• 한국가축번식학회지
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• 제14권1호
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• pp.73-83
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• 1990

These studies were carried out to find the proper conditions for in vitro maturation and fertilization of bovine follicular oocytes and culture methods capable of further developing early embryos. For these objectives, the cleavage rate of oocytes matured and fertilized in vitro was investigated under medium supplemented with hormones and estrous cow serum and season of oocytes collection as well as different cumulus cell stage before insemination. Finally, 2~8 cell embryos were cultured in in vitro and in vitro culture system to investigate developmental capacity into morula. 1. Cleavage rate of oocytes matured in vitro was 27%(20/73) for A(LH＋FSH＋estradil-17$\beta$＋10% FBS), 38%(27/71) for B(LH＋10% ECS) and 27%(15/56) for C(10% ECS), respectively. Supplement B showed more higher rate and 4~8 cell embryos were also obtained much more in this group(67%, 18/27). In vitro maturation rate of follicular oocytes cultured in TCM 199 supplemented withLH and 10% ECS was 88%(75/85). 2. Cleavage rate(15%, 10/65) of oocytes collected in summer was significantly lower than in fall(47%, 42/89). 3. Cleavage rate(15%, 10/65) of oocytes collected in summer was significantly lower than in fall(47%, 42/89). 3. Cleavage rate(15%, 10/65) of oocytes with partially removed cumulus cell before insemination was more higher than that(44%, 27/62) of oocytes with intact cumulus cell. 4. The frequency of development from early cleaved embryos into morula was 6%(4/65), 12%(4/33) for co-culture of cumulus cell monolayer and bovine oviduct epithelial cell monolayer, respectively and 25%(6/25) in ligated rabbit oviduct.

• Journal of Ecology and Environment
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• 제31권3호
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• pp.167-176
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• 2008

Atmospheric N deposition has far-reaching impacts on forest ecosystems, including on-site impacts such as soil acidification, fertilization, and nutrient imbalances, and off-site environmental impacts such as nitrate leaching and nitrous oxide emission. Although chronic N deposition has been believed to lead to forest N saturation, recent evidence suggests that N retention capacity, particularly in the forest floor, can be surprisingly high even under high N deposition. This review aims to provide an overview of N retention processes in the forest floor and the implications of changing C-N interactions for C sequestration. The fate of available N in forest soils has been explained by the competitive balance between tree roots, soil heterotrophs, and nitrifiers. However, high rates of N retention have been observed in numerous N addition experiments without noticeable increases in tree growth and soil respiration. Alternative hypotheses have been proposed to explain the gap between the input and loss of N in N-enriched, C-limited systems, including abiotic immobilization and mycorrhizal assimilation, both of which do not require additional C sources to incorporate N in soil N pools. Different fates of N in the forest floor have different implications for C sequestration. N-induced tree growth can enhance C accumulation in tree biomass as observed across temperate regions. C loss from forests can amount to or outweigh C gain in N-saturated, declining forests, while another type of 'C-N decoupling' can have positive or neutral effects on soil C sequestration through hampered organic matter decomposition or abiotic N immobilization, respectively.

• 대한수의학회지
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• 제33권1호
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• pp.179-188
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• 1993

The developmental capacity of bovine oocytes under three different culture systems was investigated in this experiment ; One was culture in TCM199 with bovine oviductal epithelial cells(BOEC) for in vitro culture, another was culture in TCM199 with BOEC for 2 days and then transfer of 4~8cell embryos to rabbit oviduct(RO) and the other was transfer of 1 or 2cell embryos to RO for in vivo culture. And the other concern of this experiment was to investigate the effect of culture period and transfer site on recovery. Immature bovine oocytes were cultured in TCM199 with granulosa cells for 22-24hrs and then fertilized in vitro using frozen-thawed semen treated with BO-caffine and BO-BSA. Fifteen to 18hrs after in vitro fertilization oocytes were cultured in TCM199 with BOEC or transferred to RO for 5 days. The rate of development to the morula or blastocyst was higher in transfer of 1 or 2cell embryos to RO(23.1%) than culture in TCM199 with BOEC(11.7%). But, there was no difference between transfer of 1 or 2cell embryos and transfer of 4~8cell embryos to RO(12.8%). Recovery under different culture periods in RO was significantly higher in 90~95hrs(70.1%) than 122~125hrs(50.9%, p<0.05) and recovery significantly increased when oocytes were transferred deeper in RO(2.5cm>, 47.7% ; 2.5~4.5cm, 63.9% ; 4.5cm<, 77.3%, p<0.05). The results show that transfer of 1 or 2cell embryos to RO is an effective means of supporting the further development of in vitro matured and fertilized bovine oocytes than culture in TCM199 with BOEC or transfer of 4~8cell embryos to RO, and recovery from RO increases when oocytes are transferred deeper and incubated shorter in RO.

• 한국양식학회지
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• 제11권1호
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• pp.67-75
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• 1998

감성돔 (Acanthopagrus schlegeli) 정자의 냉동 보존시 정자의 생리활성과 보존효과를 비교하기 위하여, 순환여과 사육시스템에서 사육한 전장 $25.9{\pm}1.7$ cm, 체중$292.8{\pm}53.7$ g의 성어로부터 얻은 정액을 재료로 하여 희석액별, 동해방지제별 해동후 정자의 활성, 생존율 및 알에 대한 수정능력을 평가하였다. 희석액별 냉동보존에서 해동정자의 생존율은 3% sodium citrate에서 $80{\pm}1.4$%로 가장 높았으나, 수정률은 5.4% glucose에서 $63.4{\pm}4.4$%로 가장 높았다. 동해방지제별 냉동보존에서 해동정자의 수정률은 5~15% glycerol을 동해방지제로 사용하였을 때, 50.1~69.4%로 DMSO 보다 나은 효과를 보였다. 감성돔 정자의 냉동보존을 위한 적정 희석액과 동해방지제는 5% glucose와 5% glycerol이었다. 냉동하지 않은 감성돔 정자의 머리는 구형으로 직경 $1.5{\pm}0.1$ ${\mu}$m, 길이 $1.3{\pm}0.1$${\mu}$m였으며, 치밀한 핵질로 채워져 있었다. 편모는 전형적인 9+2 구조를 나타냈다. 그러나 냉동후 해동시킨 정자중에서는 염색질의 과립화, 세포막의 이탈에 의한 그 용적이 커지는 구조변화를 보였다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제8권6호
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• pp.641-645
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• 1995

This study was conducted to develop a method for production of nuclear transplant bovine embryos using in vitro-matured (IVM) oocytes and to examine the effect of different conditions of electrofusion on fusion rate and developmental capacity of donor nucleus transplanted to enucleated oocytes. Eight- to sixteen-cell embryos derived from oocytes matured and fertilized in vitro used as donor blastomeres and IVM oocytes were used as recipient oocytes. Oocytes were enucleated immediately after 23-24 h IVM and then reconstituted with a donor blastomere in two different micromanipulation media. Fusion rate and subsequent development of the reconstituted oocytes was compared under the different electric stimuli and recipient oocyte ages. Success rate of enucleation was significantly higher in TCM-199 medium containing FCS than in DPBS. The high fusion rate(75-94%) and development (6.4-14.8%) to morulae and blastocyst (M + B) were obtained from 0.6-0.75 kV/cm DC voltage, although total cleavage was not different among the electric pulses. Most optimal condition of electric stimulation for fusion and development was 1 DC voltage of 0.75 kV/cm, in which 80.5% of oocytes were fused, 80.0% and 31.7% of which was cleaved and developed to M + B, respectively. No M + B was obtained from 1.2 kV/cm DC voltage regardless of pulse frequency. Recipint oocyte age at electrofusion greatly affected the cleavage and subsequent development to M + B, showing high rate at 40-41 h oocyte maturation. These results suggest that a suitable condition of electrofusion for donor nuclei derived from IVF may be 1-2 DC pulses of 0.7 kV/cm for $70{\mu}sec$ and that processing of a transplanted nucleus in IVM oocytes may be affected by maturation age of recipient oocytes.

• 환경생물
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• 제25권4호
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• pp.378-384
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• 2007

멸종위기에 처한 우리나라 고유 담수어인 꼬치동자개 Pseudobagrus brevicorpus의 증식 복원을 위한 연구의 일환으로 생태와 초기생활사에 대해 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 꼬치동자개는 특정 조건에 밀집되어 개체군을 형성하며 서식밀도는 1.25개체 $m^{-2}$이었고, 생산력은 200$\sim$250개 마리$^{-1}$ 낮아 멸종위기 상황을 시사하였다. 산란은 자연산란 유도 결과 수초에 산란하는 것으로 추정되며 부화한 치어는 군집생활을 한다. 수정난은 약 50시간만에 부화하였으며, 부화 3일 후 난황이 거의 흡수되었고, 부화 8일 후에는 올챙이형으로 군집하며, 30일경에 어미와 같은 형태를 보이는 치어기로 성장하였다. 이러한 산란 생태와 관련하여 멸종위기에 처한 꼬치동자개의 증식 복원과 보존을 위한 방안들을 고찰하였다.

• 한국토양비료학회지
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• 제28권3호
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• pp.241-248
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• 1995

연작(連作)으로 재배되고 있는 꽈리풋고추 비닐하우스 재배지토양의 화학적 성질을 진단하고 이와 작물생육과의 관계를 밝힐 목적에서 충남 당진군내 36개 농가포장을 조사 분석한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 토양화학성분중 가장 높은 빈도(頻度)를 보인 범위 및 비율은 pH 6.1~6.5(36%), OM 1.6~2.0%(31%), 유효인산 601~800mg/kg(39%), CEC 12.1~14.0 c mol/kg(39%), clay 16.1~18.0% (50%), 전기 전도도 EC 2.0 dS/m 이하가 44%로 많았다. 2. 풋고추 수량은 pH, CEC, 유기물 함량, 점토 함량과는 고도의 정산관(正相關)이 있었고 EC와는 고도의 부(負)의 상관(相關)을 보였다. 3. 전기전도도 EC값은 CEC와 파장 높은 부상관($r=-0.81^{**}$)이 있었고, 점토함량 또는 유기물 함량과도 고도의 부상관이 있었다. 4. 토양화학성분과 EC와의 상관관계에서 EC를 2.0dS/m 이하로 낮추는데에는 점토 18%, 유기물 2.3%이상이 되어야 한다는 것을 나타내었다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제50권4호
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• pp.244-252
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• 2023

Objective: We evaluated the efficacy of the newly developed optimized in vitro culture (OIVC) dish for cultivating preimplantation mouse embryos. This dish minimizes the need for mineral oil and incorporates microwells, providing a stable culture environment and enabling independent monitoring of individual embryos. Methods: Mouse pronuclear (PN) zygotes and two-cell-stage embryos were collected at 18 and 46 hours after human chorionic gonadotropin injection, respectively. These were cultured for 120 hours using potassium simplex optimized medium (KSOM) to reach the blastocyst stage. The embryos were randomly allocated into three groups, each cultured in one of three dishes: a 60-mm culture dish, a microdrop dish, and an OIVC dish that we developed. Results: The OIVC dish effectively maintained the osmolarity of the KSOM culture medium over a 5-day period using only 2 mL of mineral oil. This contrasts with the significant osmolarity increase observed in the 60-mm culture dish. Additionally, the OIVC dish exhibited higher blastulation rates from two-cell embryos (100%) relative to the other dish types. Moreover, blastocysts derived from both PN zygotes and two-cell embryos in the OIVC dish group demonstrated significantly elevated mean cell numbers. Conclusion: Use of the OIVC dish markedly increased the number of cells in blastocysts derived from the in vitro culture of preimplantation mouse embryos. The capacity of this dish to maintain medium osmolarity with minimal mineral oil usage represents a breakthrough that may advance embryo culture techniques for various mammals, including human in vitro fertilization and embryo transfer programs.

• 한국가축번식학회지
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• 제22권1호
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• pp.1-9
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• 1998

본 연구는 체외에서 성숙된 소 미수정란을 electron microscope grid와 동해제인 EFS30을 이용하여 초급속 동결하였을 때 정상적인 배 발달의 유도 가능성 여부를 조사하고 동해제 및 동결방법의 유해성 여부를 indirect immunocytochemistry방법으로 확인하고자 실시하였다. 동해제는 30% ethylene glycol, 0.5 M sucrose, 18% ficoll과 10% FBS가 들어 있는 PBS로 된 EFS30을 사용하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 동해제와 동결과정이 난자의 microtubule, microfilament 및 chromatin의 형태에 미치는 영향을 indirect immunocytochemistry방법으로 조사하였던 바, 동해제 노출 뿐 아니라 동결에 의해서도 대조군과 차이를 나타내지 않았다. 초급속 동결이 소 미수정란의 체외수정에 미치는 영향을 검토했을 때, 총 정자침투율(96.7%, 90.0%), 정상 자응전핵 형성율(74.6%, 68.9%)과 난자당 정자수(1.50, 1.44)가 동결군과 대조군에 있어서 차이는 볼 수 없었다. 또한, 초급속 동결-융해 후의 체외발달능을 조사했던 경우, 85.5%의 높은 난자 생존율과 74.5%의 난할율, 그리고 31.4%의 배반포 형성율을 얻었다. 이러한 결과는 난자의 생존율을 제외한 수정율과 배반포 형성율에 있어서 대조군(76.0%, 34.6%)과 노출군(77.9%, 33.0%)의 결과와 매우 유사한 것이었다. 이와 더불어, 각 처리군에서 얻어진 배반포기배를 Hoechst 염색방법으로 총세포수를 조사하였을 때도 그 차이는 확인할 수 없었다. 따라서 체외에서 성숙된 소 미수정란은 EM grid와 EFS30 동결액을 이용한 초급속 동결방법으로 동결하였을 때 정상적인 배발달을 유도할 수 있다는 것을 알 수 있었다.(收量)은 양공시두부(兩供試頭部) 모두 괴근장(塊根長)과 정(正)의 상관(相關)이, 분기수(分岐數)와는 부(負)의 상관(相關)이있었다.(發芽率)이 98.1%이던 것이 68.8%로 감소(減少)하였다. 3. 온도변화(溫度變化)에 따른 수수의 발아소요일수(發芽所要日數)는 12일(日)($15/10^{\circ}C$), 6일(日)($25/20^{\circ}C$) 및 3일(日)($40/35^{\circ}C$)로 온도(溫度)가 상승(上昇)함에 따라 비례적(比例的)으로 단축(短縮)되었다. 옥수수 수는 16일(日), 7일(日) 및 3일(日)이 소요(所要)되었다.量)은 $24.6{\sim}36.7%$로서 건엽중(乾葉中)의 함량(含量)보다 월등히 높았고 조단백질함량(粗蛋白質含量)은 $2.0{\sim}5.3%$로서 건엽중(乾葉中)의 함량(含量)보다 현저히 낮았다. 특(特)히 P.931의 건경중(乾莖中)의 조섬유함량(粗纖維含量)은 다른 작물(作物)에 비해 현저(顯著)히 높은 편이었다.적차이(量的差異)를 나타냈다.間)에는 부(負)(-)의 상관(相關)이 있다.($P{\leq}0.01%$). 5. NEL 및 starch value 환경온도(環境溫度)가 상승(上昇)됨에 따라 감소(減少)된다. 4 엽기(葉期) sorghum식물(植物)의 환경온도(環境溫度)를 달리 하였을 때 NEL가치(價値)는 각각(各各) 4.87MJ($30/25^{\circ}C$), 5.46MJ($25/20^{\circ}C$) 및 5.81MJ/kg($18/8^{\circ}C$)로 변(變)하여 고온(高溫)에서 net energy lactation 축적(蓄積)이 크게 감소(減少)되었다.다. 그러나 기온(氣溫)이 낮은 조건(條件)

• Applied Biological Chemistry
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• 제44권2호
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• pp.92-96
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• 2001

농경지로의 개발 가능성이 높은 중국 길림성 백성지역의 주요한 토양인 흑개토의 이화학성 및 인산 흡착특성을 조사하였다. 토지 이용방식 또는 재배작물이 서로 다른 중국 길림성 백성지역 4곳과 중국 용정에 위치한 연변 대학교 농과대학 부속 시험장 1곳에서 1993년 8월에 토양을 채취하여 실험을 수행하였다, 중국 길림성 백성지역 토양의 $_PH$는 미경작지 10.2, 경작지는 $7.3{\sim}7.6$으로 비교적 높았다. 양이온 치환용량은 20 cmol(+) $kg^{-1}$ 이상이었으며, 치환성 양이온 중 Na는 특히 표토에 많이 존재하였으며, Ca의 함량이 매우 높아 Ca 포화율이 100% 이상을 나타내었다. 토양 포화 침출액의 주요 양이온은 Na이었으며, ECe와 SAR을 기준으로 백성 미경작지 토양은 염류-나트륨성 토양, 경작지 토양은 나트륨성 또는 일반 토양에 해당하였다. 백성지역 토양의 유효인산 함량은 10mg P $kg^{-1}$ 미만으로 아주 낮았으며, 최대 인산흡착량은 $ $ mg P $kg^{-1}$이었다. 길림성 백성지역 토양의 경우 유효인산 함량이 매우 낮아 토양 비옥도 중진을 위한 인산질 비료의 시용과 함께 토양 투수성의 개선 등과 같은 적절한 토양 관리가 필요하며, 용정지역 토양의 경우에는 인산흡착 특성을 고려하여 인의 과잉 축적을 방지하기 위한 인산질 비료의 적정 시용을 권장하여야 한다.