Bacillus sp.CPB-St was identified as Bacillus pumilus and named B. pumilus CPB-St (Abbreviated as CPB-St). Growth inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was examined at three different incubation temperatures ($20^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, and $30^{\circ}C$) and three culture media (NA, TSA, and BHIA) based on the diameter of inhibition zone. Its activity (inhibition zone of 11~29 mm) at $20^{\circ}C$ was higher than that (12~21 mm) at $30^{\circ}C$. Its activity (29 mm) in NA media was the same as that (29 mm) in TSA media. However, it was higher than that (22 mm) in BHIA media. The inhibitory activity of CPB-St against Streptococcus spp. was high at pH7. However, its activity was the same at salinity of 0.5% to 3%. CPB-St showed maximum growth after incubation at $25^{\circ}C$ for 48 h. To use CPB-St as probiotics, settlement studies in fish intestine and its efficacy through feeding are needed. CPB-St was highly resistant to gastric juice at pH4 and flounder's bile salt as well as deoxycholic acid at $300{\mu}g/ml$. CPB-St showed optimal viability in 1% NaCl. It showed similar growth in 0% to 7% NaCl. CPB-St could tolerate $-20^{\circ}C$ and $-70^{\circ}C$ for 45 min. There was no difference in the growth of the strain between room temperature and $4^{\circ}C$. Fish diet supplemented with CPB-St could be stored at low temperature without cell loss. Therefore, CPB-St might be used as probiotics to control streptococcosis of fish.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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