Kim, Miae;Yoon, Hyeokjun;You, Young-Hyun;Kim, Ye-Eun;Woo, Ju-Ri;Seo, Yeonggyo;Lee, Gyeong-Min;Kim, Young Ja;Kong, Won-Sik;Kim, Jong-Guk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.10
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pp.1347-1356
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2013
Tricholoma matsutake, an ectomycorrhiza that has mutual relationships with the rootlet of Pinus denisflora, forms a fruiting body that serves as a valuable food in Asia. However, the artificial culture of this fungus has not been successful. Soil fungi, including T. matsutake, coexist with many other microorganisms and plants; therefore, complex microbial communities have an influence on the fruiting body formation of T. matsutake. Here, we report on the structures of fungal communities associated with the fairy ring of T. matsutake through the pyrosequencing method. Soil samples were collected inside the fairy ring zone, in the fairy ring zone, and outside the fairy ring zone. A total of 37,125 sequencing reads were obtained and 728 to 1,962 operational taxonomic units (OTUs) were observed in the sampling zones. The fairy ring zone had the lowest OTUs and the lowest fungal diversity of all sampling zones. The number of OTUs and fungal taxa inside and outside the fairy ring zone was, respectively, about 2 times and 1.5 times higher than the fairy ring. Taxonomic analysis showed that each sampling zone has different fungal communities. In particular, out of 209 genera total, 6 genera in the fairy ring zone, such as Hemimycena, were uniquely present and 31 genera, such as Mycena, Boletopsis, and Repetophragma, were specifically absent. The results of metagenomic analysis based on the pyrosequencing indicate a decrease of fungal communities in the fairy ring zone and changes of fungal communities depending on the fairy ring growth of T. matsutake.
Ka, Kang-Hyeon;Park, Hyun;Hur, Tae-Chul;Yoon, Kab-Hee;Bak, Won-Chull;Yeo, Woon-Hong;Lee, Min-Woong
The Korean Journal of Mycology
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v.30
no.2
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pp.95-98
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2002
This study was carried out to evaluate annual growth of fairy ring of Tricholoma matsutake. The edge growth of active mycelial zone of fairy ring during $1999{\sim}2000$ and the distance between sporocarp-fruiting positions of four years ($1997{\sim}2000$) and the edge of fairy ring of 2000 were measured. The fairy ring of T. matsutake moved outward about 11.3 cm annually ($1999{\sim}2000$) in the 65 years old P. densiflora stand, and the growth was coincided with the average distance of sporocarp-fruiting positions for four years ($1997{\sim}2000$). In addition, the sporocarp-fruiting positions were about 13.8 cm apart from the edge of active mycelial zone in year of 2000. Therefore, the sporocarp-fruiting position in this year was within the mycelial region one year ago. It is strongly recommended that the sporocarp of T. matsutake should be harvested apart about 50 cm from sporocarp in order to protect the fairy ring.
Ka, Kang-Hyeon;Hur, Tae-Chul;Park, Hyun;Kim, Hee-Su;Bak, Won-Chull
The Korean Journal of Mycology
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v.38
no.1
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pp.16-20
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2010
Transplantation of matsutake-infected pine tree into a pine forest has great potential as an artificial cultivation method of Tricholoma matsutake. Matsutake-infected pine trees had previously transplanted by this research group into the experimental area from 2001 to 2004 and its survival rate determined in 2006 was 20%. For the survived samples, the characteristics of mycelial growth and the development of fairy-ring formation of T. matsutake have been evaluated until 2009. It was found that size of the indeterminate ring showed significant differences among the individual trees and varied from $4\;cm\;{\times}\;4\;cm$ to $52\;cm\;{\times}\;35\;cm$. The variation was possibly resulted from the differences in production area of the matsutake-infected pine tree and those in site characteristics of the transplanted spots. For the characteristics of mycelial growth, it grew in the shape of a cudgel or an acute-angled 'V' in early stage, and then the shape became more wider and changed into an obtuse-angled 'V' as time passed. We expect that matsutake mushrooms may occur from the fairy-rings of some of these matsutake-infected pine trees in the autumn of 2010.
Tricholoma matsutake is a traditional favorite food in East Asia, cultivated in fairy rings called "shiro," which are found near Pinus densiflora. For effective artificial cultivation of Tri. matsutake, microorganisms from symbiotic fairy rings are co-cultivated. In this study, one bacterial isolate (Y22_B35) and two fungal isolates (Y22_F64 and Y22_F68) displayed growth-promoting effects on Tri. matsutake mycelium (158.47, 125.00, and 122.26% enhanced growth, respectively). For identification, 16S rRNA or ITS regions from the microorganisms¡¯ genomes were sequenced. Other sequences, including BenA, CaM, and RPB2 were sequenced in the fungal isolates. The bacterial isolate Y22_B35 was identified as Bacillus cereus. Y22_F64 and Y22_F68 were identified as Umbelopsis nana and Aspergillus parvulus, respectively. To identify the effects of the dominant microorganisms on Tri. Matsutake cultivation, metagenomic analyses were performed. Discovery of these Tri. matsutake mycelium growth-promoting microorganisms and metagenomics analyses are expected to contribute to our understanding of Tri. matsutake fruiting body growth and construction of biomimicry.
Park, Hyun;Ka, Kang-Hyeon;Ryoo, Cheon-In;Kim, Kyo-Soo;Kim, Hyun-Joong
The Korean Journal of Mycology
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v.26
no.3
s.86
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pp.306-313
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1998
The occurrences of ectomycorrhizal fungi were investigated in a pine-mushroom forest at Hongcheon, Korea. The fairy rings of Tricholoma matsutake were figured by the sporocarp places of T. matsutake for three years $(1995{\sim}1997)$, and the occurrences of other ectomycorrhizal fungi were surveyed with x and y dimensions for two years $(1996{\sim}1997)$. The diameters of fairy rings of T. matsutake ranged from 2m to 10m, which indicated that the age of the fairy rings as $10{\sim}50$ years when we consider that the growth of the fairy ring used to show about 10 cm per year. Russula bella, R. sororia, R. delica and Cantharellus minor were the major species occurred on the site during the survey period, and each species occupied 16.0%, 12.8%, 12.4% and 7.0% of total mushroom occurrence, respectively. From the results, we could conclude that the surveyed stand was a productivity-declining forest from the view point of pine-mushroom production. In addition, Amanita pantherina, Suillus bovinus, Ramaria flaccida and Laccaria amethystea were considered to be the indicator species for declining of pine-mushroom productivity since some fruiting bodies of the species appeared around the fairy ring of T. matsutake.
The dynamics of root system in the fairy rings of Tricholoma matsutake was investigated in four zones divided into 'zone of decayed mycorrhizae', 'zone of mycorrhizae for fruiting', 'zone of physiologically active mycorrhizae' and 'zone of roots free from mycorrhizal infection'. The roots of Pinus densiflora in fairy rings, which occupied 70% of upper crown, comprised about 60% and 87% of total roots and alive roots, respectively. The ratio of fine-roots of P. densiflora over total roots was relatively higher than other species since that of P. densiflora was about 45% while that of the other species was about 13% on research of fine-roots. Especially, the roots of pine comprised about 70% of total root in the zone of mycorrhizae for fruiting and the zone of physiologically active mycorrhizae, which indicated that the pine roots were closely related to the fairy rings of T. matsutake. The fine roots of P. densiflora in the zone of physiologically active mycorrhizae was about 60.7%(1,087mg/100g soil) which was about twice compared to that of other zones. It allowed us to suppose that the fine roots of P. densiflora can make active growth in the zone of physiologically active mycorrhizae, and the growth was promoted by the fairy ring formation of T. matsutake. In addition, we found 3~5 times higher amount of fine roots than that of medium roots of P. densiflora in this zone, which indicated that the fairy rings of T. matsutake locate in the region of active growth of P. densiflora' roots.
This study was conducted to examine the physiology of pine mushroom mycelia cultured with various media for artificial culture of pine mushroom. The results obtained were as follows: 1) Among the various media, the medium composed of honey, boiled pine mushroom and soil extract fluid, fibrous root extract fluid, dry yeast, $KH_2PO_4$ inositol, folic acid, and biotin was the best for the growth of pine mushroom mycelium. 2) The optimum temperature for germinating pine mushroom spore and for culturing pine mushroom mycelium, was $24^{\circ}C$ and the optimum pH was 4.5. 3) There was no significant difference in growth between the mycelium separated from the tissue of pine mushroom sporophore and that separated from the spore. 4) No noticeable effect was found on the growth if such salts as $ZnSO_4$, $MnSO_4$, $MgSO_4$, $CaCl_2$ and ferric citrate were added to the Hamada's medium. 5) The addition of fibrous root extract promoted the growth of pine mushroom mycelium. 6) As a carbon source of artificial media, honey was more effective than glucose. 7) The culture infiltration of Mortierlla growing often in Fairy Ring was good for the growth of mycelium compared with the control. 8) The addition of fibrous root extract, inositol, biotin, and folic acid to artificial culture media was greatly effective in growth. When the temperature was lowered $19^{\circ}C$ after mycelium has appeared, the formation of primordium was observed.
Lee, Wi Young;Ahn, Jin Kwon;Ka, Kang Hyeon;Park, Hyun
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.95
no.3
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pp.358-364
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2006
This study was conducted to develop optimal solid culture medium for Tricholoma matsutake. As the solid matrix, granitic soil, perlite, vermiculate, pine sawdust and peat moss were compared regarding their effected on mycelial growth. Ergosterol content which is a fungal wall component was used as the growth index of the mycelia. Among the various solid matrixes, the granitic soil, perlite and mixture of the two supported the growth most. Barely flour appeared to be very effective on the stimulating of the mycelial growth when added to the solid matrix. An mixture of the matrix contained an even (1:1:1:1, v/v/v/v) mixture of granitic soil, perlite, vermiculate and pine sawdust. T. matsutake started growth 2 weeks after inoculation and reached stationary growth phase after 8th weeks in the solid matrix mixture. The mycelial density in the solid matrix was 7 times higher than that in fairy-ring soil. In addition, 30~70% water content and 10% humus soil in the solid matrix also supported good growth suggesting that T. matsutake needs humus soil for a nutrient sources. The solid matrix developed in the present study could be used to study physiological characteristics of T. matsutake as well.
This study was carried out in order to produce useful material for the forest multiple use and forest protection by physico-chemical soil analysis of studied area in Sokwang-ri Forest Genetic Resource Protection Forest which was divided into in standard plots include Tricholoma matsutake and Sarcodon aspratus production forest. The result of physico-chemical soil analysis represented as following. The soil type of T. matsutake production forest was Dry brown forest soil(B1), while on the other hand the soil type of S. aspratus production forest was Moderately moist brown forest soil(B3). Between T. matsutake and S. aspratus production forest did not result in significant changes in soil pH(5.22-5.60) and soil depth(47cm), but available phosphorus, carbon, and nitrogen contents were different results. CN ratio of the fairy ring of T. matsutake was quite lower than that in S. aspratus production forests, which indicated that T. matsutake production forest was built up in the relatively immature soils which contain little organic matter. Generally, it was predicted that Pinus densiflora for. erecta forest succeeded to deciduous tree forest in stable soil environments. To conserve these T. matsutake and S. aspratus production forest, the contents of available phosphorous and exchangeable cation should be increased by continuous soil environment management and it should be established the secondary growth forests of old aged Pinus densiflora for. erecta trees as soon as possible.
Tricholoma matsutake is an ectomycorrhizal fungus that has a symbiotic relationship with the root of Pinus densiflora. Soil microbial communities greatly affect the growth of T. matsutake, however, few studies have examined the characteristics of these communities. In the present study, we analyzed soil fungal communities from Gyeongju and Yeongdeok using metagenomic pyrosequencing to investigate differences in fungal species diversity, richness, and taxonomic composition between the soil under T. matsutake fruiting bodies (Sample 2) and soil where the fairy ring of T. matsutake was no longer present (Sample 1). The same spot was investigated three times at intervals of four months to observe changes in the community. In the samples from Yeongdeok, the number of valid reads was lower than that at Gyeongju. The operational taxonomic units of most Sample 2 groups were less than those of Sample 1 groups, indicating that fungal diversity was low in the T. matsutake-dominant soil. The soil under the T. matsutake fruiting bodies was dominated by more than 51% T. matsutake. From fall to the following spring, the ratio of T. matsutake decreased. Basidiomycota was the dominant phylum in most samples. G-F1-2, G-F2-2, and Y-F1-2 had the genera Tricholoma, Umbelopsis, Oidiodendron, Sagenomella, Cladophialophora, and Phialocephala in common. G-F1-1, G-F2-1, and Y-F1-1 had 10 genera including Umbelopsis and Sagenomella in common. From fall to the following spring, the amount of phyla Basidiomycota and Mucoromycota gradually decreased but that of phylum Ascomycota increased. We suggest that the genus Umbelopsis is positively related to T. matsutake.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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