Exogenous $Cu^{2+}$ or $Zn^{2+}$ at micromolar concentration had a strong inhibitory effect on detergent-solubilized cytochrome c oxidase. A similar effect was observed when $Cu^{2+}$ was added to vesicular cytochrome c oxidase, although the extent of inhibition was significantly larger for the uncoupled state than for the coupled state. Interestingly, the inhibition by $Zn^{2+}$ was almost negligible for both the coupled and uncoupled states. These results suggest that the binding sites for $Cu^{2+}$ ions are exposed to the extravesicular side. whereas those for $Zn^{2+}$ are exposed to the matrix side. The EPR spectra of bound $Cu^{2+}$ ions at 77 K indicate that each of the first two $Cu^{2+}$ ions is ligated by three or four histidine residues, as evidenced by distinct $^{14}N$ superhyperfine splitting. These $Cu^{2+}$ ions can not be removed readily by EDTA and inhibit the enzyme activity by as much as 80%.
Hong, S.H.;Lee, B.K.;Choi, N.J.;Lee, Sang S.;Yun, S.G.;Ha, J.K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권3호
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pp.389-393
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2003
Present study investigate the effect of enzyme supplementation, methods (applied to rumen or enzyme treated diet) compared with no enzyme diet, on rumen fermentation and apparent nutrient digestibility in a $3{\times}3$ Latin square design with three rumen cannulated Korean Native goats. In situ rumen degradation kinetics was studied in three rumen cannulated Holstein steers. Three diets were, no enzyme, 1% enzyme in rumen and 1% enzyme in diet. The enzyme was sprayed onto forage, and the forage: concentrate ratio was 30:70. Degradation kinetics was studied with three enzyme levels (0, 1 and 2%, w/w) and four pre-treatment times (0, 1, 12 and 24 h). Results suggested that enzyme application method did not affect rumen fermentation, ruminal enzyme activity and total tract apparent digestibility. Nutrient degradation rate and effective degradability of DM, NDF and ADF increased with increasing enzyme level and pre-treatment times. Degradation of nutrients was affected by enzymes levels or pre-treatment times. Therefore, it is probable that the improved degradation may be due to the supplemented exogenous hydrolytic enzymes under a certain condition.
A ${\beta}$-galactosidase with high transgalactosylic activity was purified from a Bacillus species, registered as KFCC10855. The enzyme preparation showed a single protein band corresponding to a molecular mass of 150 kDa on SDS-PAGE and gave a single peak with the estimated molecular mass of 250 kDa on Sephacryl S-300 gel filtration, suggesting that the enzyme is a homodimeric protein. The amino acid and sugar analyses revealed that the enzyme is a glycoprotein, containing 19.2 weight percent of sugar moieties, and is much more abundant in hydrophilic amino acid residues than in hydrophobic residues, the mole ratio being about 2:1. The pI and optimum pH were determined to be 5.0 and 6.0, respectively. Having a temperature optimum at $70^{\circ}C$ for the hydrolysis of lactose, the enzyme showed good thermal stability. The activity of the enzyme preparation was markedly increased by the presence of exogenous Mg (II) and was decreased by the addition of EDTA. Among the metal ions examined, the most severely inhibitory effect was seen with Ag (I) and Hg (II). Further, results of protein modification by various chemical reagents implied that 1 cysteine, 1 histidine, and 2 methionine residues occur in certain critical sites of the enzyme, most likely including the active site. Enzyme kinetic parameters, measured for both hydrolysis and transgalactosylation of lactose, indicated that the enzyme has an excellent catalytic efficiency for formation of the transgalactosylic products in reaction mixtures containing high concentrations of the substrate.
Saenphoom, P.;Liang, J.B.;Ho, Y.W.;Loh, T.C.;Rosfarizan, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권4호
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pp.537-544
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2013
This study examined whether pre-treating palm kernel expeller (PKE) with exogenous enzyme would degrade its fiber content; thus improving its metabolizable energy (ME), growth performance, villus height and digesta viscosity in broiler chickens fed diets containing PKE. Our results showed that enzyme treatment decreased (p<0.05) hemicellulose and cellulose contents of PKE by 26.26 and 32.62%, respectively; and improved true ME (TME) and its nitrogen corrected value ($TME_n$) by 38% and 33%, respectively, compared to the raw sample. Average daily gain (ADG), feed intake and feed conversion ratio (FCR) of chickens fed on different dietary treatments in the grower period were not significantly different. Although there was no difference in feed intake (p>0.05) among treatment groups in the finisher period, ADG of chickens in the control (PKE-free diet) was higher (p<0.05) than in all treatment groups fed either 20 or 30% PKE, irrespective of with or without enzyme treatment. However, ADG of birds fed with 20% PKE was higher than those fed with 30% PKE. The FCR of chickens in the control was the lowest (2.20) but not significantly different from those fed 20% PKE diets while birds in the 30% PKE diets recorded higher (p>0.05) FCR. The intestinal villus height and crypt depth (duodenum, jejunum and ileum) were not different (p>0.05) among treatments except for duodenal crypt depth. The villus height and crypt depth of birds in enzyme treated PKE diets were higher (p<0.05) than those in the raw PKE groups. Viscosity of the intestinal digesta was not different (p>0.05) among treatments. Results of this study suggest that exogenous enzyme is effective in hydrolyzing the fiber (hemicellulose and cellulose) component and improved the ME values of PKE, however, the above positive effects were not reflected in the growth performance in broiler chickens fed the enzyme treated PKE compared to those received raw PKE. The results suggest that PKE can be included up to 5% in the grower diet and 20% in the finisher diet without any significant negative effect on FCR in broiler chickens.
Twenty eight multiparous lactating cows were utilized in an experiment to evaluate the response to an exogenous fibrolytic enzyme on their lactational performance during early lactation period (in terms of milk production, milk composition, feed intake, milking efficiency, body weight change) and the exact time of this response. Cows were randomized into two groups (14 each) with similar parities and were fed a concentrate ration of barley, ground corn, soybean meal, and wheat bran and roughage ration of alfalfa hay. One of the two groups was supplemented with the fibrolytic enzyme immediately after parturition up to 100 post partum. The experiment was of two phases with 50 days each. The enzyme, which has a cellulase/hemicellulase activity (derived from Trichoderma group), was added to the concentrate part of the ration in a dry powder form. Milk production, 3.5% fat corrected milk, energy corrected milk were higher (p<0.05) for cows fed treated diet. At the same time, No differences were observed in percentages of milk components, feed intake, body weight, body weight change, or rectal temperature for the whole experimental period or during any of the two phases. Efficiency of milk production was higher (p<0.05) for treatment group cows than for that of the control ones. However, efficiency was better during the second phase than during the first phase. Feeding enzyme treated diets to dairy cows improved lactational performance during early 100 day of the lactation period. However, the first 50 days of lactation looked to be the critical.
The purpose of the present study was to investigate the effects of exogenous non-starch polysaccharides (NSP) enzymes on performance, intestinal content viscosity and digestive enzyme activities of growing pigs fed a rough rice-based diet. A total of 60 crossbred barrows with an initial body weight of 35.16 kg (SD = 0.82) were blocked by body weight and randomly assigned to two treatments with three replications. Each group was fed the diet based on rice with or without exogenous NSP enzymes (2 g/kg of diet). During the 70 days of the feeding trial, all pigs were given free access to feed and water. At the end of the feeding trial, six pigs from each treatment were randomly selected and slaughtered to collect intestinal digesta, intestinal mucosa, and pancreas. The addition of NSP enzymes improved average daily gain (p<0.05) and feed:gain (p<0.05), and decreased viscosity of digesta in the jejunum (p<0.001) and ileum (p<0.01) of pigs. The supplementation of NSP enzymes increased activities of protease (p<0.01), trypsin (p<0.01) and ${\alpha}$-amylase (p<0.05) in duodenal contents. However, digestive enzymes in the pancreas, jejunal and ileal mucosa were unaffected by the supplemental NSP enzymes (p>0.10). The results indicate that the addition of NSP enzymes to rough rice-based diets improved performance of pigs, reduced viscosity and increased digestive activity in the small intestine.
Cariogenic Streptococcus mutans encounters a variety of host defense factors produced in oral cavity. Nitric oxide (NO) and NO-mediated reactive nitrogen species are potential antimicrobials of innate immunity that can threaten the fitness of S. mutans in their ecological niches. Streptococcal strategies to detoxify cytotoxic NO, which allow S. mutans to persist in caries or other environments of the oral cavity, remain unknown. In this study, we directly measured NO consumption rates of S. mutans isolated in Korea. Surprisingly, all S. mutans strains were unable to consume exogenous NO efficiently, while an intracellular parasite Salmonella enterica serovar Typhimurium expressing the NO-metabolizing enzyme flavohemoglobin consumed most of the NO. This result suggested that S. mutans has alternative detoxification systems for tolerating NO-induced nitrosative stresses.
Lactobacillus acidophilus를 이용한 배추김치 제조 연구의 일환으로 이 균이 생성하는, 김치의 연화와 밀접한 관련이 있는 효소의 하나인 ${\beta}-galactosidase\;({\beta}-Galase)$의 성질을 균체내외 효소로 구분하여 조사하였다. Gel여과법에 의하여 측정한 균체내외 ${\beta}-Galase$의 개략적인 분자량은 각각 550,000 및 740,000 dalton이었으며 $K_{m}$값은 각각 1.67mg/ml 및 1.33mg/ml $V_{max}$은 각각 $8.5{\mu}mol/mg/30min$ 및 $2.65{\mu}\;mol/ml/30min$이었다. 최적 pH는 균체내 효소의 경우는 7, 균체외 효소는 8이었으며 최적온도는 다같이 $30^{\circ}C$ 최적 소금농도는 $4{\sim}5%$이었다. ${\beta}-Galase$의 열에 대한 안정성은 $60^{\circ}C$에서 $90^{\circ}C$로 온도가 높아질수록 그리고 열처리 시간이 길어질수록 감소하였는데 최초 열처리 2분간의 감소율이 가장 높았다.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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제2권2호
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pp.159-168
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1998
Effect of plant growth regulators and end-product on the enzyme activities in cotyledons of Vigna angularis during germination was investigated by measuring the changes of $\alpha-amylase$ activities in attached and detached cotyledons applied growth regulators and sugars. The higher levels of $\alpha-amylase$ in detached cotyledons than those in cotyledons attached to the embryonic axis were due to both faster synthesis and slower degradation of the enzyme in the detached cotyledons than in the attached cotyledons. Levels of $\alpha-amylase$ activity were reduced by high concentrations of glucose and sucrose, and it is suggested that this effect was caused mostly by osmotic stress and partly by end-product repression. In detached cotyledons exogenously supplied $GA_3,$ IAA, kinetin, or their combinations has a small promotive effect on the developmental patterns of $\alpha-amylase$ activity ABA and uniconazole both prevented the synthesis of $\alpha-amylase$. Glucose inhibition of enzyme activity was partly reversed by the application of $GA_3,$ and CAMP. $GA_3,$ and cAMP seemed to act through a similar mechanism. The addition of inhibitors of protein and RNA synthesis largely prevented the increase of enzyme activity in the presence or absence of exogenous $GA_3,$. The pretreatment experiments with canavanine indicated that the earlier the time of addition was, the lower the amylase activity was.
Min-Jin Kwak;Dong-Jin Ha;Min Young Park;Ju Young Eor;Kwang-Youn Whang;Younghoon Kim
Journal of Animal Science and Technology
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제66권2호
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pp.398-411
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2024
Upregulation of the nutritional value of feed is the major target of various studies in the livestock industry, and dietary enzyme supplementation could aid in digesting the nondegrading nutrients of grains in feed ingredients. Dried distillers' grains with solubles (DDGS) is a byproduct of the fermentation process in the beverage industry and can be used as a large supply source of fiber in feed. Therefore, we conducted an experiment with male broiler chickens to investigate the effect of various types of enzymes on DDGS and compare the efficacy of single enzyme and multienzyme complexes on growth performance and gut environments in broiler chickens. We used 420 1-day-old broiler chickens (Ross 308), and they were allotted into 4 dietary treatments with seven replications (CON, corn-soybean meal [SBM] diet; NC, DDGS supplemented diet; SE, 0.05 % of mannanase supplemented DDGS-based diet; MC, 0.10% of multienzyme complex (mannanase and xylanase, glucanase) supplemented DDGS-based diet. The dietary exogenous enzyme in the DDGS-supplemented diet could improve growth performance as much as the growth of the control group, and digestibility of dry matter, crude protein, and gross energy were significantly increased by enzyme addition in groups of chicks fed DDGS-supplementation diet. Moreover, the populations of pathogenic bacteria, coliforms, and Bacteroidetes were significantly decreased by enzyme supplementation, which might lead to improved gut mucus-secreting cells and inflammatory cytokines in the jejunum. Collectively, dietary single enzyme and multienzyme complexes could improve gut environments, including intestinal immune responses and gut microbial population, and lead to improvement of growth performance in broiler chickens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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