Calmodulin (CaM), a $Ca^{2+}$ binding protein in eukaryotes, mediates cellular $Ca^{2+}$ signals in response to a variety of biotic and abiotic external stimuli. The $Ca^{2+}$-bound CaM transduces signals by modulating the activities of numerous CaM-binding proteins. As a CaM binding protein, AtCBP63 ($\b{A}$rabidopsis thaliana $\b{C}$aM-binding protein $\underline{63}$ kD) has been known to be positively involved in plant defense signaling pathway. To investigate the pathogen resistance function of AtCBP63 in potato, we constructed transgenic potato (Solanum tuberosum L.) plants constitutively overexpressing AtCBP63 under the control of cauliflower mosaic virus (CaMV) 35S promoter. The overexpression of the AtCBP63 in potato plants resulted in the high level induction of pathogenesis-related (PR) genes such as PR-2, PR-3 and PR-5. In addition, the AtCBP63 transgenic potato showed significantly enhanced resistance against a pathogen causing bacterial soft rot, Erwinia carotovora ssp. Carotovora (ECC). These results suggest that a CaM binding protein from Arabidopsis, AtCBP63, plays a positive role in pathogen resistance in potato.
Kang, Beom-Ryong;Han, Song-Hee;Zdor, Rob E.;Anderson, Anne J.;Spencer, Matt;Yang, Kwang-Yeol;Kim, Yong-Hwan;Lee, Myung-Chul;Cho, Baik-Ho;Kim, Young-Cheol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.4
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pp.586-593
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2007
Seed coating by a phenazine-producing bacterium, Pseudomonas chlororaphis O6, induced dose-dependent inhibition of germination in wheat and barley seeds, but did not inhibit germination of rice or cucumber seeds. In wheat seedlings grown from inoculated seeds, phenazine production levels near the seed were higher than in the roots. Deletion of the gacS gene reduced transcription from the genes required for phenazine synthesis, the regulatory phzI gene and the biosynthetic phzA gene. The inhibition of seed germination and the induction of systemic disease resistance against a bacterial soft-rot pathogen, Erwinia carotovora subsp. carotovora, were impaired in the gacS and phzA mutants of P chlororaphis O6. Culture filtrates of the gacS and phzA mutants of P. chlororaphis O6 did not inhibit seed germination of wheat, whereas that of the wild-type was inhibitory. Our results showed that the production of phenazines by P. chlororaphis O6 was correlated with reduced germination of barley and wheat seeds, and the level of systemic resistance in tobacco against E. carotovora.
This study, to enhance the sterilization, browning inhibition and precooling effect of electrolyzed oxidizing water(EOW) as cleaning water on food industry, was carried out to investigate the efficacy of electrolyzed oxidizing water(EOW) with 0.85% NaCl, 0.5% ethanol, polysorbate 80 of 1 ppm, 0.5% lemon juice and 0.5% citron juice. Escherichia coli KCTC 1039 with initial count of 5.63$\times$10$\^$8/ CFU/mL were reduced to <10$^1$CFU/mL after 15∼30 sec when it was treated by electrolyzed oxidizing water added with various food additives. Bacillus cereus KCTC 1012 were reduced to <10$^1$ CFU/mL after 2 minutes treatment with electrolyzed oxidizing water containing polysorbate 80 and ethanol. Iactobacillus plantarum KCTC 3108 were reduced to <10$^1$CFU/mL after 30 sec treatment with electrolyzed oxidizing water containing polysorbate 80, citron juice and lemon juice, respectively. Erwinia carotovora subsp. carotovora KCTC 2776 were reduced to <10$^1$CFU/mL after 30 sec treatment with electrolyzed oxidizing water containing polysorbate 80 and lemon juice. Browning inhibition effect was determined by comparison of polyphenol oxidase activity. Inhibition ratio of polyphenol oxidase was approximately 62∼84% in most treatments with the exception of 57% and 25% inhibition by 0.5% ascorbic acid and polysorbate 80, respectively. Sliced potato dipped in electrolyzed oxidizing water containing NaCl and citron juice for 30 minutes showed significantly low PPO activity, 64 units in treatment with NaCl and 91 units in treatment with citron juice. At the same time, changes in color value(△E) of sliced potato was below 3 in most treatments.
Black rot caused by Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc) is the most damaging disease in Brassica crops around the world. In this study, we developed a molecular marker specific to Xcc race 5. To do this, the available whole genome sequences of Xcc races/strains and Xc subspecies were aligned and identified a highly variable genomic region (XccR5-89.2). Subsequently, a primer set covering the 'XccR5-89.2' region was designed and tested against the genomic DNA of Xcc races/strains, Xc subspecies and other plant-infecting bacterial strains (Pseudomonas syringae pv. maculicola and Erwinia carotovora subsp. carotovora). The results showed that the 'XccR5-89.2' primer pair amplified a 2,172-bp fragment specific to Xcc race 5. Moreover, they also amplified a 1,515-bp fragment for Xcc race 1 and an over 3,000-bp fragment for Xcc race 3. However, they did not amplify any fragments from the remaining Xcc races/strains, subspecies or other bacterial strains. The 'XccR5-89.2' primer pair was further PCR amplified from race-unknown Xcc strains and ICMP8 was identified as race 5 among nine race-unknown Xcc strains. Further cloning and sequencing of the bands amplified from race 5 and ICMP8 with 'XccR5-89.2' primers revealed both carrying identical sequences. The results showed that the 'XccR5-89.2' marker can effectively and proficiently detect, and identify Xcc race 5 from Xcc races/strains, subspecies and other plant-infecting bacteria. To our knowledge, this is the first report for an Xcc race 5-specific molecular marker.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.101.2-102
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2003
The ability of P. chlororaphis O6 to induce resistance to Erwinia carotovora subsp. carotovara SCCI and to promote growth in tobacco was demonstrated in microtiter assays on plants pre-inoculated at the root level with the bacteria before challenge with the leaf pathogen. To identify th bacterial determinants involved in induced systemic resistance and plant growth promotion, cell culture of O6 grown in King's medium B was fractionated with organic solvents and purified using various columns. in vivo and in vitro assays with samples from successive fractionation steps of the O6 supernatant led to the conclusion that antibacterial compounds were observed in aqueous layer, and to the isolation of fractions containing metabolites that retained most of the resistance-inducing activity (70:30, methanol:water) and the plant growth promotion (80:20 and 90:10, methanol:water) after ODS column chromatography. Although these molecules remain to be purified further and structurally characterized, its isolation is an addition to the range of determinants from plant growth-promoting rhizobacteria known to stimulate plant defence.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.101.1-101
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2003
Lipopolysaccharide, siderophore, and cyclic dipeptide have been shown to be necessary for ISR induction by pseudomnads. However, there is no report on cloning of genes or generating specific mutants involving in ISR activity. A biological control bacteium P. chlororaphis O6 induces resistance to Erwinia carotovora subsp. carotovara SCCI in tobacco and induces drought resistance in Arabidopsis. To isolate genes involved in ISR activity and induction of drough resistance of O6, we constructed Tn5 mutants and were used to screen for ISR activity and drought resistance activity using microtiter assay with tobacco and Arabidopsis. Thirty-three ISR-deficient mutants were selected, and the nine ISR-deficient mutants were also lost activity of drought resistance. The flanking sequence analysis of the ISR and drought resistance-deficient mutants showed that a gacS gene encoding a two-component sensor kinase, and a mce gene encoding a protein involved in mycobacterial cell entry were mutated. The flanking sequence of each Tn5 mutant altered ISR activity is currently under investigation. These results indicate that gacS and mce are important genes in induction of ISR activity and drought resistance of P. chlororaphis O6. Our works will open opportunities for identification of bacterial genes or traits that are involved in ISR activity and induced drought resistance of P. chlororaphis O6.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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