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어류의 장기조직에 분포하는 단백질분해효소에 관한 연구 2. 고등어 유문수조직중에 분포하는 3종 알칼리성 단백질분해효소의 특성 (The Proteinase Distributed in the Intestinal Organs of Fish 2. Characterization of the Three Alkaline Proteinases from the Pyloric Caeca of Mackerel, Scomber japonicus)

  • 김형낙;변재형
    • 한국수산과학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.547-557
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    • 1986
  • 전보(Pyeun and Kim, 1986)에서와 같이 고등어 유문수조직에서 정제한 3종의 알칼리성단백질분해효소에 대하여 활성최적조건, 열안정성. 기질친화도, 화학약제에 대한 영향 및 분자량 등을 규명하였다. 각 정제효소의 반응최적조건을 기질별로 검토한 결과, casein에 대하여 Enz. A는 pH 9.4, Enz. B와 Enz. C는 pH 9.8이었으며, Hb에 대하여 Enz. A는 pH 9.2, Enz. B는 pH 10.2, 그리고 Enz. C는 pH 9.8이었고, 최적반응온도는 공히 $45^{\circ}C$였다. 효소농도 $2{\mu}g/ml,\;2\%$ casein 기질의 반응조건에서 반응시간(x)에 대한 활성도 (y)의 관계를 분석한 결과, Enz. A는 60분. Enz. B는 40분, 그리고 Enz. C는 50분까지 1차 반응의 관계가 성립하였으며, 이때의 반응속도식은 Enz. A는 y=3.6x, Enz. B는 Y=6.0x, 그리고 Enz. C는 y=4.2x였다. 열안정성을 검토하기 위하여 $50^{\circ}C$에서 5분간 가열했을때, Enz, A는 $90\%$, Enz. B는 $33\%$, 그리고 Enz. C는 $37\%$가 각각 불활성화하였다. Lineweaver-Burk의 도식에 의한 효소의 기질친화도를 측정한 결과, casein기질에 대하여 Enz. A는 Km이 $5.0{\times}10^{-3}\%$, Enz. B는 Km이 $1.0{\times}10^{-3}\%$, 그리고 Enz. C는 Km이 $3.6{\times}10^{-3}\%$였다. 금속 ion에 의한 영향을 검토한 결과, $Ag^+,\;Hg^{2+}$는 효소활성을 저하시켰으나, $Mn^{2+},\;Sn^{2+}$$Pb^{2+}$ 이온은 활성을 증가시켰다. Enz. B와 Enz. C는 soybean trypsin inhibitor에 의해 상당히 저해되었다. 따라서 효소 B와 C는 serine 계 단백질분해효소로 판단되었다. SDS-PAG 전기영동과 Sephadex G-100 겔 여과법에 의하여 각 정제효소의 분자량을 측정한 결과, Enz. A는 $27,500{\pm}2.500$, Enz. B는 $20,500{\pm}1,500$, 그리고 Enz. C는 $15,250{\pm}250$이었다.

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Catalytic Importance of the C-Terminal Region of a Fibrinolytic Enzyme from Lumbricus rubellus

  • Kim, Yu-Sam;Kim, Jeong-Eun;Byun, Hye-Sin;Chang, Chung-Soon;Suh, Jung-Jin
    • BMB Reports
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    • 제28권5호
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    • pp.398-401
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    • 1995
  • Two fibrinolytic enzymes from the autolysate of Lumbricus rubellus were purified in homogeneous form. Their molecular sizes were 31,000 (Enz1) and 35,000 (Enz2) Da. respectively. However, the N-Terminal amino acid sequences of Enz1 and Enz2 were exactly the same: Ile-Val-Gly-Gly-Ile-Glu-Ala-Arg-Pro-Tyr-Glu-Phe-Pro-Trp-Gln-. These results indicate that Enz1 is a shortened form of Enz2 formed during autolysis. When a synthetic substrate, Ile-Pro-Arg-pNA, was used, the catalytic activity were observed in the pH range of 5-10 and the kinetic parameters including $K_m$ (1.6 ${\mu}m$) and $V_{max}$ (40 nmol/jmin/mg) were almost identical between the two enzymes. However, the fibrinolytic activity of Enz2 was at least 1.25 times higher than that of Enz1, suggesting that the C-terminal region of Enz2 is important in fibrinolysis but not in amidolysis. Furtheimore. fibrinolytic activity of the enzymes was increased by the addition of the lipid extracted from L. rubellus in the presence of $MgCl_2$ or $CaCl_2$. The stimulatary effect of lipid on Enz2 was higher compared to Enz1.

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개선된 효소소화법에 의한 고미로부터 쌀전분의 생산 및 특성 (Production and characterization of rice starch from stale rice using improved enzymatic digestion method)

  • 김이재;임송이;김현석
    • 한국식품과학회지
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    • 제53권6호
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    • pp.749-755
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    • 2021
  • 정미와 쇄미로부터 상업적 기준에 부합하는 쌀전분을 생산하는 효소소화법을 오래 묵은 쌀(고미)에 적용 가능한지를 조사하였다. 선행된 연구에서 다층 여과법을 채택한 효소소화법은 고미로부터 높은 조단백질 함량(3.6-4.1%)의 쌀전분이 배출되어 상업적으로 활용이 가능한 쌀전분을 생산할 수 없었다. 그래서 기존 효소소화법의 다층 여과법 대신에 효소반응 고미 침전물 상층부의 부드러운 층(쌀단백 잔류물, tailed 전분과 섬유소 등)을 흡입하여 제거하는 방식을 채택하여 개선된 효소소화법(iENZ, improved enzymatic digestion method)을 구축하였다. iENZ에 따른 고미전분의 조단백질 함량은 0.5-0.7%로, 알칼리침지법(AKL, akaline steeping method)에 따른 고미전분의 것과 유사하였으며 상업적인 생전분의 조단백질 함량 기준(<1%)을 충족하였다. 한편 iENZ에 따른 고미전분을 상업적인 쌀전분으로 활용할 수 있는지를 조사하기 위해 AKL과 iENZ에 따른 고미전분의 물리화학적 특성을 조사하였다. 고미전분들의 아밀로스 함량은 본 연구에 사용된 고미가 멥쌀로부터 유래되었다는 것을 가리킨다. AKL보다 iENZ에 따른 고미전분의 아밀로스 함량이 전반적으로 낮았는데, 이는 쌀이 오래 저장되면서 형성된 유리아미노산과 쌀전분의 아밀로스사이의 아밀로스-지질 복합체의 형성 때문이다. AKL과 iENZ에 의한 고미전분들은 전형적인 A형 결정 패턴을 보였으며, 추출정제법에 따른 X선 회절 패턴과 상대결정도의 차이는 관찰되지 않았다. iENZ에 따른 고미전분은 AKL에 의한 것보다 좁은 호화온도범위를 보이면서 높은 호화온도와 낮은 호화엔탈피를 나타내었다. 이것은 iENZ에 따라 고미로부터 쌀전분을 추출·정제하는 동안 고미전분 내에서 annealing이 일어났기 때문이다. iENZ에 의해 발생한 annealing은 고미전분의 팽윤력과 용해도를 낮췄으며, 페이스팅 점도 발달을 지연시키면서도 높은 수준의 페이스팅 점도를 형성하였다. 전반적으로 iENZ는 고미뿐만 아니라 정미와 쇄미에서도 고순도의 쌀전분을 생산할 수 있는 방법이었으며, 고미는 쌀전분 원료로 사용 가능하였다. iENZ는 쌀전분의 추출과 동시에 쌀전분을 물리적으로 변형하는 방법으로 생각되며, 이 방법에 따라 제조된 쌀전분은 쌀전분의 물리화학적 특성의 다양성을 확대할 수 있을 것으로 생각된다.

A Novel Epsilon Near Zero Tunneling Circuit Using Double-Ridge Rectangular Waveguide

  • Kim, Byung-Mun;Son, Hyeok-Woo;Hong, Jae-Pyo;Cho, Young-Ki
    • Journal of electromagnetic engineering and science
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    • 제14권1호
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    • pp.36-42
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    • 2014
  • In this paper, an epsilon near zero (ENZ) tunneling circuit using a double-ridge rectangular waveguide (RWG) is proposed for the miniaturization of a waveguide component. The proposed ENZ channel and is located in the middle of the input-output RWG (IORWG). The ratio of the height to the width of the channel waveguide is very small compared to the IORWG. By properly adjusting the ridge dimensions, the tunneling frequency of the proposed ENZ channel can be lowered to near the cut-off frequency of the IORWG. For the proposed ENZ tunneling circuit, the approach adopted for extracting the effective permittivity, effective permeability;normalized effective wave impedance, and propagation constant from the simulated scattering parameters was explained. The extracted parameters verified that the proposed channel is an ENZ channel and electromagnetic energy is tunneling through the channel. Simulation and measurement results of the fabricated ENZ channel structure agreed.

Preparation and Characterization of Cellulose Nanofibrils from Lignocellulose Using a Deep Eutectic Solvent Followed by Enzymatic Treatment

  • Eun-Ah ,LEE;Song-Yi, HAN;Gu-Joong, KWON;Jeong-Ki, KIM;Rajkumar, BANDI;Ramakrishna, DADIGALA;Ji-Soo, PARK;Chan-Woo, PARK;Seung-Hwan, LEE
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제50권6호
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    • pp.436-447
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    • 2022
  • Lignocellulose nanofibrils (LCNFs) were prepared using a two-step deep eutectic solvent (DES) and enzymatic pretreatment followed by mechanical defibrillation, and we examined the effects of enzymatic pretreatment conditions on different characteristics of the LCNFs thus obtained. The LCNFs yielded using the two-step DES pretreatment (Enz-LCNF) exhibited a well-defibrillated entangled web-like structure with an average fiber diameter ranging from 15.7 to 20.4 nm. Furthermore, we found that the average diameter and filtration time of the Enz-LCNFs decreased with an increase in enzyme concentration and enzymatic treatment time, whereas we detected a concomitant reduction in the tensile strength of the Enz-LCNF sheets. The Enz-LCNFs were characterized by a typical cellulose I structure, thereby indicating that the enzymatic treatment causes very little damage to the crystalline form.

Metamaterial ENZ 터널이 포함된 평행 평판 도파관 내 전자기파의 전파 특성에 관한 연구 (Study on the Electromagnetic Wave Propagation In the Parallel-Plate Waveguide with the Metamaterial ENZ Tunnel Embedded)

  • 강승택
    • 한국전자파학회논문지
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    • 제20권2호
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    • pp.135-140
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    • 2009
  • 본 논문에서는 초고주파 수동 부품의 전송 구조 내부에 전자기파의 차단 현상을 유발하는 불연속이 존재할 때 metamaterial을 이용하여 전파 특성에 변화를 유도할 수 있는 방법을 논의하고 원리를 규명한다. 특히 평행 평판 도파관 내부에 전파가 되지 않을 정도로 협소한 단면을 가진 영역의 매질이 ENZ(Epsilon Near Zero)의 metamaterial로 바뀔 때 전자기파가 진행되는, 이른바 터널링(tunneling) 조건(혹은 관통 효과)을 찾고 전자기학적 관점과 회로 관점으로 설명할 것이다. 전송선 이론에 불연속 구조는 물론 매질 변화를 고려한 평행 평판 도파관의 해석 결과를 다른 기법의 결과와 비교하여 타당성을 보이고, 이에 바탕을 두어 관통 효과 특성을 산란계수와 임피던스로 도시한다.

쇄미로부터 알칼리침지법과 효소소화법을 이용한 쌀전분의 생산 및 특성 (Production and characterization of rice starch from broken rice using alkaline steeping and enzymatic digestion methods)

  • 김이재;임송이;김현석
    • 한국식품과학회지
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    • 제53권6호
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    • pp.731-738
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    • 2021
  • 쌀전분 생산 원료로서 쇄미의 활용 가능성을 조사하기 위해 예산, 김포, 평택 지역의 미곡종합처리장들에서 얻은 대쇄미를 알칼리침지법과 효소소화법을 이용하여 쌀전분을 제조하고, 이들의 물리화학적 특성을 조사하였다. 쇄미의 조단백질 함량은 김포>평택>예산의 순서로 증가하였지만, 국내 주요 11품종 쌀의 조단백질 함량 범위를 초과하거나 미달하였다. 쇄미가루의 총 전분함량은 지역별 차이는 크지 않았으며, 정미의 총 전분 함량 범위내에 있어 쌀전분 생산 원료로 사용할 수 있다. 지역별 쇄미가루로부터 알칼리침지법과 효소소화법에 따라 제조된 쇄미전분의 조단백질 함량은 1% 내외로 상업적 생전분으로 활용이 가능 수준이었다. 아밀로스 함량은 지역별로 소폭 차이가 존재하였지만, 제조방법에 따른 유의적 차이는 관찰되지 않았다. 쇄미전분들의 형태학적 특성은 일반적인 쌀전분과 다르지 않았으며, 제조방법에 따른 구조적 변형은 관찰되지 않았다. X선 회절패턴은 모든 쇄미전분들에서 전형적인 A형 결정 배열을 나타내었으며, 제조방법에 따른 결정구조의 변형은 관찰되지 않았지만 상대결정도에 있어 차이가 존재하였다. 호화특성에 있어 알칼리침지법보다 효소소화법에 의한 쇄미전분들이 높은 호화개시온도 및 호화최고 온도와 좁은 호화온도범위를 나타내었다. 관찰된 상대결정도와 호화온도의 차이는 annealing이 효소소화법에 따른 쇄미전분에서 발생하였다는 것을 가리킨다. 팽윤력과 용해도는 알칼리침지법보다 효소소화법에 따른 쇄미전분에서 일반적으로 낮은 수준을 나타내었다. 페이스팅 점도 특성에 있어 알칼리침지법보다 효소소화법에 의한 쇄미전분은 페이스팅 점도의 발달이 지연되었으며, 높은 최고점도와 최저점도를, 낮은 붕괴점도, 최종점도와 치반점도를 나타내었다. 이와 같은 팽윤력, 용해도 및 페이스팅 점도의 차이는 효소소화법에 의한 쇄미전분들의 annealing 때문이다. 전체적인 결과를 종합하면, 쇄미는 쌀전분의 원료로 사용할 수 있으며, 효소소화법은 알칼리침지법에 따른 쌀전분의 팽윤력, 용해도, 호화특성 및 페이스팅 점도 특성과는 다른 쌀전분을 제조할 수 있을 것이다. 게다가 쌀전분의 높은 가격이 비싼 원료쌀과 높은 생산비용 때문임을 고려할 때, 쌀전분 원료로 쇄미의 사용에 따른 쌀전분 생산원가의 절감은 판매가격을 낮춰 쌀전분의 식품 및 비식품 산업적 활용도를 높일 수 있을 것이다.

Effects of particle size of processed barley grain, enzyme addition and microwave treatment on in vitro disappearance and gas production for feedlot cattle

  • Tagawa, Shin-ichi;Holtshausen, Lucia;McAllister, Tim A;Yang, Wen Zhu;Beauchemin, Karen Ann
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제30권4호
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    • pp.479-485
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    • 2017
  • Objective: The effects of particle size of processed barley grain, enzyme addition and microwave treatment on in vitro dry matter (DM) disappearance (DMD), gas production and fermentation pH were investigated for feedlot cattle. Methods: Rumen fluid from four fistulated feedlot cattle fed a diet of 860 dry-rolled barley grain, 90 maize silage and 50 supplement g/kg DM was used as inoculum in 3 batch culture in vitro studies. In Experiment 1, dry-rolled barley and barley ground through a 1-, 2-, or 4-mm screen were used to obtain four substrates differing in particle size. In Experiment 2, cellulase enzyme (ENZ) from Acremonium cellulolyticus Y-94 was added to dry-rolled and ground barley (2-mm) at 0, 0.1, 0.5, 1, and 2 mg/g, while Experiment 3 examined the interactions between microwaving (0, 30, and 60 s microwaving) and ENZ addition (0, 1, and 2 mg/g) using dry-rolled barley and 2-mm ground barley. Results: In Experiment 1, decreasing particle size increased DMD and gas production, and decreased fermentation pH (p<0.01). The DMD (g/kg DM) of the dry-rolled barley after 24 h incubation was considerably lower (p<0.05) than that of the ground barley (119.1 dry-rolled barley versus 284.8 for 4-mm, 341.7 for 2-mm; and 358.6 for 1-mm). In Experiment 2, addition of ENZ to dry-rolled barley increased DMD (p<0.01) and tended to increase (p = 0.09) gas production and decreased (p<0.01) fermentation pH, but these variables were not affected by ENZ addition to ground barley. In Experiment 3, there were no interactions between microwaving and ENZ addition after microwaving for any of the variables. Microwaving had minimal effects (except decreased fermentation pH), but consistent with Experiment 2, ENZ addition increased (p<0.01) DMD and gas production, and decreased (p<0.05) fermentation pH of dry-rolled barley, but not ground barley. Conclusion: We conclude that cellulase enzymes can be used to increase the rumen disappearance of barley grain when it is coarsely processed as in the case of dry-rolled barley. However, microwaving of barley grain offered no further improvements in ruminal fermentation of barley grain.

어류의 장기조직에 분포하는 단백질분해효소에 관한 연구 1. 고등어 유문수조직으로부터 3종의 알칼리성 단백질분해효소의 분리${\cdot}$정제 (The Proteinase Distributed in the Intestinal Organs of Fish 1. Purification of the Three Alkaline Proteinases from the Pyloric Caeca of Mackerel, Scomber japonicus)

  • 변재형;김형낙
    • 한국수산과학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.537-546
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    • 1986
  • 고등어 유문수조직중에 분포하는 알칼리성단백질분해효소의 정제조건을 검토하고 염석, DEAE-Sephadex A-50 칼럼 크로마토그래피 및 Sephadex G-100 겔 여과에 의해 3종류의 알칼리성단백질분해효소의 분리${\cdot}$정제방법을 확립하였다. 유문수조직중에 분포하는 알칼리성단백질분해효소의 추출용매는 $1\%$ NaCl 용액이 가장 효과적이었다. 정제된 가칭 Enz, A, B 및 C의 각 알칼리성단백질분해효소는 전기영동적으로 균질함이 증명되었으며, 조효소에 비해 고유활성이 Enz. A는 34배, B는 53배 그리고 C는 37배로 각각 증가하였다. 각 효소의 수율은 조효소에 대해 $1.6\%,\;2.1\%$$1.5\%$였고, 총수율은 $5.2\%$였다.

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탄수화물 분해 복합효소제와 미생물 파이테이즈의 첨가가 육성돈의 생산성 및 영양소 소화율에 미치는 영향 (Effects of Dietary Carbohydrase Enzyme Complex and Microbial Phytase Supplementation on Productivity and Nutrient Digestibility in Growing Pigs)

  • 심영호;채병조;이지훈
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제45권4호
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    • pp.569-576
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    • 2003
  • 본 연구는 영양소 수준을 낮춘 옥수수-대두박 기초 사료내 $\alpha$-galactosidase와 galactomannanase를 함유한 탄수화물 분해 복합효소제 (ENDO- POWER$^{\circledR}$)와 미생물 파이테이즈 (Natuphos$^{\circledR}$) 의 개별첨가 혹은 동시첨가가 육성돈의 생산성, 영양소 소화율 및 체중 증체 당 사료비에 어떠한 영향을 미치는 가를 평가하고자 실시 되었다. 개시 체중 29.1$\pm$0.14 kg의 육성돈 48두를 공시하여 28일간 사양시험을 실시하였다. 시험설계는 4처리를 두었으며, 처리당 3반복 반복당 4두의 육성돈이 완전임의 배치 되었다. 시험 처리는 1) CON (대조구), 2) LP+NTPS (대조구 사료에서 유효인 함량을 0.15% 단위 낮춘 사료에 미생물 파이테이즈 (Natuphos$^{\circledR}$) 0.1% 첨가 (500 FTU/kg 사료), 3) LEL+ENP (대조구 사료에서 대사에너지와 라이신 함량을 대조구 사료 대비 각각 3% 낮춘 사료에 탄수화물 복합효소제 (ENDP-POWER$^{\circledR}$) 첨가) 및 4) LPEL+ENZ (대조구 사료에서 대사에너지와 라이신 함량을 대조구 사료 대비 각각 3% 낮추고 유효인 함량을 0.15% 단위 낮춘 사료에 미생물 파이테이즈 0.1%와 탄수화물 복합효소제 0.1%를 각각 첨가)를 두었다. 전체 사양시험 기간동안 (28일), 일당 증체량 (ADG), 일당사료섭취량 (ADFI) 및 사료요구량 (Feed/gain)은 사료처리구에 따라 유의적인 차이를 나타내지 않았다(P>0.05). 그러나 저 영양소 수준 사료에 파이테이즈와 탄수화물 복합효소제의 개별적 혹은 동시 첨가는, 대조구에 비해, 시험 전기간에 걸쳐 사료효율을 다소 개선 시키는 경향을 보여주었다. 건물, 조단백질 및 칼슘 소화율에 있어서는 처리구간에 유의적인 차이를 보이지 않았으나, 총 에너지 소화율에 있어서는 LEL+ENP 처리구와 비교해 볼 때, LP+NTPS와 LPEL+ENZ 처리구가 유의적으로 높게 평가되었다 (p<0.05). 건물 배설량은 LPEL+ENZ 처리구가 가장 낮았으며, 칼슘과 인 배설량은 LP+NTPS구가 가장 낮았다(p<0.05). 사양시험 기간동안 소요된 전체 사료비용은 대조구와 비교하여 볼 때, 효소제 첨가 시 낮았으며, 특히 1 kg 증체 하는데 필요한 사료비용은 대조구와 비교하여 LP+NTPS, LEL+ENP, LPEL+ENZ가 각각 3.5% (609.1 vs. 588.3 원/kg), 13.8% (609.1 vs. 535.3원/kg), 12.4% (609.1 vs. 541.9 원/kg) 낮은 것으로 조사되었다. 결론적으로, 본 실험 결과는 옥수수-대두박 위주 육성돈 사료에 유효인, 에너지 및 라이신 함량을 낮추고 파이테이즈와 탄수화물 분해 복합 효소제를 첨가 시 육성돈의 성장에는 유해한 영향 없이 영양소 배설량을 감소 시킬 수 있으며, 또한 양돈 생산비를 감소 시킬 수 있는 가능성을 제시했다고 판단된다.