Microbial infection provokes one of the most serious complications to the patients with indwelling catheters. Ciprofloxacin (CFX) was added into the catheter materials (polyurethane or silicone) during the manufacturing process to avoid the microbial infection. Efficacy of the catheters containing CFX was investigated by using the in vitro zone of growth inhibition test method. The catheters made of polyurethane or silicone exhibited a strong antimicrobial activity against the major catheter-related microorganisms (S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa and E. coli), when CFX was incorporated into the catheters. Fetal bovine serum (FBS) did not affected antimicrobial activities of the polyurethane catheters with CFX loading of 0.5 and 1.0% (W/W) against S. aureus and S. epidermidis. However, the polyurethane catheters with 1.0% (W/W) of CFX loading showed a significantly (P<0.05) reduced antimicrobial activity against E. coli when the catheters were exposed to FBS. Silicone catheters with 1.0 and 1.5% (W/W) of CFX loading demonstrated effective antimicrobial activity against S. epidermidis for at least 2 weeks. These results suggest that the use of catheters containing ciprofloxacin could be effective in preventing catheter-related infections.
We investigated factors affecting primary cultures of Pacific abalone Haliotis discus hannai ovary-dissociated cells to identify general aspects of their early-phase culture. Ninety-seven cell populations derived from 30 individuals were cultured in different media with varying compositions of medium supplements, and initial attachment, subculture, and survival for ${\geq}10$ weeks were assessed according to medium composition and individual. We also examined the time required for subculture and the rate of cell death according to both culturing period and passage number within 10 weeks. A lack of fetal bovine serum (FBS) and hemolymph significantly inhibited the growth of cultured cells, while we detected no significant effect of medium composition on initial cell attachment. Through data reallocation, with the omission of data from cell populations cultured in FBS-free and hemolymph-free media, we showed that growth inhibition was also affected by individual differences among the abalones used. During the culture, we observed four different types of cell morphology. Moreover, considerable time was required for subculture-18.4 and 19.5 days for first and second subcultures, respectively-and cell death did not occur within 30 days or for passage 0. Our results will provide valuable information for developing universal cell culturing guidelines in abalone species and suggest the feasibility of culturing abalone ovary-dissociated cells.
본 연구는 내분비 장애물질의 검출을 위하여 간세포의 단층 형성, 생존 및 기능에 미치는 어류 혈청의 영향에 대해 검토하였다. 한국산 메기의 간세포는 자신의 혈청 및 뱀장어, 틸라피아 등 타어종의 혈청에 의해 부착 및 단층이 형성되었으나, FBS는 메기 간세포의 단층을 형성시키지 못했다. 0.5에서 3%의 어류 혈청으로 메기 간세포의 단층을 형성 시킬 수 있는데, 이것은 FBS(5~20%) 사용의 1/10 이하로 적은 양이며, 어류 혈청이 FBS를 대체할 수 있고, FBS보다 간세포의 형태 및 기능 유지에 효과적인 것으로 나타났다. 어류 혈청이 첨가된 배양액에서 메기 간세포는 적어도 10일 이상 단층 형성을 유지할 수 있어, 내분비 장애물질 연구에 이용될 수 있을 것이다. 결론적으로 본 연구에서 개발된 어류 혈청을 사용한 메기 간세포 배양시스템과 효소면역측정법(ELISA)은 bisphenol A 등의 내분비 장애물질의 검출 및 연구를 위한 유용한 도구로서 이용될 수 있다고 생각된다.
본 실험은 소에서 체외수정란과 복제수정란을 modified CRlaa (mCRlaa) medium에서 각각 배양하였을 때 배반포단계까지 발육율을 비교하였다. 체외성숙은 TCM-199 medium에 10 %의 Fetal Bovine Serum (FBS)를 첨가한 배양액에서 실시하였고 이를 이용해 체외수정과 복제를 시행하였다. 체외성숙란과 복제수정란의 배반포까지 발육율은 각각 22.5 %, 19.4 %이었다. 복제수정란을 생산하기 위해서는 제핵을 실시한 난자내로 공여핵를 도입하는 과정이 필요한 데 할구보다 체세포를 이용하는 경우 융합율이 저하되는 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 연구에서는 공여핵을 제공하는 체세포와 수핵란간에 융합을 기존에 많이 사용한 chamber와 비교해 Needle을 사용했을 때 복제수정란의 발육율간의 차이를 서로 비교하였다. Ear skin cell을 이용해 핵이식을 실시한 다음 Zimmerman cell fusion medium에서 융합하였다 융합된 핵이식란은 5 % $CO_2$, 5 % $O_2$, 90 % Na, 38.5$^{\circ}C$ 조건에서 배반포까지 배양하였다. Chamber와 Needle을 사용한 경우 융합율은 각각 46.1 %, 70.4 %, 분할율은 62.6 %, 76.4 %로 Needle의 경우가 유의적으로 높았다.
Background and Objectives : The aim of this study was to investigate the anti-oxidant and anti-inflammatory effects of the Taglisodog-eum(TSE) extract on the RAW264.7 cell Methods : The RAW264.7 cell was cultured using Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM, USA), including the 10% fetal-bovine serum(FBS; Sigma, USA) in a $37^{\circ}C$, 5% CO2 incubator. Results : The anti-oxidant ability of TSE were dose-dependantly increased. The LPS-induced IKK, iNOS and COX-2 mRNA expression were dose-dependantly decreased in the RAW264.7 cells treated with TSE. $NF-kB$ activation was suppressed. Conclusion : The findings in this study show that TSE has anti-oxidant and anti-inflammatory effects, such as the inhibition of $NF-kB$ activity.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.160.2-160.2
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2003
When ginsenoside $R_{b1}$ and $R_{b2}$ were anaerobically incubated with human fecal microflora, these ginsenosides were metabolized to compound K. When ginsenoside $R_{g3}$ was anaerobically incubated with human fecal microflora, the ginsenoside $R_{g3}$ was metabolized it to ginsenoside $R_{h2}$. Among ginsenosides, compound K and 20(S)-ginsenoside $R_h2$ exhibited the most potent cyotoxicity against tumor cells: 50% cytotoxic concentrations of compound K in the media with and without fetal bovine serum (FBS) were 27.1 - 31.6 mM and0.1 - 0.6 mM, and those of 20(S)-ginsenoside $R_h2$ were 37.5 $\rightarrow$ 50 and 0.7 - 7.1 mM mM, respectively. (omitted)
Cell growth and DNA synthesis were studied from a cultured early- and late- pas- sage mouse aorta smooth muscle cell (MASMC) because the proliferation of vascular smooth muscle cell (VSMC) is a key factor in development of atherosclerosis. In this study, the cells were cultured in fetal bovine serum (FBS) and stimulated by growth factors such as thrombin and platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB). Compared to the number of early-passage MASMC (passage 3 to 9) the number of late-passage MASMC (passage 30 to 40) in a normal serum state was increased 2 fold at Day 1, 3 and 6 in culture, respectively. Incorporation of $[^3H]$ thymidine into DNA induced by serum, PDGF and thrombin in late-passage MASMC was greater than those in early-passage MASMC. We also examined whether intracellular zinc levels would be an aging factor or not. The intracellular zinc level in early- and late-passage MASMC was monitored by using the zinc probe dye N-(6-methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide. It is interested that late-passage MASMC increased the intracellular fluorescence level of zinc, more than the early passage MASMC did. The alterations of intracellular zinc level occur concurrently with changes in MASMC proliferation rate during aging. This data suggest that the age-associated changes in zinc concentrations may provide a new in vitro model for the study of smooth muscle cell differentiation.
Tetranectin (TN), an adipogenic serum protein, enhances adipocyte differentiation, however, its functional mechanism has yet to be elucidated. In the present study, we investigated the adipogenic function of TN by using medium containing TN-depleted fetal bovine serum (TN-del-FBS) and recombinant mouse TN (mTN). The adipocyte differentiation of 3T3-L1 cells was significantly enhanced by mTN supplementation essentially at differentiation induction, which indicated a potential role of the protein in the early differentiation phase. The adipogenic effect of mTN was more significant with insulin in the differentiation induction cocktail, implicating their close functional relationship. mTN enhanced not only the proliferation of growing cells, but also mitotic clonal expansion (MCE) that is a prerequisite for adipocyte differentiation in the early phase. Consistently, mTN increased the phosphorylation of ERK in the early phase of adipocyte differentiation. Results of this study demonstrate that the adipogenic function of mTN is mediated by enhancing MCE via ERK signaling.
This work was undertaken in order to study the developmental competence of nuclear transfer cat embryo with fetal fibroblast and adult skin fibroblast as donor nuclei. Oocytes wererecovered by mincing the ovaries in Hepes-buffered TCM199 and selected the cumulus oocyte complexes (COCs) with compact cumulus cell mass and dark. Homogenous ooplasm were cultured for maturation in TCM199 + 10% fetal bovine serum (FBS) for 12 hours and used as a source of recipient cytoplast for exogenous somatic nuclei. In Experiment 1, we evaluated the effect donor cell types on the reconstruction and development of cloned embryos. Fusion, first cleavage and blastocyst developmental rate was not different between fetal fibroblast and adult skin cell (71.2 vs. 66.8; 71.0 vs. 57.6; 4.0 vs. 6.1 %, P<0.05). In Experiment 2, cloned embryos were surgically transferred into the oviducts of recipient queens. One of seven recipient queens was delivered naturally 2healthy cloned cats and 1 stillborn from fetal fibroblast cell of male origin after 65 days embryo transfer. One of three recipient queens was delivered naturally 1 healthy cloned cat from adult skin cell of female after 65 days embryo transfer. The cloned cats showed genotypes identical to the donor cell lines, indicating that adult somatic cells can be used for feline cloning.
Choi, S.H.;Park, S.K.;Johnson, B.J.;Chung, K.Y.;Choi, C.W.;Kim, K. H.;Kim, W.Y.;Smith, S.B.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제28권3호
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pp.411-419
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2015
We previously demonstrated that bovine subcutaneous preadipocytes promote adipogenic gene expression in muscle satellite cells in a co-culture system. Herein we hypothesize that saturated fatty acids would promote adipogenic/lipogenic gene expression, whereas mono- and polyunsaturated fatty acids would have the opposite effect. Bovine semimembranosus satellite cells (BSC) and intramuscular preadipocytes (IPA) were isolated from crossbred steers and cultured with 10% fetal bovine serum (FBS)/Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) and 1% antibiotics during the 3-d proliferation period. After proliferation, cells were treated for 3 d with 3% horse serum/DMEM (BSC) or 5% FBS/DMEM (IPA) with antibiotics. Media also contained $10{\mu}g/mL$ insulin and $10{\mu}g/mL$ pioglitazone. Subsequently, differentiating BSC and IPA were cultured in their respective media with $40{\mu}M$ palmitic, stearic, oleic, or linoleic acid for 4 d. Finally, BSC and IPA were single- or co-cultured for an additional 2 h. All fatty acid treatments increased (p = 0.001) carnitine palmitoyltransferase-1 beta ($CPT1{\beta}$) gene expression, but the increase in $CPT1{\beta}$ gene expression was especially pronounced in IPA incubated with palmitic and stearic acid (6- to 17-fold increases). Oleic and linoleic acid decreased (p = 0.001) stearoyl-CoA desaturase (SCD) gene expression over 80% in both BSC and IPA. Conversely, palmitic and stearic acid increased SCD gene expression three fold in co-cultured in IPA, and stearic acid increased $AMPK{\alpha}$ gene expression in single- and co-cultured BSC and IPA. Consistent with our hypothesis, saturated fatty acids, especially stearic acid, promoted adipogenic and lipogenic gene expression, whereas unsaturated fatty acids decreased expression of those genes associated with fatty acid metabolism.
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