Yoo Jeong Hyun;Kim Sung Sook;Lee Kyung Ja;Rhee Chung Sik
Radiation Oncology Journal
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v.15
no.2
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pp.79-95
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1997
Purpose : Phospholipase C(PLC) isozymes play significant roles in signal transduction mechanism. $PLC-\gamma$ 1 is one of the key regulatory enzymes in signal transduction for cellular proliferation and differentiation. Ras oncoprotein, EGFR, and PKC are also known to be involved in cell growth. The exact mechanisms of these signal transduction following irradiation, however, were not clearly documented Thus, this study was Planned to determine the biological significance of PLC, ras oncoprotein, EGFR, and PKC in damage and regeneration of rat intestinal mucosa following irradiation. Material and Method : Sixty Sprague-Dawley rats were irradiated to entire body with a single dose of 8Gy. The rats were divided into S groups according to the sacrifice days after irradiation. The expression of PLC, ras oncoprotein, EGFR and PKC in each group were examined by the immunoblotting and immunohistochemistry. The histopathologic findings were observed using H&I stain, and the mitoses for the evidence of regeneration were counted using the light microscopy & PCNA kit. The Phosphoinositide(PI) hydrolyzing activity assay was also done for the indirect evaluation of $PLC-\gamma$ 1 activity. Results: In the immunohistochemistry , the expression of $PLC-{\beta}$ was negative for all grøups. The expression of $PLC-{\gamma}1$ was highest in the group III followed by group II in the proliferative zone of mucosa. The expression of $PKC-{\delta}1$ was strongly positive in group 1 followed by group II in the damaged surface epithelium. The above findings were also confirttled in the immunoblotting study. In the immunoblotting study, the expressions of $PLC-{\beta}$, $PLC-{\gamma}1$, and $PKC-{\delta}1$ were the same as the results of immunohis-tochemistry. The expression of ras oncoprctein was weakly positive in groups II, III and IV. The of EGFR was the highest in the group II, III, follwed by group IV and the expression of PKC was weakly positive in the group II and III. Conclusion: $PLC-{\gamma}1$ mediated signal transduction including ras oncoprotein, EGFR, and PKC play a significant role in mucosal regeneration after irradiation. $PLC-{\delta}1$ mediated signal transduction might have an important role in mucosal damage after irradiation. Further studies will be necessary to confirm the signal transduction mediating the $PKC-{\delta}1$.
The author intended to investigate external and internal changes in the cone structure, changes in water content, sugar, fat and protein during the period of seed maturation which bears a proper germinability. The experimental results can be summarized as in the following. 1. Male flowers 1) Pollen-mother cells occur as a mass from late in April to early in May, and form pollen tetrads through meiosis early and middle of May. Pollen with simple nucleus reach maturity late in May. 2) Stamen number of a male flower is almost same as the scale number of cone and is 69-102 stamens. One stamen includes 5800-7300 pollen. 3) The shape is round and elliptical, both of a pollen has air-sac with $80-91{\mu}$ in length, and has cuticlar exine and cellulose intine. 4) Pollen germinate in 68 hours at $25^{\circ}C$ with distilled water of pH 6.0, 2% sugar and 0.8% agar. 2. Female flowers 1) Ovuliferous scales grow rapidly in late April, and differentiation of ovules begins early in May. Embryo-sac-mother cells produce pollen tetrads through meiosis in the middle of May, and flower in late May. 2) The pollinated female flowers show repeated divisions of embryo-sac nucleus, and a great number of free nuclei form a mass for overwintering. Morphogenesis of isolation in the mass structure takes place from the middle of March, and that forms albuminous bodies of aivealus in early May. 3. Formation of pollinators and embryos. 1) Archegonia produce archegonial initial cells in the middle and late April, and pollinators are produced in the late April and late in early May. 2) After pollination, Oespore nuclei are seen to divide in the late May forming a layer of suspensor from the diaphragm in early June and in the middle of June. Thus this happens to show 4 pro-embryos. The organ of embryos begins to differentiate 1 pro-embryo and reachs perfect maturation in late August. 4. The growth of cones 1) In the year of flowering, strobiles grow during the period from the middle of June to the middle of July, and do not grow after the middle of August. Strobiles grow 1.6 times more in length 3.3 times short in diameter and about 22 times more weight than those of female flower in the year of flowering. 2) The cones at the adult stage grow 7 times longer in diameter, 12-15 times shorter diameter than those of strobiles after flowering. 3) Cone has 96-133 scales with the ratio of scale to be 69-80% and the length of cone is 11-13cm. Diameter is 5-8cm with 160-190g weight, and the seed number of it is 90-150 having empty seed ratio of 8-15%. 5. Formation of seed-coats 1) The layers of outer seed-coat become most for the width of $703{\mu}$ in the middle of July. At the adult stage of seed, it becomes $550-580{\mu}$ in size by decreasing moisture content. Then a horny and the cortical tissue of outer coats become differentiated. 2) The outer seed-coat of mature seeds forms epidermal cells of 3-4 layers and the stone cells of 16-21 layers. The interior part of it becomes parenchyma layer of 1 or 2 rows. 3) Inner seed-coat is formed 2 months earlier than the outer seed-coat in the middle of May, having the most width of inner seed-coat $667{\mu}$. At the adult stage it loses to $80-90{\mu}$. 6. Change in moisture content After pollination moisture content becomes gradually increased at the top in the early June and becomes markedly decreased in the middle of August. At the adult stage it shows 43~48% in cone, 23~25% in the outer seed-coat, 32~37% in the inner seed-coat, 23~26% in the inner seed-coat and endosperm and embryo, 21~24% in the embryo and endosperm, 36~40% in the embryos. 7. The content compositions of seed 1) Fat contents become gradually increased after the early May, at the adult stage it occupies 65~85% more fat than walnut and palm. Embryo includes 78.8% fat, and 57.0% fat in endosperm. 2) Sugar content after pollination becomes greatly increased as in the case of reducing sugar, while non-reducing sugar becomes increased in the early June. 3) Crude protein content becomes gradually increased after the early May, and at the adult stage it becomes 48.8%. Endosperm is made up with more protein than embryo. 8. The test of germination The collected optimum period of Pinus koraiensis seeds at an adequate maturity was collected in the early September, and used for the germination test of reduction-method and embryo culture. Seeds were taken at the interval of 7 days from the middle of July to the middle of September for the germination test at germination apparatus.
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