• 제목/요약/키워드: Electrophoretical analysis

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Electrophoretical Analysis of 36-Kilodalton Outer Membrane Protein of Vibrio vulnificus ATCC 27562

  • Moon-Soo Heo;Cho-Rok Jung
    • Journal of Life Science
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    • 제9권1호
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    • pp.35-39
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    • 1999
  • Elecrophoreticl analysis of a 36 kDa protein was runned by SDS-PAGE, isoelectric focusing (IEF) and two dimensional electrophoresis pattern. Major 36 kDa and 25, 46, 48, 66 kDa protein were detected by Coomassie blue stain on SDS-PAGE. Major 36kDa protein was eluted for production of antiserum for serological analysis, IEF and two dimensional electrophoresis. Isoelectric point of 36kDa was aout pH 8.5. Two dimensional electrophoresis of eluted 36kDa showed one point on the gel. Anti-36 kDa serum made by newzilland rabbit for serological test. In ELISA, final titer of antibody was 100×{TEX}$2^5}${/TEX} : 1. Neutralize ability of serum was examined by slide agglutination test and colonization test in rat. Anti-36 kDa serum agglutinated whole cell of V. vulnificus were inhibited colonization on intestine in rat. Accordingly In this paper contain some electrophoretical analysis and serological test of a 36 kDa OMP of V. vulnificus.

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단(單)클론성 항체(抗體)를 이용한 소전염성비기관염(傳染性鼻氣管炎)바이러스 진단법(診斷法) 개발 I. 소전염성비기관염(傳染性鼻氣管炎)바이러스에 대한 단(單)클론성 항체(抗體) 생산(生産) (Application of Monoclonal Antibody to Develop Diagnostic Techniques for Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus I. Production of Monoclonal Antibodies against Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus)

  • 전무형;김덕환;이헌준;안수환;권창희
    • 농업과학연구
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    • 제14권2호
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    • pp.401-408
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    • 1987
  • 세포융합기술(細胞融合技術)을 이용하여 소전염성비기관염(傳染性鼻氣管炎)바이러스(IBRV) 항원(抗原)에 대응(對應)하는 9주(株) 단(單)클론성항체(性抗體)를 생산하였으며, 이들 항체(抗體)의 특성(特性)을 형광항체법(螢光抗體法), 혈청중화시험(血淸中和試驗) 및 전기영동분석법(電氣泳動分析法)으로 시험(試驗)하였다. 생산된 2종(種)의 단(單)클론성 항체(抗體)중 8종(種)은 IBRV이외의 Pseudorabies virus, Infectious laryngotracheitis virus, Marek's disease virus, Japanese B encephalitis virus, Porcine parvovirus, Transmissible gastroenteritis virus, Hogcholera virus와 교차반응(交叉反應)이 없는 특이항체(特異抗體)였으나 1종(種)은 Pseudorabies virus와 교차(交叉)하는 항체(抗體)였다. 이들 단(單)클론성 항체중 중화능력(中和能力)이 있는 2주(株)는 IBRV 항원단백(抗原蛋白)중 분자량 72K 또는 125K 달톤의 항원(抗原)에 대응하는 항체(抗體)였으며, 94K 달톤의 항원(抗原)에 대응하는 단(單)클론성 항체(抗體)는 중화력(中和力)이 인정되지 않았다. 한편 1종의 교차반응성(交叉反應性) 항체(抗體)는 분자량 100K 달톤의 IBRV 항원(抗原)과 40K의 Pseudorabies virus 항원(抗原)에 대응하는 항체(抗體)로 밝혀졌다. 생산된 항체(抗體)중 중화력(中和力)이 있고 IBRV 항원(抗原)의 72K 달톤 단백질(蛋白質)에 대응하는 7-C-2 항체(抗體)를 이용하여 야외분리주(野外分離株) IBRV의 항원(抗原) 동정(同定)이 가능(可能)하였다.

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뱀 (파충류) 골격근 소포체 칼슘유리 채널 (Ca-release Channel of the Sarcoplasmic Reticulum of the Snake (Reptile) Skeletal Muscle)

  • 남장현;석정호
    • 대한약리학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.57-66
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    • 1996
  • 파충류 골격근의 근소포체에서 칼슘유리 채널의 존재를 밝히고저 뱀 골격근에서 근소포체를 분리하여 SDS-PAGE 전기영동, RyR의 정제, $[^3H]ryanodine$ 결합실험 및 $^{45}Ca$ 유리 실험으로 아래와 같은 결과를 얻었다. 1) 뱀골격근 소포체도 단일 band의 high molecular weight 단백을 가지고 있고, 그 mobility는 포유류 골격근의 것과 유사했다. 2) RyR의 정제과정에서 얻어진 $[^3H]ryanodine$의 peak 결합 분획에서 high molecular weight의 단백분획이 발견되었다. 3) 뱀 골격근 SR vesicles에 대한 $[^3H]ryanodine$의 maximum binding site와 Kd값은 각각 6.36 pmole/mg protein과 17.62nM이었으며, $[^3H]ryanodine$의 특이성 결합은 칼슘과 AMP에 의해 유의성있게 증가되었고 (P<0.005), tetracaine에 의해 억제되지 않았으나 ruthenium red와 $MgCl_2$에 의해 일부만 억제되었다. 4) 근 소포체로부터 $^{45}Ca$ 유리는 낮은 농도의 칼슘 $(1{\sim}10{\mu}M)$과 AMP에 의해 증가되었고 (P<0.05), 고농도의 칼슘 $(300{\mu}M)$, tetracaine, ruthenium red 또는 $MgCl_2$에 의해 억제되었다 (P<0.05). 이상의 실험성적으로 파충류 (뱀)의 골격근에도 칼슘유리 채별이 있어 근 수축시 세포내 칼슘 농도 조절에 관여할 수 있을 것으로 여겨지며, 채널의 기능적 특징 일부가 포유류의 것과 유사한 것으로 사료된다.

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