An abattoir study on the abdominal fat necrosis in adult cattle was performed pathologically. Grossly, masses of fat necrosis were leekgreen in colour, lobulated on the cut surface, and saponificated in the texture. These necrotic adipose tissues infiltrated usually into neighboring parenchymal organs including intestines and pancreas, leading to fibrosis or atrophy of them. Histopathologically, necrotic fat cells contained acidophilic, opaque, amorphous substance or basophilic fibrillar or granular minerals in their cytoplasms. The lesions of fat necrosis were divided by fibroconnective tissue. With increase of the severity, necrotic fat cells fused each other and then formed fat cysts. In this severe lesion, necrotic fat cells were partialy or completely replaced by macrophages. Multinucleated giant cells were scattered in this lesion. Interestingly, small artery in the lesion of fat necrosis revealed severe thickening of internal elastic membrane. Severe fibrosis was observed in or between the outer longitudinal and inner circular muscular externas causing segregation, degeneration and necrosis of muscle fibers. The nerve cells of Auerbach's and Meissner's plexuses surrounded by fibrosis were degenerated or necrotic. In addition, necrotic fat cells infiltrated into the pancreas, resulting in pancreas atrophy. From these results, it is speculated that fat necrosis might compromise intestinal movement due to necrosis of muscular externa and ganglion cells of Auerbach's and Meissner's plexuses.
간 섬유화에서 fat-storing cell의 변화를 미세 구조학적 측면에서 관찰하고자, 사염화탄소를 mineral oil에 녹여 1 : 1로 회석한 후 Kg당 0.5 ml의 용량을 주 2회씩 12주간 흰쥐에 복강 주입하였다. 실험기간 동안 1주 간격으로 도살하고, 적출된 간조직을 광학현미경과 연역조직화학적 검사 및 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 광학현미경적 소견상 소엽 중심주의 염증 반응 및 세포 침윤 현상은 사염화탄소 투여 후 1주부터 나타나서 4주 째 가장 심하였으며, 이시기에 desmin염색 반응 양성세포의 수도 증가되었다. 괴사 및 섬유화는 2주부터 나타나기 시작하여 6주부터 결절이 형성되기 시작하였고 괴사성 병변은 8주까지 지속되었다. 그러나 세포 침윤 정도는 감소되면서 desmin에 대한 반응성도 낮아졌고, 경변성 변화는 10주 이후부터 나타났다. 전자현미경적 소견상 fat-storing cell의 숫적 증가는 1주부터 관찰되었으며 지방적이 감소하고 rER이 팽창된 이행세포는 2주째 출현하여 4주에 가장 현저히 증가되었다. 섬유아세포는 3주부터 나타나기 시작하였는데, rER이 확장되었으며 지방적은 없거나 1-2개의 소적이 세포돌기에서 관찰되었다. 섬유화가 진행됨에 따라 이행세포 및 fat-storing cell은 감소하고 섬유아세포는 증가된 상태를 유지하였다. 이상의 결과로 보아 fat-storing cell은 간섬유화 과정에서 활성화되고 증식하여 형태학적으로 이행세포 및 섬유아세포로 전환함으로써, 정지상태에 있는 섬유아세포의 전구체로서 간섬유화에 중요한 역할을 하는 것으로 사료된다.
본 연구에서는 C2C12 근육 세포의 분화 과정에 있어 IGF-I이 지방산의 수송을 담당하는 지방산 수송체인 FAT/CD36의 mRNA 및 단백질 발현에 미치는 영향에 대해 알아보았다. 그 결과 근육세포의 분화 과정에 있어 FAT/CD36의 단백질과 mRNA 발현이 분화 시간 의존적으로 유의하게 증가하였으며, IGF-I의 처리에 의해서도 유의하게 조절되었음을 알 수 있었다. 이는 IGF-I이 골격근 세포의 성장 및 분화를 촉진하여 근육 관련 유전자들의 발현을 조절하는 기능뿐만 아니라, 골격근의 주요 에너지원으로 사용되는 지방산의 수송을 담당하는 FAT/CD36의 발현에도 영향을 미친다는 것으로 해석할 수 있겠다. 향후 IGF-I이 골격근 세포에서 FAT/CD36의 발현에 영향을 미침으로써 골격근의 지방산 흡수와 산화율을 조절하는지, 그에 따라 지방대사에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구가 필요할 것이며, 이와 관련된 신호전달 체계 및 기전에 대한 연구도 진행 되어야 할 것이다.
Purpose: The use of an autogenous fat graft has become a common procedure in plastic surgery. However, questions remain concerning on the viability of fat cells and preservation method of aspirated fat. The purpose of this study was to examine the viability of fat cells stored at $-20^{\circ}C$ in the freeze for 1 year after harvest from abdominal liposuction. Methods: Eighteen adults (aged 24 to 65 years old, 16 female and 2 male) were recruited for this study. Harvested aspirated fat tissues were obtained by suction - assisted lipectomy and frozen at $-20^{\circ}C$ commercial refrigerator for one year (average 12.5 months). The viability off at cells in specimens were measured after thawing. The numbers of viable cells were measured on a fluorescence microscope after staining with fluorescein diacetate and propidium iodide. GPDH (Glycerol - 3 - phosphate dehydrogenase) activity was measured. Cell culture was done for 3 weeks. Results: There were no viable cells under the fluorescence microscope, no detectable GPDH activity, and no cultured cells. Conclusion: These findings suggest that aspirated fat after frozen storage for one year at $-20^{\circ}C$ freezer is inadequate to reuse.
Ground seawater in the east area of the volcanic Jeju Island contains abundant minerals. We investigated the metabolic activity of electrodialyzed, desalted ground seawater (EDSW) from Jeju in both cultured cells and animals. The addition of EDSW to the culture medium (up to 20%, v/v) reduced the leakage of lactate dehydrogenase and increased MTT activity in CHO-IR cells. EDSW (10%) promoted insulin-induced glucose consumption in L6 muscle cells as well as the activities of the liver ethanol-metabolizing enzymes, alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase. Moreover, EDSW suppressed palmitate-induced intracellular fat accumulation in human hepatoma $HepG_2$ cells. Activities of AMP-stimulated protein kinase and acetyl CoA carboxylase, enzymes that modulate fat metabolism, were altered by EDSW in $HepG_2$ cells toward the suppression of intracellular lipid accumulation. EDSW also suppressed hepatic fat accumulation induced by a high-fat diet in mice. Taken together, EDSW showed beneficial metabolic effects, including the enhancement of ethanol metabolism and insulin-induced glucose consumption, and the suppression of intrahepatic fat accumulation.
Ha, Ki-Young;Park, Hojin;Park, Seung-Ha;Lee, Byung-Il;Ji, Yi-Hwa;Kim, Tae-Yeon;Yoon, Eul-Sik
Archives of Plastic Surgery
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제42권6호
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pp.677-685
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2015
Background The survival rate of grafted fat is difficult to predict, and repeated procedures are frequently required. In this study, the effects of the freezing period of harvested adipose tissue and the addition of human adipose tissue-derived stem cells (ASCs) on the process of fat absorption were studied. Methods Adipose tissue was obtained from patients who underwent a lipoaspirated fat graft. The fat tissue was cryopreserved at $-20^{\circ}C$ in a domestic refrigerator. A total of 40 nude mice were used. The mice in the experimental group received three different subcutaneous injections in the back: an injection of fresh fat and ASCs, an injection of fat that had been frozen for one month and ASCs, and an injection of fat that had been frozen for two months and ASCs. The control mice received fat grafts without ASCs. The mice were sacrificed at four or eight weeks after the procedure, and the grafted fat tissues were harvested. The extracted fat was evaluated using photographic analysis, volume measurements, and histological examination. Results In the control group, the fat resorption rates four weeks after transplantation in the grafts of fresh fat, fat that had been frozen for one month, and fat that had been frozen for two months were 21.14%, 22.46%, and 42.56%, respectively. In the experimental group, the corresponding resorption rates were 6.68%, 13.0%, and 33.9%, respectively. Conclusions ASCs can increase the fat graft survival rate. The use of ASCs in fat grafting can reduce the need for repeated fat grafts and provide good long term results.
The FAT-1 protein is an n-3 fatty acid desaturase, which can recognize a range of 18- and 20-carbon n-6 substrates and transform n-6 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) into n-3 PUFAs while n-3 PUFAs have beneficial effect on human health. Fat1 gene is the coding sequence from Caenorhabditis elegans which might play an important role on lipometabolism. To reveal the function of fat1 gene in bovine fetal fibroblast cells and gain the best cell nuclear donor for transgenic bovines, the codon of fat1 sequence was optimized based on the codon usage frequency preference of bovine muscle protein, and directionally cloned into the eukaryotic expression vector pEF-GFP. After identifying by restrictive enzyme digests with AatII/XbaI and sequencing, the fusion plasmid pEF-GFP-fat1 was identified successfully. The pEF-GFP-fat1 vector was transfected into bovine fetal fibroblast cells mediated by Lipofectamine2000$^{TM}$. The positive bovine fetal fibroblast cells were selected by G418 and detected by RT-PCR. The results showed that a 1,234 bp transcription was amplified by reverse transcription PCR and the positive transgenic fat1 cell line was successfully established. Then the expression level of fat1 gene in positive cells was detected using quantitative PCR, and the catalysis efficiency was detected by gas chromatography. The results demonstrated that the catalysis efficiency of fat1 was significantly high, which can improve the total PUFAs rich in EPA, DHA and DPA. Construction and expression of pEF-GFP-fat1 vector should be helpful for further understanding the mechanism of regulation of fat1 in vitro. It could also be the first step in the production of fat1 transgenic cattle.
Intermuscular fat is essential for enhancing the flavor and texture of cultured meat. Mesenchymal stem cells derived from intermuscular adipose tissues are a source of intermuscular fat. Therefore, as a step towards developing a platform to derive intermuscular fat from mesenchymal stem cells (MSCs) for insertion between myofibrils in cultured beef, an advanced protocol of intermuscular adipose tissue dissociation effective to the isolation of MSCs from intermuscular adipose tissues was developed in cattle. To accomplish this, physical steps were added to the enzymatic dissociation of intermuscular adipose tissues, and the MSCs were established from primary cells dissociated with physical step-free and step-added enzymatic dissociation protocols. The application of a physical step (intensive shaking up) at 5 minutes intervals during enzymatic dissociation resulted in the greatest number of primary cells derived from intermuscular adipose tissues, showed effective formation of colony forming units-fibroblasts (CFU-Fs) from the retrieved primary cells, and generated MSCs with no increase in doubling time. Thus, this protocol will contribute to the stable supply of good quality adipose-derived mesenchymal stem cells (ADMSCs) as a fat source for the production of marbled cultured beef.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제32권6호
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pp.524-529
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2006
For the repairing of bone defect, autogenous or allogenic bone grafting remains the standard. However, these methods have numerous disadvantages including limited amount, donor site morbidity and spread of diseases. Tissue engineering technique by culturing stem cells may allow for a smart solution for this problem. Adipose tissue contains mesenchymal stem cells that can be differentiate into bone, cartilage, fat or muscle by exposing them to specific growth conditions. In this study, the authors procured the stem cell from buccal fat pad and differentiate them into osteoblast and are to examine the bone induction capacity. Buccal fat-derived cells (BFDC) were obtained from human buccal fat pad and cultured. BFDC were analyzed for presence of stem cell by immunofluorescent staining against CD-34, CD-105 and STRO-1. After BFDC were differentiated in osteogenic medium for three passages, their ability to differentiate into osteogenic pathway were checked by alkaline phosphatase (ALP) staining, Alizarin red staining and RT-PCR for osteocalcin (OC) gene expression. Immunofluorescent and biochemical assays demonstrated that BFDC might be a distinguished stem cells and mineralization was accompanied by increased activity or expression of ALP and OC. And calcium phosphate deposition was also detected in their extracelluar matrix. The current study supports the presence of stem cells within the buccal fat pad and the potential implications for human bone tissue engineering for maxillofacial reconstruction.
Lee, Sang Kyun;Kim, Deok-Woo;Dhong, Eun-Sang;Park, Seung-Ha;Yoon, Eul-Sik
Archives of Plastic Surgery
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제39권5호
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pp.534-539
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2012
Background Autologous fat grafting evolved over the twentieth century to become a quick, safe, and reliable method for restoring volume. However, autologous fat grafts have some problems including uncertain viability of the grafted fat and a low rate of graft survival. To overcome the problems associated with autologous fat grafts, we used uncultured adipose tissue-derived stromal cell (stromal vascular fraction, SVF) assisted autologous fat grafting. Thus, the purpose of this study was to evaluate the effect of SVF in a clinical trial. Methods SVF cells were freshly isolated from half of the aspirated fat and were used in combination with the other half of the aspirated fat during the procedure. Between March 2007 and February 2008, a total of 9 SVF-assisted fat grafts were performed in 9 patients. The patients were followed for 12 weeks after treatment. Data collected at each follow-up visit included clinical examination of the graft site(s), photographs for historical comparison, and information from a patient questionnaire that measured the outcomes from the patient perspective. The photographs were evaluated by medical professionals. Results Scores of the left facial area grafted with adipose tissue mixed with SVF cells were significantly higher compared with those of the right facial area grafted with adipose tissue without SVF cells. There was no significant adverse effect. Conclusions The subjective patient satisfaction survey and surgeon survey showed that SVF-assisted fat grafting was a surgical procedure with superior results.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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