Recently, the major viral diseases, Newcastle disease (ND), infectious bronchitis (IB), low pathogenic avian influenza (LPAI), avian pneumovirus infection (APV), Marek's disease (MD) and infectious bursal disease (IBD), have led to huge economic losses in chicken industry of Korea. To evaluate prevalence of the major viral disease infections in broiler breeder and broiler farms, epidemiological survey has been conducted in Jeonbuk province from 2005 to 2007 by serological ELISA test for APV, PCR for MD, and RT-PCR for ND, IB, LPAI and IBD, respectively. A total of 424 cases was submitted to our laboratory for diagnosis of the major viral disease from broiler breeder and broiler farms in the above period. The diagnosed results were analysed for the detection rate of infections on basis of years, seasons and ages, respectively. This study was showed that the detection rates of ND and APV were considerably high for every years regardless of seasons and ages in both broiler breeder and commercial broiler. In comparison with detection rates of ND and APV, IB and LPAI were lower but detected around 10% for every years. Especially, detection rate of IB was significantly high in commercial broiler than in broiler breeder. Therefore, to minimize economic losses for broiler breeder and broiler farms, it will need for effective countermeasures to decrease detection rate of the viral respiratory diseases. Although the detection rates of MD and IBD were gradually decreased from 2005 to 2007 in both broiler breeder and commercial broiler, it will continually make an effort about disease control for increasing productivity in chicken industry.
Objective : Soybeans of Canavalia gladiata(CG) and root of Arctium lappa(AL) have been reported to have anti-inflammatory, antioxidant effect. However, the immunoregulatory mechanisms of its combinational prescription remain a matter of considerable debate. In the current study, we investigated whether CG and AL and its combinational prescription(CG+AL) regulate immune system using chronic immobilization-stress mouse model. Methods : C57BL/6J mice fixed for 2 hours into immobilization tube after CG, AL, CG+AL oral administration after 2 hours daily for 21 days. After every experiment has ended the C57BL/6J mice were sacrificed on 22 days. The production of Serotonin and Cortisol, lgA were observed by ELISA method, The proportion of immune cells such as T/B cell and macrophage, NK cell were measured by FACS. Then, Real-time PCR was performed to measure the mRNA expression of Inflammatory cytokines(IL-1beta, IL-6, TNF-a) and T cell activation cytokines(IL-2, IL-10, IFN-gamma, IL-12p35 / p40). Result : When chronic immobilization-stress mouse model were treated with CG+AL(1:4), the expression of mRNA were significantly decreased at the Inflammatory cytokines(IL-1beta, IL-6, TNF-a). While, the levels of mRNA were significantly increased at immune T cell activation cytokines. Additionally, CG+AL(1:4) combinational prescription group enhanced immune cells such as T/B cell and macrophage, NK cell. Furthermore, the Immuno-fluorescence result of brain tissue can confirm that CG+AL(1:4) group significantly increased the BDNF expression. Conclusion : These result suggest that CG+AL(1:4) combinational prescription has Immune System enhancement via stress-mediated immunocyte.
Objectives: This study was performed to investigate the effects of Gagamsosokmyeong-tang(Jiajianxiaoxuming-tang) on the monosodium iodoacetate(MIA) induced early state osteoarthritis in rats. Methods: Osteoarthritis was induced by injection of MIA(0.25 mg) into knee joints of rats. Osteoarthritis rats were divided into control(n=8) and treated=8 group respectively, Control group was taken distilled water and treated group was taken extracts of Gagamsosokmyeong-tang(Jiajianxiaoxuming-tang) by orally for 20 days. Body weight was measured at 0, 5, 10, 15, 20 days after MIA injection. At the end of experiment, gross and histopathological examination on the articular cartilages of the knee joints were performed. Proteoglycan(PG) content of articular cartilages were analysed by safranine O staining method. The content of tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$ in synovial fluids were analysed by enzyme-inked inmunosorbent assay(ELISA) method. And also cycloxygenase-2(COX-2), matrix metalloproteinase 3(MMP-3), inducible nitric oxide synthase(iNOS), calpain immunochistochemical examination on the knee joints were performed. Results: PG content in articular cartilages of the treated group was significantly increased compared with control group. Histopathological osteoarthritic score of the treated group was significantly decreased compared with control group. $TNF-{\alpha}$ content in synovial fluids, expression of iNOS and calpain in synovial membrane of the treated group were significantly decreased compared with control group. But body weight, $1L-1{\beta}$ content in synovial fluids, expression of iNOS and MMP-3 of the treated group were not significantly changed compared with control group. Conclusions: On the basis of these results, we conclude that Gagamsosokmyeong-tang(Jiajianxiaoxuming-tang) has anti-arthritic effects on the MIA induced early stage osteoarthritis in rats.
Chunghyul-dan (CHD) is a combinatorial drug known to exert anti-inflammatory effects in endothelial cells. In this study, we employed global transcriptional profiling using cDNA microarrays to identify molecular mechanisms responsible for the anti-inflammatory activity of CHD in endothelial cells. An analysis of the microarray data revealed that transcript levels of monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), vascular cell-adhesion molecule-1 (VCAM-1) and activated leukocyte cell-adhesion molecule were dramatically altered in CHD-treated endothelial cells. These changes in gene expression were confirmed by RT-PCR, Western blotting and ELISA. Chronic CHD treatment also appeared to decrease MCP-1 secretion, probably as a result of decreased MCP-1 expression. In addition, we determined that chronic CHD treatment inhibited lipopolysaccharide-stimulated adhesion of THP-1 leukocytes to endothelial cells. The inhibitory effect of CHD on LPS-stimulated adhesion resulted from downregulation of VCAM-1 expression. Transmigration of THP-1 leukocytes through endothelial cells was also inhibited by chronic CHD treatment. In conclusion, CHD controls a variety of inflammatory activities by regulating MCP-1 and VCAM-1 gene expression.
Kim, Kwang-Dong;Choi, Seung-Chul;Lee, Eun-Sil;Kim, Ae-Yung;Lim, Jong-Seok
IMMUNE NETWORK
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제7권3호
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pp.133-140
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2007
Background: It is well established that cross talk between natural killer (NK) cells and myeloid dendritic cells (DC) leads to NK cell activation and DC maturation. In the present study, we investigated whether type 1-polarized DC (DC1) matured in the presence of IFN-${\gamma}$ and type 2-polarized DC (DC2) matured in the presence of PGE2 can differentially activate NK cells. Methods: In order to generate DC, plastic adherent monocytes were cultured in RPMI 1640 containing GM-CSF and IL-4. At day 6, maturation was induced by culturing the cells for 2 days with cytokines or PGE2 in the presence or absence of LPS. Each population of DC was cocultured with NK cells for 24 h. The antigen expression on DC was analyzed by flow cytometry and cytokine production in culture supernatant was measured by ELISA or a bioassay for TNF-${\alpha}$ determination. NK cell-mediated lysis was determined using a standard 4h chromium release assay. Results: DC2, unlike DC1, had weak, if any, ability to induce NK cell activation as measured by IFN-${\gamma}$ production and cytolytic activity. DC2 were weakly stimulated by activated NK cells compared to DC1. In addition, IFN-${\gamma}$-primed mature DC appeared to be most resistant to active NK cell-mediated lysis even at a high NK cell/DC ratio. On the other hand, PGE2-primed DC were less resistant to feedback regulation by NK cells than IFN-${\gamma}$-primed mature DC. Finally, we showed that the differential effect of two types of DC population on NK cell activity is not due to differences in their ability to form conjugates with NK cells. Conclusion: These results suggest that different combinations of inflammatory mediators differentially affect the effector function of DC and, as a result, the function of NK cells, eventually leading to distinct levels of activation in adaptive immunity.
Background: For an effective bone graft for reconstruction of the maxillofacial region, an adequate vascular network will be required to supply blood, osteoprogenitor cells, and growth factors. We previously reported that the secretomes of bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSC-CM) contain numerous growth factors such as insulin-like growth factor (IGF)-1, transforming growth factor $(TGF)-{\beta}1$, and vascular endothelial growth factor (VEGF), which can affect the cellular characteristics and behavior of regenerating bone cells. We hypothesized that angiogenesis is an important step for bone regeneration, and VEGF is one of the crucial factors in MSC-CM that would enhance its osteogenic potential. In the present study, we focused on VEGF in MSC-CM and evaluated the angiogenic and osteogenic potentials of MSC-CM for bone regeneration. Methods: Cytokines in MSC-CM were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured with MSC-CM or MSC-CM with anti-VEGF antibody (MSC-CM + anti-VEGF) for neutralization, and tube formation was evaluated. For the evaluation of bone and blood vessel formation with micro-computed tomography (micro-CT) and for the histological and immunohistochemical analyses, a rat calvarial bone defect model was used. Results: The concentrations of IGF-1, VEGF, and $TGF-{\beta}1$ in MSC-CM were $1515.6{\pm}211.8pg/mL$, $465.8{\pm}108.8pg/mL$, and $339.8{\pm}14.4pg/mL$, respectively. Tube formation of HUVECs, bone formation, and blood vessel formation were increased in the MSC-CM group but decreased in the MSC-CM + anti-VEGF group. Histological findings suggested that new bone formation in the entire defect was observed in the MSC-CM group although it was decreased in the MSC-CM + anti-VEGF group. Immunohistochemistry indicated that angiogenesis and migration of endogenous stem cells were much more abundant in the MSC-CM group than in the MSC-CM + anti-VEGF group. Conclusions: VEGF is considered a crucial factor in MSC-CM, and MSC-CM is proposed to be an adequate therapeutic agent for bone regeneration with angiogenesis.
교정적 치아이동 중 골개조는 수종의 매개물질에 의하여 조절된다. 특히 IL-$1\beta$는 실험동물의 교정적 치아이동 중 압박측과 긴장측 모두의 치근막과 치조골에서 골흡수를 촉진하고 골형성을 억제하는 효과를 보이는 것으로 알려져 왔다. 이 연구는 인체에서의 교정적 치아이동 중 압박측과 긴장측 치은열구액에서 IL-$1\beta$의 발현을 찾고 발현양의 시간적 변화를 관찰하였다. 전신질환인 없고 임상적으로 건강한 치주조직을 가진 평균 19.2$\pm$4.2세, 12명의 남녀환자에서 편측 견치를 원심으로 견인하였다. 실험군(원심 견인측)의 근심과 원심, 대조군(동일환자의 반대편 견치)의 근심 치은열구액을 견치 후방 이동 직전, 1시간 후, 24시간 후, 168시간 후의 4개의 시간대 별로 수집하여 총단백질 농도(BCA법)와 IL-$1\beta$(ELISA법) 의 농도를 비교, 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 실험군에서의 IL-$1\beta$ 농도는 교정력을 가한 후 증가하여 24시간 전후에 최대값에 도달하였다. 2. 대조군에서의 IL-$1\beta$ 농도는 시간에 따라 유의한 차이를 보이지 않았다. 3. 교정력을 가한 24시간 후에서 IL-$1\beta$의 농도는 압박측에서 가장 높고, 이어 긴장측과 대조군의 순이었다.
Objectives : The aim of this study was to evaluate the effect of Schizonepeta Spica water extract (SS) on the OVA-induced BLAB/c mice allergic rhinitis model.Methods : Thirty two BALB/c mice were equally assigned to 4 groups; the sham group, the control group, the cetirizine hydrochloride (Cet) treatment group, and the SS treatment group. Sham group was sensitized and challenged with saline, and the other groups were sensitized and challenged with OVA. The dosage of SS was 7.6 mg /kg·day, and Cet was 10 mg/kg·day. Nasal rubbing and sneezing were measured by the behavior observation. The concentrations of IL-1β, IL-10, TNF-α and MIP-2 in the sera of allergic rhinitis model were measured by mouse cytokine/chemokine magnetic bead panel kits. Total IgE and OVA-specific IgE were measured by ELISA method. Epithelial thickness and eosinophil infiltration of nasal septum was investigated by histological examination.Results : The clinical symptoms that increased in control group were significantly reduced in SS-treated group. Serum total IgE and OVA-specific IgE in the SS-treated group were significantly reduced compared to the control group. The concentration of IL-1β, IL-10, TNF-α and MIP-2 in SS-treated group showed a significant reduction compared to the control group. The infiltration of eosinophil into nasal tissues of SS-treated group decreased markedly compared to control group, and thickness of nasal septum in nasal mucosa showed a significant reduction compared to control group.Conclusions : According to the above result, it is suggested that SS may inhibit the early and late phase of allergic rhinitis reaction.
Objective : Sinapis alba L. (SA) is a korean traditional herbal medicine that is usually used to prevent or treat inflammatory diseases, such as respiratory infection and rheumatoid arthritis. However, the effects of SA supplementation in vitro on serum antibody levels, splenocyte and peritoneal macrophage immune responses have not yet been determined. In this study, we examined the effect of SA on the production of Th1/Th2 cytokines. Methods : Splenocytes were isolated from naive C57BL/6 mice. Cells were enriched for CD4+ cell populations by first staining the cells with anti-CD4 (BD PharMingen, Calif, USA). CD4+ T cells were selected on a (CS) column, and the flow-through was collected as CD4+ T cells. Isolated cells were activated by overnight incubation on 24-well plates coated with $1{\mu}g/mL$ anti-CD3, $1{\mu}g/mL$ anti-CD28 and with SA ($100{\mu}g/mL$). Primary macrophages were collected from the peritoneal cavities of mice (8-week-old female C57BL/6). The peritoneal macrophages were washed and plated with RPMI-1640 overnight for the experiments. After 48-hours cultures, samples were centrifuged at 2000 rpm for 10 minutes, and the supernatants were stored at $-80^{\circ}C$. Mouse IL-4, IFN-$\gamma$ and TNF-$\alpha$ were quantified using ELISA kits (BioSource International, Camarillo, Calif, USA) according to the manufacturer's protocols. Results : SA at 100ug/ml decreased the generation of Th1 cytokine (IFN-$\gamma$) by 0.5-fold. However, SA has no effect on Th2 (IL-4) production. Conclusions : These results suggest that SA may play an important role in the control of T-cell-mediated autoimmunity by down-regulation of Th1 cytokine (especially IFN-$\gamma$, TNF-$\alpha$). These data may contribute to the design of new immunomodulating treatments for a group of autoimmune diseases.
Objective : The objective of this study was to demonstrate the effect of Persicae Semen (PS) in DNCB-induced atopic dermatitis mouse and HaCaT cell. Methods : The BALB/c mice were divided into four groups. To develop atopic dermatitis, 200 ㎕ of 1 and 0.5% DNCB solution was put on the back of mice in the Control group, the PS-Low group and the PS-High group once a day. After application of DNCB, 200 ㎕ of the PS extract was also treated. The Normal group was given PBS. The mice dorsal skin was stained with Masson's trichrome, H&E, and toluidine blue to evaluate the thickness of the epidermis and dermis, infiltration of eosinophils and mast cells respectively. ELISA was applied to measure the serum level of IgE and IL-6. Toxicity of PS was measured by MTS assay in HaCaT cell. To investigate the effects of PS on HaCaT cells, cells were pre-treated with PS for 1h, and then stimulated with TNF-α and IFN-γ. After 24 hours, the expression of TARC was analyzed using RT-PCR. Results : PS not only significantly diminished the thickness of the epidermis and dermis, but also reduced the infiltration of eosinophil and mast cell in skin lesion. PS also reduced the serum IgE and IL-6 level which plated important roles in the atopic dermatitis. The expression of TARC was decreased significantly in TNF-α/IFN-γ stimulated HaCaT cell. Conclusion : These results suggest that PS may be effective in alleviating the atopic dermatitis induced by DNCB and inflammation by TNF-α/IFN-γ.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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