In this study the effect of extenders and temperatures on sperm viability and fertilizing capacity of boar sperm during long-term storage was investigated. Acrosomal integrity, membrane integrity, motility and hypo-osmotic resistance were evaluated by fluorescence and light microscopy. An in vitro fertilization test was performed to assess the fertilizing capacity of stored spermatozoa. The five diluents tested were ranked according to their ability to maintain sperm functional parameters and Zorlesco (ZO) extender with BSA or with PVA instead of BSA produced the best results. Zorlesco extender substituted with PVA (ZO+PVA) was found to maintain motility both at 15 and 20$^{\circ}C$. within 5 days of storage, but the quality of semen stored at 15$^{\circ}C$ decreased thereafter as compared to semen stored at 20$^{\circ}C$ Semen stored at 5$^{\circ}C$ demonstrated rapid loss of motility already within 24 h. Both fertilization and cleavage of semen stored at 20$^{\circ}C$ in ZO substituted with PVA instead of BSA did not change significantly until day 8 of storage. It is therefore concluded that PVA can be used to substitute for BSA and 20$^{\circ}C$ was more suitable than 15$^{\circ}C$ for boar semen storage, and in vitro fertilizing capacity of spermatozoa was maintained for at least 8 days in ZO+PVA at 20$^{\circ}C$.
This study evaluated the effect of fertilization-promoting peptide (FPP) on fertilizing ability and glycosidase activity in vitro of spermatozoa frozen-thawed in pig, Using chlortetracycline fluorescence analysis, the various glycosidase analyses and the oocyte penetration test, we have obtained evidence that FPP can promote the fertilizing ability and glycosidase activity of frozen-thawed spermatozoa in vitro. When frozen-thawed spermatozoa was washed with different concentrations of FPP, there were significantly (P<0.05) more acrosome-reacted in medium with 100 nM than 0, 50, 200 and 400 nM. The penetration rates were also highest in medium containing with 100 nM FPP (P<0.05). On the other hand, the $\beta$-N-acetylglucosaminidase activity was at least twofold higher than other glycosidase. In same glycosidase, however, there were no difference in medium with different concentrations of FPP In another experiment, spermatozoa preincubated in medium with or without FPP for 0, 1, 2, 3 and 4 h were inseminated with oocytes matured in vitro. The percentages of spermatozoa that reached acrosome reaction were affected by preincubation and were higher in medium with that than without FPP. When oocytes were inseminated with spermatozoa preincubated in medium with and without FPP during the different periods, however, penetration rates were decreased with preincubation periods of spermatozoa. On the other hand, when the sperm-oocyte were cultured for 4, 8, 12, 16, 20 and 24 h, the penetration rates were higher in spermatozoa preincubated with that than without FPP and had a tendency to increase as time of culture periods. However, The activities of $\alpha$-fucosidase, $\alpha$ -mannosidase, $\beta$-galactosidase and N-acetyl- $\beta$-D-glucosaminidase were higher in medium with that than without FPP regardless of periods of sperm preincubation and sperm-oocyte culture. These results suggest that FPP may play a positive role in promoting of sperm function and glycosidase activity in vitro in pig.
Bustamante-Gonzalez Jesus Damaso;Gutierrez-Diaz Dulce Leticia;Baca-Alejo Judith Sarai;Figueroa-Lucero Gerardo;Arenas-Rios Edith;Hernandez-Rubio Maria Cecilia;Avalos-Rodriguez Alejandro
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.27
no.5
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pp.306-313
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2024
The genus Chirostoma is endemic from the Mesa Central of Mexico. It is conformed of 18 species and six subspecies. Five species are in some category of risk, because of this, Chirostoma jordani is an excellent model species to implement biotechnologies like gametes cryopreservation. Aim of present study was to evaluate fertilizing capacity of cryopreserved C. jordani sperm, as alternative to conservation and assisted reproduction in this specie and genus. Males and females were collected from wild Atlangatepec dam stock, Tlaxcala State, Mexico. Seminal quality was evaluated in fresh and cryopreserved semen with three cryoprotective agents (CPAs): 10% dimethyl sulfoxide (DMSO), 10% methanol (MeOH), 14% ethylene glycol (EG) and it was determined its post-thaw fertilizing capacity. Sperm motility percentage decreased during cryopreservation process (p < 0.05). There were not significant differences in post-thaw motility percentage between EG (53.5 ± 1.9%) and MeOH (53.3 ± 1.3%), but DMSO (50.3 ± 0.5%) was significantly different (p < 0.05). Results showed that 0.2 μL fresh semen were enough to fertilize 100% oocytes (n = 60). 10 μL DMSO and 5 μL MeOH and EG cryopreserved semen were necessary to fertilize oocytes 100% (n = 60) (p < 0.05). Cryopreservation and fertilization protocol for C. jordani sperm was efficient and it could be used for its assisted reproduction.
Sung, Hwan In;Song, Ki Sun;Cha, Young Geun;Kim, Jong Jin
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.100
no.4
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pp.598-608
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2011
The purpose of this study was to examine potential effects of shading and fertilizing treatment - two basic applicable factors in production of 1-year-old container seedling - on growth and seedling quality of Quercus myrsinaefolia, one of evergreen tree species in warm temperate zone of Korean. Every experimental process was conducted in a facility that consisted of compartments under the lighting control with full sunlight and shading (35%, 55% and 75% of full sunlight). Based on fertilizing treatment, this study made an experiment in 4 groups of container seedling: control (non-treated seedlings) and 1000, 2000, 3000 ppm group (3 groups with different concentrations of water-soluble fertilizer (N:P:K=19:19:19, v/v). Seedlings under 55% shading with 2000 ppm concentration showed the highest height (totaling 21.1 cm), and under 35% shading with 2000 ppm concentration showed the highest root collar diameter growth (totaling 3.96 mm) among others. All three fertilizing groups except control showed H/D ratio ranging from 4.27 to 5.26 regardless of fertilizer concentration under 35% and 55% shading where container seedlings showed a tendency toward excellent growth of height and root collar diameter. Overall, 2000 ppm group under 55% shading showed highest dry mass production of leaves (1,292 g) among others, while 2000 ppm group under 35% shading showed highest dry mass production of shoots and roots (0.592 g and 0.998 g, respectively) among others. Also, it was found that 2000 ppm group under 35% shading showed the highest dry mass production of whole seedling, which was followed by 2000 ppm group under 55% shading and 3000 ppm group under 35% shading, respectively. According to analysis on LWR of Quercus myrsinaefolia depending on shading and fertilizing treatment, it was found that 3000 ppm group under 75% shading showed highest LWR level among others, whereas every fertilized group showed lower RWR level than control without fertilizing regardless of shading levels. In general, all fertilized groups under 55% shading had relatively high quality index (QI), and 2000 ppm group under 35% shading had highest QI among others. Based on the findings of this study, it is concluded that shading level ranging from 35 to 55% and fertilizing concentration of 2,000 ppm are suitable for producing 1-year-old container seedlings of Quercus myrsinaefolia with excellent growth and high quality index.
The experiment was carried out to study the influence of seeding dates, planting densities and fertilizer application levels on some agronmic characters and yield of fresh weight in Agastache rugosa. The results obtained are summarized as follow; Fresh weight was increased on Apr. 1 seeding date. Therefore, optimum time for sowing was on Apr. 1. Stem length was long in dense planting and short in spacious planting. Stem diameter was thick in spacious planting, and was thin in dense planting. Yield was higher in dense planting densities($10{\times}20cm:50\;plants/m^2,\;20{\times}20cm:25\;plants/m^2,\;(30{\times}20cm:17\;plants/m^2$) Fertilizing ($N:P_2O_5;K_2O=6:6:6kg/10a$) was increased than without fertilizing because stem length and number of leaf were good.
The constituents and proportions of non-protein free amino acids including canavanine were measured in roots and leaves of legumes, Robinia pseudo-acacia L., Wistaria floribunda L., and Canavalia lineata L. by using high performance liquid chromatography during dormant and fertilizing seasons. in all the three plant species, asparagine was the most abundant amino acid occurring 30% of total free amino acids, and canavanine was the second most abundant amino acid contributing 10% of total free amino acids throughout dormant and fertilizing seasons. In dormant season, roots contained 2 to 3 folds of free amino acids including canavanine and asparagine compared to those in fertilizing season. When proportions of asparagine and canavanine to total gree amino acids in various parts of C. lineata were examined in fertilizinng season, the level of asparagine was the highest in roots while that of canavanine was in seeds. On the basis of these results, it is assumed that canavanine appears and functions as a nitrogen-storing compound in roots and leaves throughout the whole life cycle of the investigated plants.
In the light of the present situation of fertilizing presently apllied in farmer's mulberry fields, it was considered to be value enough to carry out the experiment on whether its degree of fertilizing have no affect on silkworm growth and their cocoon harvest as well, so that the results thus obtained from the experiment are as following; The amount of fertilizing, N 44.4kg, P$_2$O$\sub$5/ 18.4kg, and K$_2$O 34.4kg, respectively were minimum for the . east affect on the silkworm growth and cocoon yields.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.14
no.1
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pp.1-6
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1994
This experiment was carried out to study the effect of cutting frequencies(2, 3: one time grazed after 2 cuts, 3, 4, 6 cuts per year) and nitrogen fertilization(0 and 120 kg per ha and year) on botanical composition of permanent grassland at the "Federal Research Institute for Agriculture in Alpine Regions(Gumpenstein)," Austria The results are summarized as follows: 1. With only fertilizing phosphorus(P) and potassium(K),mean annual dry matter yields were 6.9 - 8.4 ton per ha and highest when only one time grazed after 2 cuts, but fell progressively with increase in cutting frequency and additonal fertilization of nitrogen. The average nitrogen efficiences expensed as dry matter yieldsfig) per feltilized nitrogenfig per ha) were 10.3 kg. 2. When N fertilizer was applied, the proportion of tall and medium grasses in the mixed swards increased by 30 - 50% compared with only fertilizing PK. Whereas swards with fertilizing only PK generally stimulated composition of the legumes at the expense of the grasses(30 - 50%). 3. Although the proportion of tall and medium grasses(Trisetum flavescens and Dachlis glomerara) and tall herbs(hntodon hispidus, Taraxacum oflcinale and Aegopodium podagraria) increased by infrequent cutting, frequently cutting plots helped increase the proportion of short grasses(Poa pratensis and Poa trivialis), especially where plots both had been applied with nitrogen fertilizer. 4. Nitrogen fertilization resulted in higher existence of herbs and weeds such as Taramcum oficinale. Aegopodium podagraria, Galium mllugo, Anthriscus silvestris and Lamium album. 5. Due to unusually high or low cutting frequencies such as 4 cuts or 2 cuts per year increased botanical compostion of Heracleum sphondylium.hondylium.
Objective : This study was designed to investigate the interrelationship and clinical usefulness of sperm morphology by strict criteria (SM), acrosome reaction following ionophore challenge test (ARIC) and sperm penetration assay (SPA) using zona-free hamster ova as prognostic factors in in vitro fertilization. Materials and Methods: Semen samples were provided by 83 patients undergoing IVF. We first evaluated the differences between normal fertilization group and poor fertilization group on three andrologic tests. Secondly, we analyzed the relationship between the three andrologic tests and in vitro fertilization on IVF settings. Finally, we evaluated the effectiveness of the three andrologic tests as the prognostic indicators for fertilizing ability. Results: The fertilization rate of all men in the poor fertilization group was less than 30%; but there was no evidence that this poor fertilization was due to oocyte defects. The results of three andrologic tests were significatly higher in normal fertilization group. Fertilization rate (%) in vitro was highly correlated (p<0.001) with % normal sperm by SM, ARIC value (%), and SPA result. By using Receiver-Operator-Characteristic curve (ROC), we evaluated the effectiveness of these three tests. The sensitivity and specificity of SM, ARIC test and SPA in predicting fertilization potential in IVF setting were 76% and 75%, 84% and 90%, and 76% and 95%, respectively. Conclusion: Our data suggest that the three andrologic tests can be reliable tools as prognostic factors of sperm fertilizing ability. Among these test, ARIC test and SPA gave more accurate information on fertilizing capacity. ARIC test was shown to have a predictive value for fertilizing ability comparable to that of SPA that appears to be a simple and cost-effective addition to current andrology laboratory. Combined application of these three tests may give more information on predicting sperm fertilizing capacity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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