This study was performed to observe the antibacterial effect of polyphosphate (polyP) with various chain lengths (P3~P75) on virulent. invasive strains of P. gingivalis A7A1-28 and W50, and multidrug resistant E. faecalis ATCC29212. P. gingivalis strains were grown in brain-heart infusion broth (BHI) containing hemin and vitamin K with or without polyP. PolyP was added at the very beginning of the culture or during the exponential growth phase of the culture. Inhibition of the growth of P. gingivalis was determined by measuring the absorbancy at 540nm of the grown cells. Viable cell counts of the culture and release of intracellular nucleotide from P. gingivalis were measured. E. faecalis was grown in plain BHI with antibiotics alone or in combination with polyP(calgon: 0.1~1.0%) and the bacterial absorbancy was measured. The overall results suggest that polyP has a strong antibacterial effect on the growth of the virulent strains of P. gingivalis and the antibacterial activity of polyP seems largely bactericidal. accompanying bacteriolysis in which chelation phenomenon is not involved. Although polyP does not exert antibacterial activity against E. faecalis, it appears to increase antibacterial effect of erythromycin and tetracycline on the bacterium. Therefore, polyP alone or in combination with antibiotics may be developed as a candidate for the agent controlling oral infections including endodontic infection.
Polyphosphate has been used to prevent decomposition of foods and has been shown to have inhibitory effect on the growth of gram positive bacteria. The purpose of this study was to evaluate the effect of polyphosphate on the growth of Porphyromonas endodontalis, a gram negative endodontopathic bacterium. Porphyromonas endodontalis ATCC 35406 was grown in the presence of polyphosphates with different chain lengths. Inhibitory effect of each polyphosphate which was added at the beginning or during the culture, was determined by measuring the optical density of the bacterial cell at 540nm and by viable cell count. The results from this study were as follows : 1. Polyphosphates were shown the growth inhibition of the Porphyromonas endodontalis. 2. The minimal inhibitory concentration(MIC) of polyphosphate was observed to be 0.04%. 3. Polyphosphates with chain lengths of 25 and 75 demonstrated the greatest inhibitory effect on the growth of Porphyromonas endodontalis. 4. Polyphosphates are bactericidal to Porphyromonas endodontalis, demonstrating the growth inhibition of the bacterium. The overall results suggest that use of polyphosphate may affect the growth of Porphyromonas endodontalis. Further studies will be needed to confirm the effect of, polyphosphate.
Poly-P has been used to prevent decomposition of foods and has been shown to have inhibitory effect on the growth of gram positive bacteria. The purpose of this study was to evaluate the effect of poly-P on the growth of Porphyromonas endodontalis, a gram negative obligate anaerobic rod, endodontopathic bacterium. P. endodontalis ATCC 35406 was in BHI broth containing hemin and vitamin K with or without poly-P. Inhibitory effect of each poly-P which was added at the beginning(lag phase) or during(exponential phase) the culture, MIC(minimum inhibitory concentration) was determined by measuring the optical density of the bacterial cell at 540nm. Viable cell counts were measured to determined whether poly-P has a bactericidal effect. Leakage of intracellular nucleotides from P. endodontalis was determined at 260nm and morphological change of P. endodontalis was observed under the TEM(transmission electron microscope). Binding of 32P-labeled poly-P to P. endodontalis was examined. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and zymography were performed to observe the changes in protein and enzyme profiles of P. endodontalis, respectively. The results from this study were as follows : 1. The minimal inhibitory concentration(MIC) of poly-P to P. endodontalis appeared to be 0.04~0.05%. 2. Poly-P added to the P. endodontalis culture during the exponential phase of P. endodontalis was as much effective as poly-P added at the begining of the culture, suggesting that the antibacterial effect of poly-P is not much dependent on the initial inoculum size of P. endodontalis. 3. Poly-P are bactericidal to P. endodontalis, demonstrating the decrease of the viable cell counts. 4. Intracellular nucleotide release from the P. endodontalis, was not increased in the presence of poly-P and was not reversed by the addition of divalent cations like $Ca^{2+}$ and $Mg^{2-}$. 5. Under the TEM, it was observed that fine electro-dense materials were prominent in the poly-P grown P. endodontalis, appearing locally in the cell, and the materials were more abundant and more dispersed in the cell as the incubation time with poly-P increased. In addition, highly electron dense granules accumulated in many poly-P grown cells, most of which were atypical in their shape. 6. Binding of 32P-labeled poly-P to P. endodontalis appeared to be 32.8 and 45.5 and 53.4% at 30 minutes, 1 hours and 2 hours, respectively. 7. In the presence of poly-P. the synthesis of proteins with apparent molecular masses of 25, 27, 35, 45 was lost or drastically decreased whereas expression of a protein with an apparent molecular mass of 75 was elevated. 8. Proteolytic activity of P. endodontalis was decreased by poly-P. The overall results suggest that use of poly-P may affect the growth of P. endodontalis, and the anti-bacterial activity of poly-P seems largely bactericidal. Changes in shape, protein expression, and proteolytic activity of P. endodontalis by poly-P may be directly and indirectly attributed to the antibacterial effect of poly-P. Further studies will be needed to confirm the effect of poly-P.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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