The objective of this study was to determine comparative biochemical characteristics and RAPD (random amplified polymorphic DNA) profiles of 18 strains of Edwardsiella tarda isolated from cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus) and eel (Anguilla spp) that showed diseases between 1996 and 2010 in Korea. In terms of biochemical properties, they showed four patterns with differences in citrate degradation and production of H2S and indole. All strains were identified as E. tarda. Characteristics of isolates were not classified according to their host. As a result of PCR with E. tarda-specific primer, EDtT, the same band of about 270 bp was detected in all 18 isolates. However, no specific band was detected in type strains of E. tarda or Edwardsiella ictaluri. As a result of RAPD PCR performed with primer No. 5 and No. 6 of a Ready-To-Go-RAPD kit, the band profile showed clear differences among isolates of olive flounder, isolates of eel, and E. tarda and E. ictaluri type strains. It was possible to organize their characteristics according to the origin of host with possibility to develop tools for pathogen monitoring.
MIC test of 16 chemotherapeutic agents was performed on 24 isolates of Edwardsiella tarda collected from flounders. They revealed resistance against combinations of ampicillin, amoxicillin, erythromycin, flumequine, doxycycline(DOXY), nalidixic acid, novobiocin, oxolinic acid, oxytetracycline(OTC), thiamphenicol(TP) and sulfonamide. Two strains carried transferable R plasmid encoding Otc Kanamycin Tp and Otc chloramphenicol Doxy Tetracycline Tp, respectively. The R plasmids were not similar each other on the basis of their digestion pattern of restriction endonuclease, suggesting distribution of different transferable R plasmid among E. tarda from flounders.
Kim, Gi-Hong;Kwon, Se-Ryeon;Nam, Yun-Kwon;Lee, Eun-Hye;Kim, Min-Sun
Journal of fish pathology
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v.19
no.3
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pp.285-288
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2006
The respiratory burst activity of tilapia (Oreochromis mosambicus) phagocytes agaisnt Edwardsiella tarda ghosts produced by gene E mediated lysis was investigated. Stimulation with E. tarda ghosts (ETG) showed markedly higher respiratory burst activity than that with formalin killed E. tarda (FKC) in phagocytes. This result may suggest that ETG can induce effective cellular immune responses in fish.
Kim, Yeong-Dae;O, Myeong-Ju;Jeong, Tae-Seong;Jeong, Seong-Ju
Journal of fish pathology
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v.17
no.1
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pp.11-20
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2004
The present study compared purification methods of hen egg yolk immunoglobulin (IgY) from the hen immunized with Edwardsiella tarda. The purification of anti-E. tarda IgY was performed by four different methods, polyethylene glycol (PEG), chloroform polyethylene glycol (Chloroform-PEG), ammonium sulfate and purification kit. Purified IgY had heavy chain of 64 kDa and light chain of 27 kDa size. IgY purified from the hen immunized with E. tarda showed higher ELISA values and agglutination titers than those with IgY purified from the non-immunized hen as a negative control. In addition, purified IgY recognized similar E. tarda proteins to those with anti-E. tarda rabbit serum by western blotting. Purified IgY had an agglutination titer of 1:512 by PEG method and ammonium sulfate method, and 1:128 by chloroform-PEG method and purification kit. Moreover, PEG method was the most rapid method among the four different IgY purification methods. These results indicate that PEG method is effective purification method maintaining biological activity of the IgY.
The present study was performed to investigate an antibacterial activity of specific bacteriophage (phage) and Bacillus subtilis KM-1 (B. subtilis) mixture against Edwardsiella tarda (E. tarda). An appropriate number of phage showing the most effective antibacterial activity was $2{\times}10^5$ PFU/ml with $1{\times}10^7$ CFU/ml of B. subtilis 36 h post incubation. On the other hand, B. subtilis showed a dose dependant manner in inducing antibacterial activity in the presence of phage ($2{\times}10^5$ PFU/ml). The phage and B. subtilis mixture showed higher antibacterial activity against E. tarda than phage or B. subtilis only. These results suggest that the phage and B. subtilis mixture could be utilized as an alternative to antibiotics in the control of fish diseases caused by E. tarda.
Edwardsiella tarda, a gram (-) pathogen causing edwardsiellosis in farmed fish, was transformed via electroporation with a plasmid expression vector driving the PhiX174 E-lysis gene under the transcriptional control by lambda PR regulatory sequence. The persistent maintenance of the plasmid vector in recombinant E. tarda was found in numerous subculture procedures over up to 6 months without any adverse effect on the original copy number of plasmids. Comparative examination based on semi-quantitative RT-PCR analysis on transcriptional efficiency of E-lysis gene between recombinant E. coli and E. tarda indicated that promoter strength and induction capacity of bacterial ghosts would be retarded in E. tarda as compared to the E. coli. However, the completeness of induction for bacterial ghosts in E. tarda was the same with E. coli, in which at least 99.99% of induction rate was possible and further the viability of recombinant bacteria was completely eliminated by a post-induction procedure including washing and freeze drying lyophilization.
To obtain antimicrobial compounds against fish pathogenic bacteria from natural products, 80% methanolic extracts from 14 species of medicinal plant were screened for antimicrobial activity against fish pathogenic bacteria, Edwardsiella tarda and Vibrio anguillarum. Among them, Glycyrrhiza glabra, Rhus vemiciflua and Sanguisorba officinalis were effective for growth inhibition of Gram-negative bacteria, both E. tarda YSF and V. anguillarum YSR. Through the activity-guided isolation for R. verniciflua extract that exhibited the highest antimicrobial activity among three extracts, one antimicrobial compound (1) was isolated and identified as methyl-3,4,5-trihydroxybenzoate, or methyl gallate. This compound significantly inhibited the growth of tested strains of both E. tarda and V. anguillarum exhibiting MIC of 1 mg/ml for each strain.
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.26
no.6
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pp.1193-1200
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2014
Edwardsiella tarda, Streptococcus iniae and S. parauberis are main bacterial pathogens in aquaculture farms of olive flounder, Paralichthys olivaceus. We have discussed the efficacy and safety of 3 type-combined vaccines (A: S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 1mg, B: S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 0.5mg, C: S. iniae 1.5mg + S. parauberis 1.5mg + E. tarda 1mg) through intraperitoneal injections in olive flounder. None of the vaccines gave rise to any signigicant side effects on histopathology and blood chemistry. The antibody titers and lysozyme activities of A type were higher than those of B, C and control. Four weeks after vaccination, RPS (relative percent survival rates) was 62.5~75% (A type), 50~66.7% (B type) and 55.6~62.5% (C type) respectively. As the results, the combined vaccines are possible to prevent edwardsiellosis and streptococcosis, and A type : S. iniae 1mg + S. parauberis 1mg + E. tarda 1mg, is the most effective out of them.
Characteristics, pathogenicity and control of the causative organisms isolated front diseased cultured flounder, Paralichthys olivaceus were studied. The causative organisms were identified as E tarda by biochemical and biophysical characteristics. Also, it strains were named as E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1, and optimal pH of E tarda KBF-1 and E tarda KMF-1 were 8.0, and optimal concentration of NaCl. E tarda KBF-1 was 0% and E tarda KMF-1 was 1%. In the pathogenicity test, 0~10 of the flounders of artificially infected group(E tarda KBF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 60 hrs, but 0~9 flounders infected group with 41.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Also, 0~10 flounders infected group(E tarda KMF-1) with $1.0{\times}10^7$ cfu/fish were died within 36 hrs, while 0~7 flounders infected with $1.0{\times}10^6$ cfu/fish were died within 60 hrs. Drug sensitivity of E tarda KBF-1 strain was resistant to AM, CF and N, and intermediate to E, K and S, and sensitivity to C, G, SxT and FF. But E tarda KMF-1 strain was resistant to CF, E and V, and intermediate to AM, C, N and SxT, and sensitivity to GM and FF.
The purpose of this study is to explore the possibility of essential oils and flavonoids improving the performance of antibiotics, proving a higher efficacy in the presence of natural substances against Edwardsiella tarda and Streptococcus iniae. Increased efficacy was observed in several cases: both essential oils and flavonoids increased antibacterial efficacy of oxytetracycline and flumequine against E. tarda by 2-fold; essential oils and flavonoids increased antibacterial efficacy of nalidixic acid against E. tarda by 4-fold; flavonoids increased antibacterial efficacy of josamycin against S. iniae by 4-fold. The results obtained in this study suggest that essential oils and flavonoids might be especially useful in increasing the antimicrobial activity of nalidixic acid and josamycin against E. tarda and S. iniae in fish. Natural compounds examined in this study could also be useful to help decrease the overuse of antibiotics in fish.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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