For efficient prevention and treatment of enteric colibacillosis, understanding about latest virulence factors and antimicrobial resistance of Escherichia coli is essentially needed. The aim of this study was to survey antimicrobial resistance and determine the prevalence of fimbriae and enterotoxin genes among 118 pathogenic E. coli isolates obtained from Korean pigs with diarrhea between 2016 and 2017. The genes for the toxins and adhesins were amplified by polymerase chain reaction (PCR). The susceptibility of the E. coli isolates to antimicrobials were tested using the standard Kirby-Bauer disk diffusion method. The most prevalent fimbrial antigen was F18 (40.7%), followed by F4 (16.9%), and the most prevalent combinations of toxin genes were Stx2e (21.2%), STb:EAST-1 (19.5%), and STa:STb (16.9%), respectively. Among the pathotypes, enterotoxigenic E. coli (ETEC) was the most predominant (67.8%), followed by Shiga-toxin producing E. coli (STEC, 23.7%). We confirmed high resistance rates to chloramphenicol (88.1%), tetracycline (86.4%), streptomycin (86.4%), and ampicillin (86.4%). And the majorities of isolates (90.7%) showed multi-drug resistance which means having resistance to 3 or more subclasses of antimicrobials. Results of this study can be a source of valuable data for investigating the epidemiology of and control measures for enteric colibacillosis in Korean piggeries.
A sensitive reverse transcriptase-PCR (RT-PCR) method to detect viable Escherichia coli O157:H7 in milk was established. The primer sets were designed based on the nucleotide sequences of the rfbE (per) and wbdN genes in the O157 antigen gene cluster of E. coli O157:H7. RT-PCR using five different primer sets yielded DNA with sizes of 655, 518, 450, and 149-bp, respectively. All five of the E. coli O157:H7 strains were detected by RT-PCR, but 11 other bacterial species were not. The sensitivity of RT-PCR was improved by adding yeast tRNA as a carrier to the crude RNA extract. The RT-PCR amplifying the 149-bp DNA fragment was the most sensitive for detecting E. coli O157:H7 and the most refractory to the bactericidal treatments. Heat treatment at $65^{\circ}C$ for 30 min was the least inhibitory of all bactericidal treatments. Treatment with RNase A strongly inhibited the RT-PCR of heated milk but not unheated milk. This study described RT-PCR methods that are specific and sensitive with a detection limit of 10 E. coli O157:H7 cells, and showed that pre-treating milk samples with RNase A improved the specificity to detect viable bacteria by RT-PCR.
Kim, Hwan-Deuk;Park, Dae-Hyun;Lee, Mi-Ree;Kim, Eun-Jeong;Cho, Jae-Keun
Korean Journal of Veterinary Service
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v.37
no.4
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pp.225-231
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2014
In this study, 185 cefotaxime-resistant Escherichia coli were isolated from different stages of a wastewater treatment plant (WWTP) in Daegu in Korea. Among them, 99.5% (184 isolates) originated from raw sewage and 0.5% (1 isolates) from the final effluent. Cefotaxime-resistant E. coli were high resistant to ampicillin, piperacillin, cefazolin, cephalothin, cefachlor and cefamandole (99.5~100%). About 93% of the cefotaxime-resistant E. coli were extended-spectrum ${\beta}$-lactamases (ESBL)-producing E. coli. The $bla_{TEM+CTX}$ gene was the most predominant of the ESBL genes (72.5%), followed by $bla_{CTX-M}$ (16.2%), $bla_{TEM}$ (8.7%), $bla_{TEM+CTX+SHV}$ (1.1%), $bla_{TEM+SHV}$, $bla_{TEM+OXA}$, and $bla_{TEM+CTX+SHV}$ (respectvely 0.5%). Class 1 and 2 integron were found in 49.7% and class 3 integron was not found. All of integron positive isolates were multiresistant (i.e. resistant to four or more antibiotics). Our findings showed WWTP is contaminated with antibiotic resistant bacteria with resistance genes.
The present study was conducted to investigate the biochemical characteristics and anti-biotic resistance of pathogenic Escherichia coli (E. coli) isolated from piglets with diarrhea in Kyongbuk Western Area during the period from February to November 1992. 55 E. coli strains were isolated from 97 piglets with diarrhea and the biochemical and cultural reaction were compared with the classification criteria of Edwards and Ewing. The majority of E. coli were susceptible to amikacln, enrofloxacin and gentamicin. 51 (92.7%) out of 55 drug resistance stains carried R factor (R+) which were transferable to the recipients by conjugation.
This study was undertaken the bioserotype and drug resistance of Salmonella and Escherichia coli isolated from feces for the prevention and treatment of salmonellosis and colibacillosis in zoological animals. The results obtained from the research were as follows 1. Salmonella were isolated 19, or 4.7% from 408 samples and E. coli were isolated 12, or 40.0% from 30 diarrheal samples. 2. The biotypes in 19 Salmonella were Subspecies 1. 3. The serogroups of Salmonella isolated were 47.4% in B group, 31.6% in C, 5.3% in D and 15.8% in other, and serotype of E. coli was 100% in 0127a. 4. The antibiotic resistance of Salmonella and E. coli isolated were 13, or 68.4% and 7, or 58.3% strains, respectively 5. The multiple resistant patterns of antibiotics in Salmonella were 2drugs- and 3 drugs-resistance 30.8%, respectively, and those in E. coli were mono drug-, 2 drugs- and 7 drugs-resistance 28.6%, respectively. 6. The transferred rate of resistance to recipients (E. coli ML 1410 NA$^{r}$ ) in Salmonella was 38.5%, but that in E. coli was 71.4%.
Free-living amoebae ingest several kinds of bacteria. In other words, the bacteria can survive within free-living amoeba. To determine how Escherichia coli K1 isolate causing neonatal encephalitis and non-pathogenic K12 interact with free-living amoebae, e.g., Acanthamoeba castellanii (T1), A. astronyxis (T7), Naegleria fowleri, association, invasion and survival assays were performed. To understand pathogenicity of free-living amoebae, in vitro cytotoxicity assay were performed using murine macrophages. T1 destroyed macrophages about 64% but T7 did very few target cells. On the other hand, N. fowleri which needed other growth conditions rather than Acanthamoeba destroyed more than T1 as shown by lactate dehydrogenase (LDH) release assay. In association assays for E. coli binding to amoebae, the T7 exhibited significantly higher association with E. coli, compared with the T1 isolates (P<0.01). Interestingly, N. fowleri exhibited similar percentages of association as T1. Once E. coli bacteria attach or associate with free-living amoeba, they can penetrate into the amoebae. In invasion assays, the K1 (0.67%) within T1 was observed compared with K12 (0%). E. coli K1 and K12 exhibited high association with N. fowleri and bacterial CFU. To determine the fate of E. coli in long-term survival within free-living amoebae, intracellular survival assays were performed by incubating E. coli with free-living amoebae in PBS for 24 h. Intracellular E. coli K1 within T1 (2.5%) and T7 (1.8%) were recovered and grown, while K12 were not found. N. fowleri was not invaded and here it was not recovered.
The aim of this was evaluate the efficacy of lysozyme on growth performance, nutrient digestibility, excreta microflora population, and blood profiles of weanling pigs under Escherichia coli (E. coli) challenge. A total of 30 piglets weaned at 25 days, 7.46 kg body weight, were assigned to three dietary treatments, composed of five replications, two piglets per replication, for 7 days. The dietary treatment groups were negative control (NC; without antibiotics and lysozyme), positive control (PC; NC + antibiotics), lysozyme (NC + 0.1% lysozyme). All piglets were challenged orally with 6 ml suspension, containing E. coli K88 (2 × 109 CFU/mL). Dietary supplementation with lysozyme and PC resulted in no significant differences in average daily gain and gain to feed efficiency. Weanling pigs fed with E. coli challenge with lysozyme and PC treatments had significantly enhanced nutrient retentions of dry matter and energy (p < 0.05); however, there was a tendency to increase nitrogen digestibility. Furthermore, dietary inclusion of lysozyme and antibiotics treatment groups had a beneficial effect on excreta, ileal, and cecal of the fecal microbial population as decreased E. coli (p < 0.05) counts, without effects on lactobacillus counts. A significant effect were observed on a white blood cells, epinephrine and cortisol concentrations were reduced in piglets fed diets containing E. coli challenge with lysozyme and antibiotics supplementation comparison with the NC group. Therefore, the present data indicate that lysozyme in diet could ameliorate the experimental stress response induced by E. coli in piglets by decreasing intestinal E. coli, white blood cells and stress hormones and improving nutrient digestibility.
Antibiotic resistant Escherichia coli cases are increasing high especially in Southeast Asia. Illegal use of the antibiotic in the aquaculture farming may become the culprit of the outbreak and spread into environmental source. A study was conducted to: 1) detect the chloramphenicol (CAL)-resistant gene in E. coli isolated from three aquaculture farms and six rivers of northwestern Borneo and 2) investigate the correlation between cat gene with five common antibiotics used. Isolation of E. coli was done on Eosin methylene blue agar and characterized using indole, methyl red, Voges-Proskauer, citrate tests. E. coli isolates were subsequently tested for their susceptibility to five antibiotics commonly used in aqua-farming. The CAL-resistant E. coli were further analyzed for the presence of resistant genes (cat I, cat II, cat III, cat IV) using multiplex polymerase chain reaction. 42 bacterial colonies were isolated from a total of 80 individual water samples, 34 of which were identified as E. coli. Result showed 85.3% of the E. coli isolates were resistant to amoxicillin, 35.3% were resistant to tetracycline, 29.4% were resistant to CAL, 17.6% were resistant to nitrofurantoin and 8.8% were resistant to nalidixic acid. All of the 10 CAL resistant E. coli isolateswere detected with cat II genes; five isolates detected with cat IV genes; three isolates detected with cat III genes; and another two detected with cat I genes. Pearson correlation coefficient shows highly significant relationship between resistance pattern of CAL with amoxicillin; and CAL with tetracycline. Our findings provide the supplementary information of the CAL resistance gene distribution, thereby improving our understanding of the potential risk of antibiotic resistance underlying within this microbial ecosystem.
A sensitive and rapid enzyme immunoassay(EIA) to detect Escherichia coli O157 in ground beef was developed by using a sandwich type assay with polyclonal antibodies to E coli O157. E coli O157 in ground beef could be detected within 15hr, including incubation for 12hr in enrichment broth and 3hr in immunoassay. The EIA could detect $1.3{\times}10^5$ cells of E coli O157/g of ground beef without enrichment. The lowest limit of detection was 0.23 E coli O157 per g of meat after enrichment. Confirmation was required in the positive specimens in the EIA by culture method even though the negative specimens were not. These results suggested that the immunoassay could be a very efficient method for the screening E coli O157 in meat.
Kim Jae-heon;Choi Won-ill;Youn Seock-won;Jung Sang Oun;Oh Chung-Hun
Korean Journal of Microbiology
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v.40
no.3
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pp.232-236
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2004
We investigated hydrogen peroxide resistance of Escherichia coli possessing acetyl xylan esterase(AxeA) of Streptomyces coelicolor A3(2). The induction of AxeA production by isopropyl-$\beta$-thiogalactoside was confirmed by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The differences in growth between induced and non-induced E. coli were determined by the changes in optical density of cultures after hydrogen peroxide treatment The lethal effect of hydrogen peroxide was observed for non-induced cultures at all concentrations tested in this study (lmM, 2.5mM and 5mM). However, cultures induced for AxeA production resisted the lethal effect, except at 5mM where cells were killed irrespective of the AxeA production. The axeA induction increased survival against 1.5mM hydrogen peroxide from 59% to 74%. In addition, AxeA producing E. coli showed increased survival at $45^{\circ}C$, near maximum growth temperature. Therefore, it was concluded that AxeA conferred a cross-resistance upon the bacterium against both oxidative- and heat stress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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