Lactococcus lactis SA72 from Jeot-gal (Korean traditional fermented fish foods) produces lacticin SA72. The influence of several parameters on the fermentative production of lacticin SA72 by Lactococcus lactis SA72 was studied. MRS medium among several media was selected for enhanced bacteriocin production. The mean growth rate and bacteriocin productivity of L. lactis SA72 increased as the initial pH of the media increases. The highest lacticin SA72 activity was detected 3,200 AU/ml at pH 6.0, $32^{\circ}C$, and 1% (inoculum size, v/v) in the jar fermenter. Enhanced production of lacticin SA72 was investigated by a fed-batch cultivation with the intermittent feeding of the concentrated glucose solution. Under the optimized conditions, lacticin SA72 activity finally reached to 6,400 AU/ml.
In this paper, we describe a bio-fluidic device for adaptive sample pretreatment, in order to optimize the conditions under which absorbance assays can be conducted. This device can be successfully applied to the measurement of Escherichia coli (E. coli) concentrations using adaptive dilution, with which the dilution ratio can be adjusted during the dilution. Although many attempts have been previously made to miniaturize complex biochemical analyses at the chip scale, very few sample pretreatment processes have actually been miniaturized or automated at this point. Due to the lack of currently available on-chip pretreatments, analytical instruments tend to suffer from a limited range of analysis. This occasionally hinders the direct and quantitative analysis of specific analyses obtained from real samples. In order to overcome these issues, we exploit two novel strategies: dilution with a programmable ratio, and to-and-fro mixing. The bio-fluidic device consists of a rectangular chamber constructed of poly(dimethylsiloxane) (PDMS). This chamber has four openings, an inlet, an outlet, an air control, and an air vent. Each of the dilution cycles is comprised of four steps: detection, liquid drain, buffer injection, and to-and-fro mixing. When using adaptive sample pretreatment, the range in which E. coli concentrations can be measured is broadened, to an optical density (O.D.) range of $0.3{\sim}30$. This device may prove useful in the on-line monitoring of cell concentrations, in both fermenter and aqueous environments.
In order to produce alcohol for the alternative energy from dried powder of Jerusalem artichoke was investigated with Kluyveromyces marxianus UCD(FST)55-82, which was reported to assimilate inulin. The optimal condition for the production of ethanol by K. marxianus was elucidated to be incubation temperature of $30^{\circ}C$, initial pH 5.44, agitation of 100 rpm, 1,000 ml of medium in a 2.5l-vessel, anaerobic state, and inoculation of 2.5%(v/v). Addition of antifoam A concentrate(si1icon polymer) of 0.01% and urea of 0.1% increased the concentration of ethanol effectively. The optimized condition showed ethanol concentration of 6.8%(v/v) in Jerusalem artichoke liquid medium, production yield of 91.91% and productivity of 2.71 g/l/hr during the first day and 0.71g ethanol/l/hr during four days of incubation.
Wang, Miao;Wang, Shaohua;Zong, Gongli;Hou, Zhongwen;Liu, Fei;Liao, D. Joshua;Zhu, Xiqiang
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.2
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pp.241-247
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2016
Natamycin is a widely used antifungal antibiotic. For natamycin biosynthesis, the gene pimE encodes cholesterol oxidase, which acts as a signalling protein. To confirm the positive effect of the gene pimE on natamycin biosynthesis, an additional copy of the gene pimE was inserted into the genome of Streptomyces gilvosporeus 712 under the control of the ermE* promoter (permE*) using intergeneric conjugation. Overexpression of the target protein engendered 72% and 81% increases in the natamycin production and cell productivity, respectively, compared with the control strain. Further improvement in the antibiotic production was achieved in a 1 L fermenter to 7.0 g/l, which was a 153% improvement after 120 h cultivation. Exconjugants highly expressing pimE and pimM were constructed to investigate the effects of both genes on the increase of natamycin production. However, the co-effect of pimE and pimM did not enhance the antibiotic production obviously, compared with the exconjugants highly expressing pimE only. These results suggest not only a new application of cholesterol oxidase but also a useful strategy to genetically engineer natamycin production.
Azotobacter vinelandii, a strict aerobic nitrogen-fixing bacterium, has been extensively studied with regard to the ability of $N_2$-fixation due to its high expression of nitrogenase and fast growth. Because nitrogenase can also reduce cyanide to ammonia and methane, cyanide degradation by A. vinelandii has been studied for the application in the bioremediation of cyanide-contaminated wastewater. Cyanide degradation by A. vinelandii in NFS (nitrogen-free sucrose) medium was examined in terms of cell growth and cyanide reduction, and the results were applied for cyanide-contaminated cassava mill wastewater. From the NFS medium study in the 300 ml flask, it was found that A. vinelandii in the early stationary growth phase could reduce cyanide more rapidly than the cells in the exponential growth phase, and 84.4% of cyanide was degraded in 66 h incubation upon addition of 3.0 mM of NaCN. The resting cells of A. vinelandii could also reduce cyanide concentration by 90.4% with 3.0 mM of NaCN in the large-scale (3 L) fermentation with the same incubation time. Finally, the optimized conditions were applied to the cassava mill wastewater bioremediation, and A. vinelandii was able to reduce the cyanide concentration by 69.7% after 66 h in the cassava mill wastewater containing 4.0 mM of NaCN in the 3 L fermenter. Related to cyanide degradation in the cassava mill wastewater, nitrogenase was the responsible enzyme, which was confirmed by methane production. These findings would be helpful to design a practical bioremediation system for the treatment of cyanide-contaminated wastewater.
Kim, Byung-Chun;Deshpande, Tushar R.;Chun, Jongsik;Yi, Sung Chul;Kim, Hyunook;Um, Youngsoon;Sang, Byoung-In
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.2
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pp.189-194
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2013
In a study of hydrogen-producing bacteria, strain T4384 was isolated from rice field samples in the Republic of Korea. The isolate was identified as Enterobacter sp. T4384 by phylogenetic analysis of 16S rRNA and rpoB gene sequences. Enterobacter sp. T4384 grew at a temperature range of $10-45^{\circ}C$ and at an initial pH range of 4.5-9.5. Strain T4384 produced hydrogen at 0-6% NaCl by using glucose, fructose, and mannose. In serum bottle cultures using a complete medium, Enterobacter sp. T4384 produced 1,098 ml/l $H_2$, 4.0 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid. In a pH-regulated jar fermenter culture with the biogas removed, 2,202 ml/l $H_2$, 6.2 g/l ethanol, and 1.0 g/l acetic acid were produced, and the lag-phase time was 4.8 h. Strain T4384 metabolized the hydrolysate of organic waste for the production of hydrogen and volatile fatty acid. The strain T4384 produced 947 ml/l $H_2$, 3.2 g/l ethanol, and 0.2 g/l acetic acid from 6% (w/v) food waste hydrolysate; 738 ml/l $H_2$, 4.2 g/l ethanol, and 0.8 g/l acetic acid from Miscanthus sinensis hydrolysate; and 805 ml/l $H_2$, 5.0 g/l ethanol, and 0.7 g/l acetic acid from Sorghum bicolor hydrolysate.
The ginsenoside Rh2 has strong anti-cancer, anti-inflammatory, and anti-diabetic effects. However, the application of ginsenoside Rh2 is restricted because of the small amounts found in Korean white and red ginsengs. To enhance the production of ginsenoside Rh2-MIX (comprising 20(S)-Rh2, 20(R)-Rh2, Rk2, and Rh3 as a 10-g unit) with high specificity, yield, and purity, a new combination of enzymatic conversion using the commercial enzyme Viscozyme L followed by acid treatment was developed. Viscozyme L treatment at pH 5.0 and $50^{\circ}C$ was used initially to transform the major ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, and Rd into ginsenoside F2, followed by acid-heat treatment using citric acid 2% (w/v) at pH 2.0 and $121^{\circ}C$ for 15 min. Scale-up production in a 10-L jar fermenter, using 60 g of the protopanaxadiol-type ginsenoside mixture from ginseng roots, produced 24 g of ginsenoside Rh2-MIX. Using 2 g of Rh2-MIX, 131 mg of 20(S)-Rh2, 58 mg of 20(R)-Rh2, 47 mg of Rk2, and 26 mg of Rh3 were obtained at over 98% chromatographic purity. Then, the anti-cancer effect of the four purified ginsenosides was investigated on B16F10, MDA-MB-231, and HuH-7 cell lines. As a result, these four rare ginsenosides markedly inhibited the growth of the cancer cell lines. These results suggested that rare ginsenoside Rh2-MIX could be exploited to prepare an anti-cancer supplement in the functional food and pharmaceutical industries.
In this work, mass production of Bacillus licheniformis SCD121067 through medium optimization by statistical experimental method was studied. First, galactose, yeast extract and potassium phosphate dibasic were selected as carbon, nitrogen and phosphate sources for mass production of B. licheniformis SCD121067 by using one factor at a time method. Second, according to the result of Plackett-Burman experimental design, key factors was yeast extract and $K_2HPO$. Finally, the response surface methodology was performed to obtain the optimum concentrations of two selected variables. The optimized medium composition consisted of 20 g/L galactose, 36 g/L yeast extract, 0.41 g/L $K_2HPO4$, 0.25 g/L $Na_2CO_3$, 0.4g/L $MgSO_4$ and 0.01g/L $CaCl_2$. Dry cell weight (15.4 g/L) by optimum production medium were increased 10 times, as compared to that determined with basic production medium (1.5 g/L). Fermentation conditions were examined for the mass production of B. licheniformis. The effect of temperature, agitation speed, pH and aeration rate on the mass production of B. licheniformis were also studied in a batch fermenter which was carried out in a 2.5 L bioreactor with a working volume of 1.5 L containing optimized production medium. As a result, dry cell weight of batch culture was 30.7 g/L at $42^{\circ}C$, 300 rpm, pH 8.0 and 2 vvm.
Previous study (J. of Chem. Technol. Biotechnol. 2004, 79, 79-84) showed that bacterial cellulose (BC) produced by a bacterial strain JH232 has potential as a source for environmentally friendly ion exchange membranes. In this study, strain JH232 was investigated for phylogenetic classified and characterized for BC production. Comparative analysis of 16S rRNA gene revealed that the strain belongs to the genus Gluconacetobacter. Maximum production of BC was observed when JH232 was cultured in CSL medium (pH 5.5) at $30^{\circ}C$ as determined by flask experiment. When batch and fed-batch cultures of JH232 were performed in the fermenter experiment to compare BC productivity of the strain, BC productivity of fed-batch culture was 1.56 times higher than that of batch culture.
A plasmid pTTY2, containing the lipase-producing gene, was used to transform an E. coli phage lysogen, P90c/$\phi$434, into the lipase-producing lysogen, P90c/$\phi$434/pTTY2. After the overproduction of lipase by the isopropylthio-${\beta}$-D-galactoside induction, the prophage $\phi$434 in the chromosome of the host cell was induced by the milomycin C addition or ultraviolet irradiation to lyse the host cell. The optimum operating conditions, such as the isopropylthio-${\beta}$-D-galactoside induction period and the phage induction timing, were sought for the efficient cell lysis in the same fermenter. Effective cell lysis occurred at the earlier exponential growth phase with the isopropylthio-${\beta}$-D-galactoside induction period of 1 hour. The amount of the lipase production was qualitatively measured by the halo size in Luria-Bertani agar medium containing tributyrin and Rhodamine B plate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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