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Fe65단백질의 한 PTB 도메인에 대한 과발현 및 초기 결정화 (High-level production and initial crystallization of a Fe65 PTB domain)

  • 노승현;하남출
    • 생명과학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.18-23
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    • 2007
  • 신경세포에 특이적으로 발현되는 단백질인 Fe65는 두 개의 phosphotyrosine binding(PTB) 도메인을 가지고 있다. 두번째 PTB(PTB2)도메인은 아밀로이드 베타 전구 단백질(APP)의 세포질 도메인 조각(AICD)와 결합한다. 최근 연구 결과들은 AICD와 Fe65로 이루어진 결합체가 알츠하이머병에서 신경세포를 죽게 하는 유전자를 발현한다고 제시하고 있다. 따라서 Fe65와 AICD의 결합을 방해하는 화합물은 알츠하이머병을 치료하는데 후보물질이 될 수 있다. 하지만 AICD와 Fe65와 관련된 신호전달에 대한 분자적 기전은 잘 알려져 있지 않다. 이번 연구에서는 Fe65의 PTB2도메인을 baculovirus시스템에서 과발현시킨 결과를 보고한다. 세균 및 척추동물 세포를 이용한 시스템과 비교했을 때, baculovirus 시스템 이 훨씬 효과적 이 다는 것을 발견했다. 정제된 재조합 단백질을 이용하여 초기 결정을 얻었다. 결정을 이용하여 앞으로 밝힐 3차원 구조는 Fe65관련 신호전달체계에 대한 분자 기전 및 이에 대한 저해제 개발에 큰 도움을 줄 것이다.

Regulation Fe65 localization to the nucleus by SGK1 phosphorylation of its Ser566 residue

  • Lee, Eun-Jeoung;Chun, Jae-Sun;Hyun, Sung-Hee;Ahn, Hye-Rim;Jeong, Jae-Myung;Hong, Soon-Kwang;Hong, Jin-Tae;Chang, In-Kyeong;Jeon, Hye-Yeon;Han, Yeon-Soo;Auh, Chung-Kyoon;Park, Jae-In;Kang, Sang-Sun
    • BMB Reports
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    • 제41권1호
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    • pp.41-47
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    • 2008
  • Fe65 is characterized as an adaptor precursor (APP) through its PID2 element, as well as with the other members of the APP protein family. With the serum- and glucocorticoid-induced kinase 1 (SGK1) substrate specificity information, we found that the putative site of phosphorylation in Fe65 by SGK1 is present on its $Ser^{566}$ residue in $^{560}CRVRFLSFLA^{569}$(X60469). Thus, we demonstrated that Fe65 and the fluorescein-labeled Fe65 peptide $FITC-^{560}CRVRFLSFLA^{569}$ are phosphorylated in vitro by SGK1. Phosphorylation of the $Ser^{566}$ residue was also demonstrated using a $Ser^{566}$ phospho-specific antibody. The phospho Fe65 was found mainly in the nucleus, while Fe65 S556A mutant was localized primarily to the cytoplasm. Therefore, these data suggest that SGK1 phosphorylates the $Ser^{566}$ residue of Fe65 and that this phosphorylation promotes the migration of Fe65 to the nucleus of the cell.

The PPLA Motif of Glycogen Synthase Kinase 3β Is Required for Interaction with Fe65

  • Lee, Eun Jeoung;Hyun, Sunghee;Chun, Jaesun;Shin, Sung Hwa;Lee, Kyung Eun;Yeon, Kwang Hum;Park, Tae Yoon;Kang, Sang Sun
    • Molecules and Cells
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    • 제26권1호
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    • pp.100-105
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    • 2008
  • Glycogen synthase kinase $3{\beta}$ (GSK $3{\beta}$) is a serine/threonine kinase that phosphorylates substrates such as ${\beta}$-catenin and is involved in a variety of biological processes, including embryonic development, metabolism, tumorigenesis, and cell death. Here, we present evidence that human GSK $3{\beta}$ is associated with Fe65, which has the characteristics of an adaptor protein, possessing a WW domain, and two phosphotyrosine interaction domains, PID1 and PID2. The GSK $3{\beta}$ catalytic domain also contains a putative WW domain binding motif ($^{371}PPLA^{374}$), and we observed, using a pull down approach and co-immunoprecipitation, that it interacts physically with Fe65 via this motif. In addition, we detected co-localization of GSK $3{\beta}$ and Fe65 by confocal microscopy, and this co-localization was disrupted by mutation of the putative WW domain binding motif of GSK $3{\beta}$. Finally, in transient transfection assays interaction of GSK $3{\beta}$ (wt) with Fe65 induced substantial cell apoptosis, whereas interaction with the GSK $3{\beta}$ AALA mutant ($^{371}AALA^{374}$) did not, and we noted that phosphorylation of the Tyr 216 residue of the GSK $3{\beta}$ AALA mutant was significantly reduced compared to that of GSK $3{\beta}$ wild type. Thus, our observations indicate that GSK $3{\beta}$ binds to Fe65 through its $^{371}PPLA^{374}$ motif and that this interaction regulates apoptosis and phosphorylation of Tyr 216 of GSK $3{\beta}$.

다양한 합성 방법으로 제조된 BiFe0.65MoP0.1 산화물 촉매 상에서 n-부텐의 산화탈수소화 반응 (Oxidative Dehydrogenation of n-Butenes over BiFe0.65MoP0.1 Oxide Catalysts Prepared with Various Synthesis Method)

  • 박정현;신채호
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제53권3호
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    • pp.391-396
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    • 2015
  • n-부텐의 산화탈수소화에서 제조방법이 촉매의 반응활성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 $BiFe_{0.65}MoP_{0.1}$ 산화물 촉매를 모델 촉매로 선정하여 공침법, 시트르산법, 수열합성법, 주형법 등의 방법으로 촉매를 제조하였다. 제조한 촉매의 물리 화학적 특성을 알아보고 반응 활성과 연관시키기 위하여 X-선 회절분석(XRD), 질소 흡착 탈착분석($N_2$ sorption), 암모니아/1-부텐-승온탈착분석($NH_3/1$-butene-TPD) 등의 특성분석을 수행하였다. 공침법으로 제조한 촉매의 활성이 가장 높게 관찰되었으며, 14시간 동안의 산화탈수소화 반응 기준으로 n-부텐의 전환율은 79.5%, 1,3-부타디엔의 선택도는 85.1%, 1,3-부타디엔 수율은 67.7%의 수치를 보였다. 암모니아 승온탈착 실험으로부터 촉매의 반응 활성은 촉매의 산특성과 밀접하게 관련이 있으며, 공침법으로 제조한 산화물 촉매가 다른 합성방법으로 제조한 촉매와 비교하여 가장 큰 산량을 갖는 것으로 관찰되었다. 또한, 1-부텐의 승온탈착 분석결과, 촉매의 활성은 흡착된 1-부텐과 촉매의 표면반응에 기인한 중간체의 흡 탈착 특성, 즉 약하게 흡착된 중간체(< $200^{\circ}C$)의 상대적인 양과 강하게 흡착된 중간체의 탈착 온도(> $200^{\circ}C$)와 밀접하게 관련이 있었다.

API X65 강의 인장 및 굽힘 시편에 대한 유한요소 연성파괴 해석 (Finite Element Ductile Failure Simulations of Tensile and Bend Bars made of API X65 Steels)

  • 오창균;진태은;김윤재
    • 대한기계학회:학술대회논문집
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    • 대한기계학회 2007년도 춘계학술대회A
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    • pp.1696-1701
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    • 2007
  • This paper presents a micro-mechanical model of ductile fracture for the API X65 steel using the Gurson-Tvergaard-Needleman (GTN) model. Experimental tests and FE damage simulations using the GTN model are performed for smooth and notched tensile bars, from which the parameters in the GTN model are calibrated. As application, the developed GTN model is applied to simulate small-sized, single-edge-cracked tensile and bend bars, via three-dimensional FE damage analyses. Comparison of FE damage analysis results with experimental test data shows overall good agreements.

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Magnetic properties of Mn54Al46C2.44/Sm2Fe17N3 and Mn54Al46C2.44/Fe65Co35 composites

  • Qian, Hui-Dong;Si, Ping-Zhan;Lim, Jung Tae;Kim, Jong-Woo;Park, Jihoon;Choi, Chul-Jin
    • Journal of the Korean Physical Society
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    • 제73권11호
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    • pp.1703-1707
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    • 2018
  • Ferromagnetic ${\tau}-phase$ $Mn_{54}Al_{46}C_{2.44}$ particles were synthesized, and its composites with commercial $Sm_2Fe_{17}N_3$ and synthesized $Fe_{65}Co_{35}$ powders were fabricated. Smaller grain size than the single domain size of the $Mn_{54}Al_{46}C_{2.44}$ without obvious grain boundaries and secondary phases is the origin for the low intrinsic coercivity. It was confirmed that the magnetic properties of the $Mn_{54}Al_{46}C_{2.44}$ can be enhanced by magnetic exchange coupling with the hard magnetic $Sm_2Fe_{17}N_3$ and soft magnetic $Fe_{65}Co_{35}$. The high degrees of the exchange coupling were verified by calculating first derivative curves. Thermo-magnetic stabilities of the composites from 100 to 400 K were measured and compared. It was demonstrated that the $Mn_{54}Al_{46}C_{2.44}$ based composites containing $Sm_2Fe_{17}N_3$ and $Fe_{65}Co_{35}$ could be promising candidates for future permanent magnetic materials with the proper control of purity, magnetic properties, etc.

$Ni_{0.65}Zn_{0.35}Cu_{0.1}Fe_{1.9}O_4$의 결정학적 및 Mossbauer 효과 연구 (Crystallographic and Mossbauer studies of $Ni_{0.65}Zn_{0.35}Cu_{0.1}Fe_{1.9}O_4$)

  • 김우철;이승화;홍성렬;옥항남;김철성
    • 한국자기학회지
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    • 제8권3호
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    • pp.118-124
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    • 1998
  • Ni0.65Zn0.35Cu0.1Fe1.9O4의 결정학적 및 자기적 성질을 Mossbauer 분광법과 X-선 회절법으로 연구하였다. 결정구조는 cubic spinel 구조이며, 격자상수 a0=8.390$\AA$임을 알았다. Mossbauer 스펙트럼은 12K부터 705K까지 취하였으며, 상온에서 이성질체 이동결과 사면체자리 [A 자리], 팔면체자리[B 자리] 모두 Fe+3가 임을 알았고, Neel 온도 TN=705K로 결정하였다. 온도가 상승함에 따라 Mossbauer 스펙트럼의 선폭이 증가하였는데 이는 철의 자리에서 여러 다른 초미세자기장의 온도의존성으로부터 기인된다고 몰 수 있으며, 전기사중극자 분열값이 Neel 온도에서 0.41mm.s인 반면 TN이하에소는 실험적인 오차범위에서 0으로 나타났는데 이것은 전기장기울센터의 주축에 대한 초미세자기장의 방향이 임의적이라는데 기인하는 것으로 해석이 된다.

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초전형 적외선 센서용 PbTiO3/P(VDF/TrFE) 박막의 제조 및 특성 (Fabrication and characteristics PbTiO3/P(VDF/TrFE) thin films for pyroelectric infrared sensor)

  • 권성열
    • 센서학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.10-15
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    • 2003
  • 초전형 적외선 센서의 감지물질로 사용하기 위해 $PbTiO_3$/P(VDF/TrFE) 복합재료 박막을 스핀코팅방법을 사용하여 제작하였다. 시료는 65 wt% VDF와 35 wt% TrFE의 함량 P(VDF/TrFE) 분말을 사용하였으며 세라믹-고분자 복합재료를 제조하기 위하여 사용된 세라믹은 $PbTiO_3$ 분말을 사용하였다. 제조된 복합재료의 P(VDF/TrFE)와 $PbTiO_3$의 결합성을 확인하기 위해 제조된 박막의 표면은 SEM을 통해 관찰하였고 복합재료의 커패시턴스와 비유전율, 유전손실은 임피던스 분석기 (HP4192A)로 측정하였으며, 복합재료의 초전계수는 반도체 파라미터 분석기(HP4145B)로 조사하였다.

BiFe0.65MoP0.1 촉매 상에서 1-부텐의 산화탈수소화 반응 : 인 전구체의 영향 (Oxidative Dehydrogenation of 1-butene over BiFe0.65MoP0.1 Catalyst: Effect of Phosphorous Precursors)

  • 박정현;윤현기;신채호
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제53권6호
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    • pp.824-830
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    • 2015
  • 1-부텐의 산화탈수소화에서 다양한 인 전구체가 촉매의 반응활성에 미치는 영향을 조사하기 위하여 $BiFe_{0.65}MoP_{0.1}$ 산화물 촉매를 모델 촉매로 선정하여 인산수소암모늄, 인산수소이암모늄, 인산, 트리에틸인산, 오산화인 등의 인 전구체를 사용하어 촉매를 제조하고 산화탈수소화 반응을 수행하였다. 제조한 촉매의 물리 화학적 특성을 알아보기 위하여 X-선 회절분석(XRD), 질소 흡착 탈착분석($N_2$ sorption), 원소분석(ICP), 전자주사현미경(SEM), 승온재산화분석(TPRD) 등의 특성분석을 수행하였다. 제조한 촉매의 물리적 특성은 인 전구체에 따른 큰 차이는 관찰되지 않았지만 산화탈수소화 반응에서 촉매의 활성은 사용된 인 전구체의 특성에 따라 다르게 관찰되었다. 인산을 전구체로 사용하여 제조한 $BiFe_{0.65}MoP_{0.1}$ 산화물 촉매가 사용된 촉매 중에서 가장 우수한 활성을 나타내었으며, 14시간 동안의 산화탈수소화 반응기준으로 n-부텐의 전환율은 79.5%, 1,3-부타디엔 수율은 67.7%의 수치를 보였다. 인 전구체의 양이온의 특성에 따라 촉매의 격자 구조가 영향을 받는 것으로 추측되며, 이러한 격자 구조의 차이는 촉매의 재산화 능력에 영향을 주는 것으로 사료된다. 환원 처리된 촉매의 승온재산화 실험으로부터 촉매의 반응활성은 촉매의 재산화 능력과 밀접하게 관련이 있었으며, 인산을 전구체로 사용하여 제조한 산화물 촉매가 다른 인 전구체와 비교하여 가장 좋은 재산화 능력을 나타내었다.