• 한국수산과학회지
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• 제48권5호
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• pp.725-730
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• 2015

We observed yellow catfish Pelteobagrus fulvidraco fingerlings cultured in land ponds in Korea swimming in a corkscrew spiral pattern while hanging head-up and tail-down at the water surface, before eventually dying. Externally, these fish displayed “hole in the head” disease, pale gills, and hemorrhages in the base of the pectoral and caudal fins; internally they had liver hemorrhages and kidney discoloration. The bacterium Edwardsiella ictaluri (YCK-01 and YCL-01) was identified in the kidneys and livers of diseased fish via phenotypic characteristics and PCR analysis using the ictaluri-specific primers IVS (an intervening sequence) and IRS (the inter-ribosomal spacer). Infectivity challenges by intraperitoneal and immersion routes showed that a representative bacterial strain (YCK) exhibited strong virulence to yellow catfish, with an LD₅₀ of 3.2×10⁴ CFU/fish and 2.5×10⁶ CFU/mL, respectively. This is the first report of E. ictaluri infection in yellow catfish from Korea.

• 한국어병학회지
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• 제34권1호
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• pp.31-38
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• 2021

본 연구는 1996년부터 2010년 사이에 우리나라 양식넙치와 뱀장어에서 분리하여 Edwardsiella tarda로 동정하였던 18 균주에 대하여 생화학적 특성과 RAPD profile을 비교해봄으로써 이전 양식생물의 질병에 관여되었던 Edwardsiella속 세균의 다양성을 알아보고자 하였다. 생화학적 특성으로 볼 때 이들은 citrate 분해, H₂S 그리고 indole 생산 결과에 차이를 보여 4가지 패턴으로 구분되었으나 모두 E. tarda로 동정되었고 숙주에 따른 분리균의 특성으로 구분되지는 않았다. E. tarda 특이 primer인 EDtT로 PCR을 실시한 결과 18 분리균에서는 모두 약 270 bp의 동일한 band가 검출되었으나 비교 균주로 사용된 E. tarda와 E. ictaluri의 type strain에서는 특이 밴드가 검출되지 않았다. 또한 Ready-To-Go-RAPD kit의 primer 5번과 6번으로 실시한 RAPD PCR 결과, 넙치 분리균, 뱀장어 분리균, 그리고 E. tarda와 E. ictaluri type strain에서 band profile이 뚜렷한 차이를 보여 origin에 따른 특징으로 정리될 수 있었으며 병원체 모니터링을 위한 tool의 하나로 개발될 가능성을 보였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제33권2호
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• pp.167-179
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• 2023

The rifampicin-resistant strain E9-302 of Edwardsiella ictaluri strain 669 (WT) was generated by continuous passage on BHI agar plates containing increasing concentrations of rifampicin. E9-302 was attenuated significantly by 119 times to zebrafish Danio rerio compared to WT in terms of the 50% lethal dose (LD₅₀). Zebrafish vaccinated with E9-302 via intraperitoneal (IP) injection at a dose of 1 × 10³ CFU/fish had relative percentage survival (RPS) rates of 85.7% when challenged with wild-type E. ictaluri via IP 14 days post-vaccination (dpv). After 14 days of primary vaccination with E9-302 via immersion (IM) at a dose of 4 × 10⁷ CFU/ml, a booster IM vaccination with E9-302 at a dose of 2 × 10⁷ CFU/ml exhibited 65.2% RPS against challenge with wild-type E. ictaluri via IP 7 days later. These results indicated that the rifampicin-resistant attenuated strain E9-302 had potential as a live vaccine against E. ictaluri infection. A previously unreported amino acid site change at position 142 of the RNA polymerase (RNAP) β subunit encoded by the gene rpoB associated with rifampicin resistance was identified. Analysis of the whole-genome sequencing results revealed multiple missense mutations in the virulence-related genes esrB and sspH2 in E9-302 compared with WT, and a 189 bp mismatch in one gene, whose coding product was highly homologous to glycosyltransferase family 39 protein. This study preliminarily explored the molecular mechanism underlying the virulence attenuation of rifampicin-resistant strain E9-302 and provided a new target for the subsequent study of the pathogenic mechanism of E. ictaluri.

• 한국어병학회지
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• 제33권2호
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• pp.111-118
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• 2020

우리나라 내수면 양식 어류로부터 Edwardsiella 속 세균 7개 균주를 분리하여 이들의 생화학적 특성 및 유전학적 특성을 조사하였다. 그 결과, 기존의 어류 병원성 세균으로 알려진 E. tarda 와 E. ictaluri 뿐 아니라, 최근 새로운 종으로 보고된 E. anguillarum과 E. piscicida를 성공적으로 분리 및 동정하여 우리나라 내수면 양식 어류에서 Edwardsiella 속의 다양한 종이 분리되는 것을 확인하였다. 뱀장어류에서 분리된 4개 균주는 E. anguillarum, E. piscicida 및 E. tarda로, 메기와 동자개로부터 분리된 2개 균주는 E. ictaluri로, 버들치로부터 분리된 1개 균주는 E. piscicida로 동정되었다. 또한, 이들의 생화학적 특성의 조사 결과, 이들은 대부분 E. anguillarum, E. ictaluri, E. piscicida 및 E. tarda의 각 종에 해당하는 전형적인 생화학적 특성을 나타내었으며, 유전자를 이용한 분자계통발생학적 분석 결과와도 일치하였다. 특히, 16S rRNA 및 gyrB 유전자를 이용하여 Edwardsiella 속 종의 명확한 분류가 가능함을 확인함으로써, Edwardsiella 속 세균의 분류학적 동정을 위한 마커로써의 가능성을 제시하였다. 본 연구의 결과, 우리나라 내수면 양식 어류로부터 다양한 Edwardsiella 속 종들이 분리되는 것을 확인하였으며, 이들 종들에 대한 체계적인 모니터링 및 숙주에 따른 병원성의 차이에 관한 연구가 필요함을 제안한다.

• 한국어병학회지
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• 제7권2호
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• pp.105-112
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• 1994

1993년 전북도 관내에서 순환여과식으로 사육중인 한국산 메기에 세균성 질병이 발생하여, 이 질병에 의한 폐사율이 4개월 동안에 30%에 달하였다. 병어는 양어지의 가장자리에서 두부를 위로 한채 힘없이 물표면을 헤엄치거나 때로는 회전 발광유영을 하는 개체가 많았다. 외견상 특정적인 증상은 두부와 가슴지느러미의 기부에 궤양 병소가 형성되거나 아랫턱 주변의 출혈을 주증상으로 하고 있었다. 병어의 뇌, 신장, 비장 및 간장으로부터 원인균을 분리하여 생화학적 특성과 생물학적 특성을 조사한 바, Edwardsiella ictaluri로 동정되었다. 분리균을 한국산 메기, 차넬메기 및 잉어에 복강주사하여 병원성을 조사한 결과 한국산 메기와 차넬메기에는 병원성이 있었지만, 잉어에 대한 병원성은 없었다.

• 한국어병학회지
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• 제9권1호
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• pp.79-85
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• 1996

$\beta$-glucan의 투여가 세균감염증에 대한 저항성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 복강주사 또는 침지에 의해 한국산 메기(Silurus asotus)에 투여하였다. 투여 농도는 어체중 100 g 당 200, 500, $1000{\mu}g$을 1회 또는 3일 간격으로 2회 복강주사하거나, $100{\mu}g$/ml의 $\beta$-glucan 부유액에 30분 또는 1시간 침지시켰다. $\beta$-glucan 투여 3일후에 Edwardsiella ictaluri와 Aeromonas hydrophila의 생균액($2{\times}106$ CFU/0.1 ml)을 복강주사한 다음 10일간 사육하면서 생존율을 조사하였다. 복강주사와 침지에 의한 투여결과 복장투여만이 생잔율을 높일 수 있었으며, 투여 농도에 있어 어체중 100 g당 $200\sim1000{\mu}g$의 범위에 있어서는 농도간에 차이가 없었다. 또한 투여회수는 1회 투여보다는 3일간격으로 2회 투여가 효과적이었으며, E. ictaluri보다는 A. hydrophila에 대한 저항성이 높은 것으로 나타나, 한국산 메기에 $\beta$-glucan을 복강투여함으로서 세균감염증의 초기단계에 있어 생잔율을 높일 수 있었다.

• 한국어업기술학회:학술대회논문집
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• 한국어업기술학회 1996년도 수산관련공동학술대회발표요지집
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• pp.155-160
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• 1996

• 한국어병학회지
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• 제7권2호
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• pp.113-117
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• 1994

어병 세균에 대해 쑥(Artemisia princeps var. orientalis) 추출물인 정유의 항균성을 조사하였다. Aeromonas hydrophila, Aeromonas salmonicida, Aeromonas sorbia, Edwardsiella tarda 와 Streptococcus sp. (yellowtail)는 1,000~2,000 ppm 에서 증식이 억제되었다. 즉 억제 농도는 A.salmonicida 가 1,000 ppm A.hydrophila, A. sorbia, E. tarda 와 Streptococcus sp. (yellowtail)는 1,500 ppm 이었다. 그러나 Vibrio anguillarum, Vibrio ordalii, Edwardsiella ictaluri와 Streptococcus sp. (SF-1)는 100~2,000 ppm 농도에서 현저한 억제 효과는 없었다.

• 한국어병학회지
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• 제10권2호
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• pp.75-86
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• 1997

어류의 감염 조직으로부터 edwardsiellosis의 원인균인 Edwardsiella tarda를 whole cell 자체로 직접 검출할 수 있는 solid phase ELISA법을 연구하였다. A. hydrophila ATCC7966, V. anguillarum HUFP5001, Y. ruckeri 11-4, E. ictaluri 및 Streptococcus sp. NG8206 등의 어병세균에 대해 ELISA법으로 실시한 교차반응 분석에서 A. hydrophila ATCC7966 균주와 V. anguillarum HUFP5001 균주가 E. tarda Edk-2에 대한 토끼 항혈청에 대해 높은 교차반응을 나타내었으나, 항혈청을 A. hydrophila ATCC7966 FKC로 흡착시킴으로써 교차반응을 제거할 수가 있었다. 그러나, 응집항체가 측정 결과와는 달리, ELISA 분석에서는 E. tarda 분리 균주간의 교차반응이 매우 높은 것으로 나타났다. Tissue homogenate내에 있는 항원을 검출함에 있어, 조직내의 지질이나 단백질 성분이 함께 분석용 plate에 coating되어 감도가 훨씬 감소하므로 ELISA법의 적용을 위해서는 감염 조직의 homogenate를 PBS에 100배 이상 희석한 후 진단을 실시해야 하는 것으로 나타났다. Tissue homogenate내에 있는 생균을 항원으로 하여 직접 검출할 때에는 검출한계가 $1{\times}10^3$ cells/ml로 나타나 FKC 항원의 사용에 비하여 더 증가된 감도를 보여주었다. 결론적으로 본 ELISA법은 양식장에서 발생한 edwardsiellosis를 진단함에 있어서 특이적이고 신속하며 민감한 방법으로 확인되었다.