• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제25권2호
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• pp.141-148
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• 1987

실험적으로 폐홉춘을 감염시킨 백서의 혈청내 항원을 ELISA 법으로 측정하였다. 시험용 혈청은 폐흡충의 피낭유충을 마리당 25개씩 먹인 총 22마리의 백서에서 감염후 12주가 될 때까지 채혈하여 얻었다. 폐흡충에 대한 특이항체는 폐흡충 감염 고양이의 혈청으로부터 ammonium sulfate 침전과 anionezchange chromatography를 이용, IgG를 분리한 후 affinity chromatography를 이용하여 순수분리하였다. 항원을 찾기 위한 ELISA는 소위 "double antibody sandwich method"를 사용하였다. 대조로서 사용한 감염전 혈청의 O.D.치 평균값은 0.04(표준편차 0.04)이었으며 감염후 O.D.치 (표준편차)의 변화를 보면 0.5주(3일)는 0.03(0.01), 1주는 0.55(0.50), 1.5주는 0.69(0.45), 2주는 0.20(0.19), 2.5주는 0.13(0.10)이었고 감염 3주 이후는 대조 혈청의 값으로 떨어졌다. 대조혈청의 $평균간+3{\times}$ 표준편차, 즉 0.16이하를 이 system에서의 비특이적 수치로 잡았을 때 이 이상의 수치를 나타낸 경우는 감염 후 1주부터 2.5주까지의 혈청에서만 관찰되었다. 한편 감염 12주 후에 총 10마리의 백서를 희생시켜 유충을 회수하여 보았다. 폐와 흉강에서는 평균 2.2마리, 근육에서는 평균 6.2마리의 유충을 회수할 수 있었다. 폐흡충 감염 백서에 있어 충체가 생산하는 항원은 감염 1주 후부터 혈청 내에서 검출되었다. 그러나 감염 3주후부터는 검출되지 않았는데 이것은 항원-항체 복합체 형성에 의한 반응 저해 현상에 의한 것으로 생각되었다.

• 농촌의학ㆍ지역보건
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• 제13권1호
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• pp.41-59
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• 1988

우리나라에서 문제가 되고 있는 몇몇 기생충질환을 대상으로 각종의 혈청학적 진단법을 적용시켜 진단적 가치 및 의의에 대하여 검토하였다. 연구대상 기생충은 간흡충, 낭미충, Capillaria hepatica이었으며, 주로 간접 형광항체반응, ELISA, western blot등의 기법을 적용시켜 보았다. 결과를 요약하면 다음과 같다. 1) 간흡충증에 있어서 ELISA는 83.3%의 민감도를 나타낸 반면 폐흡층 및 조충과의 교차반응이 인정되었다. ELISA는 간접혈구응집반응, 간접형광항체 반응에 비해 우수한 성적을 보이고 있었다. 앞서 기술한 교차반응을 구별하고 항원-항체반응의 특이항원대를 알아보기 위해 실시한 western blot의 결과 59Kd band와 21K의 band는 간흡충감염자 혈청이외에는 반응하지 않아 종특이성이 있는 것으로 판단되었다. Praziquantel로 치료한 다음 18개월 후에 혈청 및 뇨를 이용하여 ELISA로 검사한 결과 OD치는 치료전의 약 1/2수준으로 감소하였고, 음전률은 60%에 이르렀다. 간접혈구응집반응을 이용할 경우 치료 18개월 후 80%가 음전되었다. 2) 낭미충증 진단에 있어서 간접형광항체반응은 95.8%(23/24) 민감도를 나타내었으며 내막에서 가장 강한 반응을 나타내었다. ELISA 역시 90.0%(36/40)의 높은 민감도를 나타내었으나 두 방법 모두에서 다른 기생충감염자 혈청과의 교차반응이 인정되었다. Western blot 에서 볼때 91, 63, 21Kd의 band가 종특이한 것으로 나타났으며, 이중 63Kd의 항원대가 일관성 있게 낭미충 감염 혈청과 반응하였다. 3) Capillaria hepatica 충란을 이용한 난주위침강반응 및 간접형광항체법에서 85.0%의 민감도를 나타내었으며, 초록색의 특이한 형광이 점막전주위 및 충란절단면의 내막에서 관찰되었다. 수용성충란항원을 이용한 ELISA에 있어서도 85.0%의 민감도를 나타내었다. 항체가 감염후 3~5주부터 급격히 상승하기 시작하여 9주부터 점차 감소되어 감염후 13주에는 음성으로 전환되었다.

• 한국축산식품학회지
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• 제23권2호
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• pp.161-167
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• 2003

사람들에게 계란과 관련하여 일어나는 S. enteritidis(SE)와 S. typhimurium(ST)의 전파를 줄이기 위해서 감염된 상업적인 산란계군을 찾는 것은 매우 중요한 일이다. 그러므로 본 연구는 국내 산란계군에서 생산되는 계란의 주된 식중독균인 SE와 ST의 청정화 관리를 위한 기초 연구로서 SE와 ST에 대한 산란계군의 감염 여부를 파악하기 위해 시중에 유통하는 계란의 난황에 존재하는 SE와 ST에 대한 특이 항체를 ELISA방법으로 조사하였다. 시중에 유통되는 3개 제품의 계란의 난황을 1:100부터 1:1,600까지 두배 희석법으로 희석한 후 SE균체와 ST균체 및 ST의 OMP항원에 대해 특이 항체 역가를 ELISA로 측정한 결과 대조군에 비해 희석곡선의 형태가 차이가 나는 것을 알 수 있었다. 시중에 유통중인 2개 제품의 계란을 1:200과 1:1,000으로 희석한 후 ST항원, OMP항원과 SE항원에 대한 각각 ELISA를 실시한 결과 각각의 항원에 대해 난황특이 항체에 대한 역가는 같은 제품일지라도 차이가 있었다. 21개 제품의 계란을 각 회사마다 5개씩 무작위로 추출하여 계란난황을 1:1,000으로 희석한 후 3가지 항원 ST균체, SE균체 및 ST의 OMP 항원에 대해 ELISA을 실시한 결과 SE와 ST균체 항체보다 OMP항원에 대해 전반적으로 높은 항체 역가를 나타냈으며, ST는 30%, SE는 28.5%, OMP는 28.5% 수준에서 대조구와 비슷한 낮은 역가의 항체 값을 나타내었다. 본 논문의 결과는 난황항체 역가를 측정함으로서 산란계군에서 ST와 SE에 오염을 파악하거나 ST와 SE의 오염을 줄이는데 효과적으로 이용될 수 있는 민감한 방법이라고 생각된다.X>$10^{8}$ g ~ 3.05$\times$$10^{8}$ g 분포를 나타냈으며, 생녹각김치, 유산처리 녹각김치, 대조김치, 열수추출 녹각김치의 순으로 많았다. 녹각 김치를 사람들에게 맛보게 하여 짠맛, 신맛, 향기, 색, 조직감을 평가시킨 결과 열수추출 녹각김치와 생녹각김치가 가장 높은 값을 나타냈고 이어서 대조김치와 유산처리 녹각김치의 순을 나타냈다.TEX>0.13)은 무첨가 초콜릿(3.25$\pm$0.15)에 비해 모두 유의적(P<0.001)으로 낮은 점수를 나타냈으나, 2% 첨가수준에서는 맛, 향, 조직감 및 기호도에서 유의적인 차이를 보이지 않았다.의 소규모 와, 강한조류 및 지형적 특성(불규칙한 해저지형 및 고립도서)에 의해 이루어지는 왕성한 수평 및 연직 혼합 등과 같은 어장학적 호조건에 의해 마라도 주변에 체류하게 되고, 이들 체류어군은 조류방향에 따라 섬의 조상 측에 농밀군을 형성하는 섬의 조상측 어장이다.향을 주지 않는 것으로 나타났으므로 청소년 각자의 식습관 및 식품 섭취에 대한 관심을 고취시킬 필요가 있다고 생각된다.d with an MR peak in the vicinity of the coercive field. The low-field tunnel-type MR characteristics of thin films deposited on different substrates originates from the behavior of grain boundary properties. 않고 단지 안전 보호측면에서의 연구가 이루어졌을 뿐이었다. 따라서 서열환경하에서 머리부분의 쾌적성을 고려한 다양한 작업

• 대한의생명과학회지
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• 제5권1호
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• pp.11-15
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• 1999

갑상선 질환의 진단에 필요한 갑상선 호르몬의 측정시 thyroxine (T$_4$)농도 측정방법이 가장 흔히 이용되고 있다. 과거에 많이 활용되어온 방사면역측정법 (RH)이 폐기물 처리 및 관리인원 등의 인적, 물적인 문제가 크게 대두되고 있는 점을 감안하면 효소결합면역측정법의 확립은 큰 의미가 있다고 하겠다. 본 연구에서는 thyroxine (T$_4$)에 대한 단클론 항체 (monoclonal antibody)를 이용하여 T$_4$에 horseradish-peroxidase를 화학적으로 결합시킨 microtiter plate에 HRP-conjugate T$_4$와 혈청내의 T$_4$간의 서로 경쟁적인 반응을 이용한 표준곡선을 얻었다. 그리고 이렇게 확립한 기법을 임상적인 갑상선질환 환자의 혈청을 기존의 chemiluminescence 방법을 이용하여 얻은 결과와 비교하여 본 실험에서 확립한 ELISA검사 수치의 유용성을 검토하였으며 이 방법의 임상이용 가능성을 검토하였다.

• 한국환경농학회지
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• 제13권1호
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• pp.76-82
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• 1994

Metalaxyl을 ELISA기법을 이용하여 분석하기 위하여 metalaxyl-HSA를 합성하고 이에 대한 항체를 생산하여 competitive indirect ELISA를 위한 최적조건을 조사하였다. Metalaxyl-protein conjugate는 metalaxyl을 가수분해시켜 생성된 metalaxyl acid에 단백질(HSA, OA)을 mixed anhydride방법이나 EDC 첨가방법으로 조제하였고 생성된 항체의 역가는 1:16,000으로 나타났다. Coating Ag의 최적농도는 $8\;{\mu}g/ml$, 배양시간은 $4\;^{\circ}C$에서 1시간 이상, $20\;^{\circ}C$와 $37\;^{\circ}C$에서는 4시간으로 나타났으며 항체의 희석배수는 1:2,000이 최적으로 나타났다. 항원과 항체의 혼합비율은 0.5 ml의 항원에 대해 1 ml의 항체가 최적이었으며 이 혼합액의 배양시간은 1시간, antirabbit Ig G-peroxidase conjugate의 배양시간은 30분이 최적으로 나타났다.

• 대한수의학회지
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• 제40권1호
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• pp.81-85
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• 2000

Coxiella burnetii (C burnetii) is the causative agent of Q fever in animal and human. The distribution of the disease has been documented around world. In this study we developed the competitive enzyme linked immunosorbent assay(cELISA) and compared it with indirect immunofluorescent assay(IFA). A monoclonal antibody(Mab) against C burnetii and a peroxidase-conjugated anti-mouse IgM were used as an indicator system competing against antibody in animal serum or as an indicater of the absence of antibody. Sera were considered antibody positive when the percentage inhibition index(PI index) is upper than 30. PI index is calculated as 100-[sample OD/Mab OD)${\times}100$]. Among 162 bovine serum samples, 23 samples were antibody positive both in cELISA and IFA. And 156 samples showed same results. From goat with experimentally induced infection with C burnetii the antibody was detected 20 days early in cELISA compared to IFA. On the basis of present findings, it was demonstrated that cELISA is a reliable diagnostic method for The detection of specific antibodies against C burnetii infection.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제41권4호
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• pp.203-207
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• 2003

An ELISA was developed for the diagnosis of vivax malaria using multiple stage-specific recombinant antigens of Plasmodium vivax. The DNA from the whole blood of a malaria patient was used as template to amplify the coding regions for the antigenic domains of circumsporozoite protein (CSP-1), merozoite surface protein (MSP-1), apical merozoite antigen (AMA-1), serine repeat antigen (SERA), and exported antigen (EXP-1). Each amplified DNA fragment was inserted into pQE30 plasmid to induce the expression of His-tagged protein in Escherichia coli (M15 strain) by IPTG. His-tagged proteins were purified by Ni-NTA metal-affinity chromatography and used as antigens for ELISA with patient sera that were confirmed previously by blood smear examinations. When applied to patient sera, 122 (80.3%) out of 152 vivax malaria cases reacted to at least one antigen, while no reactions were observed with 128 uninfected serum samples. We applied this ELISA to the screening of 3,262 civilian residents in endemic regions near the DMZ, which resulted in 236 positively detected (7.2%) cases. This method can be applied to serological diagnosis and mass screening in endemic regions, or can be used as a safety test for transfusion blood in endemic areas.

• 대한수의학회지
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• 제38권4호
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• pp.793-802
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• 1998

Salmonellosis caused by a number of serotypes of Salmonella is an infectious, acute or chronic, zoonotic disease and characterized by enteritis and diarrhea, septicemia in animal. In these studies we investigated the prevalent serotypes of Salmonella causing animal salmonellosis in Korea and the 71 strains of Salmonella spp. were isolated from materials such as mesenteric lymph nodes, fecal samples from slaughtered animal. With the identification test results, the most prevalent serotypes were, in order, S stanley 31 strains (43.7%), S typhimurium 19 strains (26.8%) and S montevideo 11 strains (15.5%), respectively. And we could establish the method for detection of antibodies to broad variety of Salmonella serotypes. Lipopolysaccharide(LPS) antigen extracted from Salmonella was more sensitive and specific than outer membrane protein antigen from that for detection of Salmonella antibody by using an indirect ELISA. The optimal concentration of antigen was 100ng/ml of LPS, the dilutions of conjugate and serum were 1 : 1,000~2,000 and 1 : 200~400, respectively. The mix LPS-ELISA which was used by mixing LPS from S typhimurium (group B), S choleraesuis (group C) and S enteritidis (group D) were more rapid and effective than that used LPS from individual strain for detection of Salmonella serogroup O4, O7 and O9 antibody at the same time. We could obtain the high values of optical density ($0.73{\pm}0.32$) by mix LPS-ELISA on the farm which had occurred salmonellosis, but very low values of $0.17{\pm}0.06$ on the negative farm of salmonellosis. So, the mix LPS-ELISA may be used to monitor the serological surveillance for the presence of infection with a number of serotypes of Salmonella and would be useful for prevention and control of salmonellosis in animal.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1998년도 Proceedings of UNESCO-internetwork Cooperative Regional Seminar and Workshop on Bioassay Guided Isolation of Bioactive Substances from Natural Products and Microbial Products
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• pp.34-37
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• 1998

Combinatorial chemistry is one of the most interested topics in the area of drug discovery. One of the most important points is how to find a lead compound that gives the seed structure for designing of a combinatorial library. Natural products is suitable for searching a new bioactive compound with new structure. We have carried out systematic screening works to find natural products possessing the effects on inter-and intra-cellular signaling. Two hundreds extracts of medical plants and two thousands microbial culture broth samples have been tested for the induction and inhibition of IL-2 or IL-6 production (Fig. 1). ELISA is an efficient method for screenings from such a large number of samples. Now, we apply this method to search prion- binding agents.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제45권2호
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• pp.271-279
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• 1998

연구배경: 결핵의 유병률은 감소하는 추세이나 노인, 항암약물요법, HIV 감염 풍에 의해 면역기능이 약화된 환자에 있어서 결핵의 발생이 문제가 되고 있으며, 특히 다제내성균주의 출현은 큰 문제이다. 결핵진단법 중 체액에서 도말검사나 배양검사를 통해서 Myco-bacterium tuberculosis를 검출하는 것이 표준진단법이나, 도말검사는 상대적으로 민감도가 낮고 배양검사는 오랜시간이 소요된다. 중함연쇄반응을 이용하여 결핵균의 DNA를 검출하는 방법은 매우 민감하나 비용이 많이 소요된다. ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)를 이용하여 혈청에서 결핵균 특이항원에 대한 항체를 검출하는 방법이 객담도말음성인 활동성 폐결핵환자를 다른 비결핵성 폐질환으로부터 감별하는데 유용한지를 확인하고자 하였다. 방 법: 연세대학교 세브란스 병원에 입원한 183명의 객담도 말음성인 폐질환환자에서 항산균에 대한 객담도말 및 배양검사와 결핵균 특이 항원인 recombinant 38 kilo-dalton 항원과 culture filtrate항원을 이용한 ELISA 검사를 시행하였다. 결 과: 35명의 활동성 폐결핵환자 중 18명에서 배양검사상 Mycobacterium tuberculosis를 검출할 수 있었다. 38 kDa와 culture filtrate에 대한 흡광도는 활동성 폐결핵환자들에서 비결핵성 폐질환자들보다 유의하게 높았다 (p<0.05). 활동성 폐결핵환자 중 객담배양양성과 음성군사이에 38 kDa와 culture filtrate에 대한 홉광도의 유의한 차이는 없었다 (p>0.05) 객담도말음성인 환자에 있어서 38 kDa과 culture filtrate의 민감도는 각각 20.0%와 31.4%였고 특이도는 각각 95.3%와 93.9%였다. 결 론: 객답도말검사 음성인 활동성 폐결핵환자에 있어서 ELISA를 이용한 38 kDa과 culture filtrate 항원에 대한 혈청항체검사법은 기존진단방법보다 낮은 민감도를 보여, 비결핵성 폐질환으로부터 활동성 폐결핵을 감별진단하는데 크게 도움이 되지 않을 것으로 여겨진다.