본 연구는 티모시 건초와 농후 사료 위주의 사료를 급여한 한우 씨수소 정소상체 정자 체외수정 효율 조사를 통해 정자의 활용 가능성을 조사하였다. 농후 사료는 체중의 1.8%를 급여하고 양질의 티모시 건초를 자유채식 시킨 14개월령 거세우의 정소에서 분리된 정소상체 미부의 정자를 회수하고 동결 흉해 후 체외수정을 실시한 결과는 다음과 같다. 웅성전핵과 자성전핵이 형성(2PN)된 난자는 정상수정으로, 1개의 전핵(1PN), Expanded Sperm Head (ESH), Polyspermy 형태는 비정상적인 수정의 형태로 평가하였다. 정상적으로 수정된 난자의 비율은 정소상체 정자의 경우 전체 침투율은 49.7% 그리고 정상적인 2PN을 가진 난자는 18.5%를 보였으며, 대조구 정자의 전체 침투율은 54.4%로서 정소상체 정자 보다 높은 결과를 보였으나 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 정상적으로 2PN을 형성한 비율은 36.7%로서 정소상체 정자를 이용한 정자 보다 높았으나 유의적인 차이는 없었다. 체외수정 후 발달률 조사에서 정소상체 정자의 분할률은 81.2%, 대조구 정자는 82.7%로 유사한 결과를 보였으나, 배반포 발달률은 정소상체 정자 24.4%와 대조구 정자 12.2%로 정소상체 정자를 사용한 난자의 발달에서는 유의적으로 높았다(p<0.05).
This study was conducted in order to obtain the information of the histological changes in each of six segments of the epididymal ducts in Korean native goats. Thirty-two Korean native male goats were examined, dividing into seven groups, at 4 weeks intervals from 8 to 32 weeks of age. The results obtained were as follows. 1. The epididymal ducts showed histologically an abrupt growth at the age of 16 weeks being followed by almost full maturation at the age of 24 weeks. Diameter of the cauda was steadily larger than that of the caput and corpus of the epididymal ducts. 2. Spermatozoa in the lumen of epididymal ducts were first observable at the age of 16 weeks, thereafter showing sparse in the lumen of caput, whereas most dense in the lumen of cauda in the density of spermatozoa. 3. Ducts in the caput and corpus were lined by ciliated columnar epithelium until the age of 12 weeks, and later by pseudostratified ciliated columnar epithelium which was composed of ciliated columnar cells, clear cells and basal cells. Ducts of cauda epididymis were lined by simple ciliated columnar epithelia until 12 weeks of age and later by simple or pseudostratified ciliated columnar epithelium, and two types of ducts (small ducts with high epithelium and large ducts with lower epithelium) were noted. Nucleus of the epithelial cells in the caput were located in the base of cells but in the corpus and cauda, those were located in the mid part of cells. cilia were most developed in the epithelia of the corpus.
Communication among epididymal epithelial cells creates the best luminal condition where spermatozoa mature, transport and are stored. Vacuolar ATPase (V-ATPase) and cytokeratin 5 (KRT5) have been used as signal indicators for clear and basal cells of the epididymal epithelium, respectively, in mice, rats, bats, and pigs; however, these two markers have not yet been described in the epididymis of bulls. Here, we examined the presence and distribution of the B1 subunit of V-ATPase (B1-VATPase) and KRT5 in the distinct regions of adult bovine epididymides, specifically, the caput, corpus, and cauda. Immunofluorescence staining and confocal microscopy showed that narrow shaped-clear cells were placed in the caput and corpus regions of the bovine epididymis; however, they were absent in the cauda epididymis. In addition, B1-VATPase was highly expressed in the cauda spermatozoa; however, it was rarely detected in the caput spermatozoa. On the other hand, KRT5-positive cells, basal cells, were maintained beneath the basal lamina and they had the traditional form with a dome-shaped morphology from the caput to cauda region of the bovine epididymis. The co-expression of B1-VATPase and KRT5 was confined to basal cells placed in the basal region of the epithelium. In summary, 1) clear cells were present with region-specific localization, 2) B1-VATPase was present in the corpus and cauda spermatozoa but absent in the caput, 3) co-expressed cells with B1-VATPase and KRT5 were present in the adult bovine epididymis, and 4) B1-VATPase was not a specific marker for clear cells in the bovine epididymis. Therefore, the perfect epididymal luminal condition created by the specific expression and localization patterns of B1-VATPase might be necessary to obtain fertilizing capacity of spermatozoa in the bovine epididymis.
Ahmed, Mukhtar;Ahamed, R. Nazeer;Aladakatti, R.H.;Ghodesawar, M.G.
Advances in Traditional Medicine
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제9권4호
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pp.339-349
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2009
An attempt has been made to assess whether the dose dependent effect of benzene extract of Ocimum sanctum leaves on the morphological changes in the cauda epididymal spermatozoa and sperm parameters in male albino rats. Scanning Electron Microscope observations illustrate the disturbance in plasma membrane as well as acrosomal membrane. Most of the sperms appear morphologically abnormal in the mid region of the tail; there is formation of balloon like cytoplasmic droplet. Sperm parametric study exhibits decrease in the total sperm count, sperm motility, forward velocity and increase in the percentage of abnormal sperms in dose dependent manner on treatment benzene extract of Ocimum sanctum leaves. The results suggest that the effects may have resulted from a general disturbance in the proteins and alteration in cauda epididymal milieu probably due to androgen deficiency consequent upon antiandrogenic property of Ocimum sanctum leaves.
Manee-In, S.;Parmornsupornvichit, S.;Kraiprayoon, S.;Tharasanit, T.;Chanapiwat, P.;Kaeoket, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권6호
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pp.791-796
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2014
Cryopreservation of epididymal sperm is an effective technique to preserve genetic materials of domestic cats and wild felids when they unexpectedly die. However, this technique inevitably causes detrimental changes of cryopreserved-thawed spermatozoa, for example, by physical damage and excessive oxidative stress. L-carnitine is an antioxidant that has been used to improve sperm motility in humans and domestic animals. This study aimed to investigate the effects of L-carnitine on cat epididymal sperm quality following cryopreservation and thawing. After routine castration, cauda epididymides were collected from 60 cat testes. The epididymal spermatozoa from 3 cauda epididymides were pooled as 1 replicate. Spermatozoa samples (16 replicates) were examined for spermatozoa quality and then randomly divided into 4 groups: 0 mM L-carnitine (control), 12.5 mM, 25 mM and 50 mM L-carnitine. The sperm aliquots were then equilibrated and conventionally frozen. After thawing, sperm motility, plasma membrane integrity, DNA integrity and acrosome integrity were evaluated. The 25 mM L-carnitine significantly improved sperm motility compared with a control group (p<0.05), although this was not significantly different among other concentrations. In conclusion, supplementation of 25 mM L-carnitine in freezing extender improves cauda epididymal spermatozoa motility. The effects of L-carnitine on the levels of oxidative stress during freezing and thawing remains to be examined.
This research was undertaken to determine the effects of the anticancer and immunosuppressive drug cyclophosphamide (CP) on the epididymis of the male rat in terms of ultrastructural alteration and protein analysis by SDS-PAGE at different groups; control group, 1 week group, 3 weeks group, 5 weeks group were treated with saline (control group) or CP at doses of 20mg/Kg/week, 1 time a week, respectively. In the cytoplasm of the principal cells on the epididymis, the mitochondrial outer and inner membranes were significantly swollen or disrupted. The cisterns of rough endoplasmic reticulum (rER) were also swollen, and a number of Golgi vesicles were increased, respectively. It is suggested that treatment with CP alters the specific cell organelles in all segments of the epididymis. CP caused changes in protein concentrations in cauda of epididymis after CP treatment. Total proteins of 30 to 39 species such as lactate dehydrogenase, carnitine acetyltransferase and acid phosphatase were expressed in the cauda fluid. Then the more CP was increased, the more concentration of proteins caused to decrease, synthesize or increase in epididymal cauda. In contrast to the control group, in particular 29KD and the other 10 proteins in the cauda fluid were decreased or disappeared, respectively, whereas 89KD and the other 6 proteins in the cauda, were increased or synthesized, respectively. The other proteins are not showed distinctive difference. Therefore, it is possible that CP at a high dose accumulation alters epididymal function with dose-related increase or decrease in specific activity of marked proteins for all regions of the epididymis (particularly, specific segment of cauda). These alterations could be mediated by direct, toxic effects of the drug on the epithelium or be secondary to changes in the spermatozoa as a result of the CP treatment.
본 연구는 Hamster 정소상체 정자의 운동성에 영향을 미치는 methylxanthine derivatives 의 효과를 알아보고자 수행하였다 . Pentoxifylline 을 첨가하였을 때 운동 형태에 대한 첨가효과는 정소상체 체부에서 차이를 보였으며, 농도에 대한 변화는 1 mM 농도군에서 현저한 차이를 나타냈다. 2-Deoxya-denosine 첨가군에서도 pentoxifylline 첨가군과 같이 특히 VCL 이 정소상체 체부 정자부터 증가하였으며 다른 농도군에 비해 1 mM 과 2 mM 에서 차이가 났다. Hypoxanthine 첨가군은 1 mM 농도에서 다른 첨가군에 비해 운동 형태가 증가하였다. 그러나 pentoxifylline 과 adenosine 첨가군과는 달리 농도를 달리하여도 뚜렷한 운동형태의 변화는 관찰되지 않았다. VCL 과 VAP 는 pentoxifylline 1 mM 과 2-Deoxyadenosine 1 mM 첨가군에서 정소상체 체부 정자의 운동성이 증가하고 hypoxanthine 1 mM 첨가군도 유의하게 증가하였다. 결론적으로 hamster 정소상체 정자의 운동성은 적정한 농도의 methylxanthine derivatives 의 첨가로 증가됨을 알 수 있었다.
Direct cell-cell communication via the transfer of small molecules between neighboring cells in tissue is accomplished by gap junctions composed of various connexins (Cxs). Proper postnatal development of the epididymis is important for acquisition of male reproduction. The epididymal epithelium is composed of several cell types, and some of these cells are connected by gap junctions. The present study was conducted to determine the presence of Cx transcripts in the corpus and cauda epididymis. In addition, transcriptional changes of Cxs expressed during different postnatal stages were examined by real-time PCR analysis. In both epididymal regions, the same nine Cx transcripts of thirteen Cxs tested were detected. In the corpus epididymis, the highest levels of Cxs31.1 and 37 transcripts were observed at 45 days of age, and amounts of Cxs26, 30.3, and 32 transcripts increased with age and subsequently decreased in the elderly. Expression of Cx31 was greatly increased in the adult and elder stages, while Cxs40, 43, and 45 were abundant in the early postnatal stages. In the cauda epididymis, expression of Cxs26, 30.3, 31.1, 37, and 40 reached the highest levels at 5 months of age. The levels of Cxs31 and 32 mRNAs fluctuated throughout the postnatal period. The amounts of Cxs43 and 45 transcripts were more abundant during the late neonatal and prepubertal ages than later ages. These findings suggest that regional specification of the epididymis is partly regulated by differential expression of Cx genes during the postnatal developmental period.
Objective: The purpose of this study was to evaluate effects of goat milk and fermented goat milk on reproductive function and stamina of male rodent. Methods: Experiment I: Male ICR mouse was divided into four groups. Group 1 none-treated control; Group 2 received saline; Group 3 received cow milk 10 ml/kg per day for 15 days; Group 4 received goat milk 10 ml/kg per day for 15 days. The cauda epididymal sperm motility and testicular sperm production were investigated. Experiment II: Male SD rat was divided into three groups. Group 1 received saline; Group 2 received goat milk 10 ml/kg per day for 28 days; Group 3 received fermented goat milk 10 ml/kg per day for 28 days. The cauda epididymal sperm motility and testicular sperm production were also investigated. The concentration of testosterone in serum at 1 and 3 weeks after treatment was determined using Immulite 2000 kit. Testes, epididymis, prostate, and seminal vesicle were weighed. Experiment III: Male ICR mouse was divided into four groups. Group 1 none-treated control; Group 2 received saline; Group 3 received goat milk 10 ml/kg per day for 4 weeks; Group 4 received fermented goat milk 10 ml/kg per day for 4 weeks. After treatment, the mouse was forced to swim to test for stamina. Results: In Experiment I, the cauda epididymal sperm motility after in vitro culture for 1 or 3 h was significantly (p<0.05) higher in cow milk and goat milk than in the control and saline. There was no significant difference in the cauda epidymal sperm motility between cow and goat milk. The testicular spermatid number was significantly (p<0.01) higher in goat milk (222.8${\times}10^6$) than in the control (108.6), saline (98.2), and cow milk (118.2). In Experiment II, the cauda epididymal sperm motility after in vitro culture for 1 h was significantly (p<0.05) higher in fermented goat milk than in saline and goat milk. There was no significant difference in the cauda epidymal sperm motility between saline and goat milk but goat milk showed slightly higher sperm motility than saline. After in vitro culture for 3 h, the cauda epididymal sperm motility was significantly (p<0.01) higher in fermented goat milk and goat milk than in saline. The testicular spermatid number was significantly (p<0.05) higher in goat milk than in saline, and significantly (p<0.01) higher in fermented goat milk than in saline. And the serum testosterone levels of rats administered with goat milk or fermented goat milk were increased but were no significant difference among three groups. Also the prostate weight was significantly (p<0.05) increased in the goat and fermented goat milk. In Experiment III, the swimming time in the goat milk and fermented goat milk groups was significantly (p<0.01) longer than in the control and saline. There was no significant difference in the swimming time between goat and fermented goat milk but the fermented goat milk showed slightly longer swimming time than the goat milk. Conclusion: The cauda epididymal sperm motility, the testicular spermatid number and stamina were improved when the mice and rats were drunk with goat milk or fermented goat milk.
The developmental process of the epididymis was investigated in Meishan boars from 1 to 364 days of age. Epididymal weight increased rapidly between 45 and 150-180 days of age. The diameter and epithelial area of the epididymal ducts greatly increased up to 105-120 days of age. At 1 day of age, the central and distal cauda already had a pseudostratified epithelium surrounded by smooth muscle. At 60-75 days of age, the central and distal caput, corpus, and proximal cauda revealed a well-developed structure of the epithelium. The proximal caput showed a tall, irregular and vacuolar epithelium at 105-120 days of age. PAS-positive contents in the lumen of the caput, corpus and cauda epididymides were first detected at 60-75, 45-60 and 1-30 days of age, respectively. Moreover, in the central and distal caput, PAS-positive granules appeared at 60-75 days of age, and increased until 105-120 days. These results suggest that the epididymis develops completely by approximately 120 days of age, though its weight increases rapidly up to 150-180 days. Thus, it appears that development of the epididymis occurs at an earlier age in Meishan boars than in European and American breeds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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