Starvation에 의해서 down-regulation 되는 유전자 10개를 얻었다(Comt, RGN, Scd1, Temt, Idi1, Fabp5, Car3, Cyp2c70, Pinx1, Poldip3). 이들은 starvation에 의한 대사변화의 대부분은 liver와 관련된 것으로 볼 수 있다. Starvation중에 물 공급은 암수 동일하게 apoptosis, autophage, endoplasmic reticulum quality control (ERQC)유도에 영향을 미치지 않았다. 이 같이 starvation에 의해서 down-regulation되는 유전자발현조절이 liver에 국한된 것이라기보다는 개체의 항상성유지에 관련 많은 pathway가 관련되어있는 것으로 판단된다. 장기간의 간혈 starvation은 glucose소비가 많은 brain과 면역기능조절에 중요한 thymus의 정상기능에 영향을 미칠 수 있는 것으로 보인다. 유전자 Scd1의 경우는 ♀보다가 ♂이 민감한 반응을 보이는 것으로 보아 ♀/♂의 성 특이적인 대사에 starvation과 NaCl이 밀접한 관계가 있는 것으로 보인다. Starvation시 물 공급도 중요하지만 개체의 항상성유지에 NaCl공급이 중요하다는 결과를 얻었다.
Rock bream iridovirus (RBIV) is a megalocytivirus widely infected in various fish species in Korea, causing symptoms of acute inflammation and enlargement of spleen. In our previous study, RBIV induced the initial upregulation but later down-regulation of proinflammatory cytokines and IFN1 gene expression. Signal transducers and activators of transcriptions (STAT) are transcription factors involved in the regulation of immune genes including IFNs. This study was conducted to analyse the expression of STAT2. The expressional study of STAT2 gene was performed in head kidney and spleen upon RBIV infection and immune stimulants like LPS or poly I:C in vitro. Consequently, STAT2 gene expression pattern was different in head kidney and spleen as it was significantly up-regulated by LPS from 4 h to 8 h but down-regulated at 24 h while up-regulated by poly I:C at 8 h in head kidney while, in spleen, STAT2 gene expression was down regulated by LPS but significantly up-regulated by poly I:C. Upon RBIV stimulation, STAT2 gene expression was significantly down-regulated by high dose RBIV at 4 h but up-regulated at 8 h and 24 h in head kidney. In spleen cells, it was up-regulated by medium dose RBIV at 4 h and by high dose RBIV at 4 h and 8 h but down regulated later then. In vivo, STAT2 gene expression was not significantly affected by RBIV infection while significant up-regulated by vaccination at day 7 post-vaccination, indicating STAT2 gene can be involved in adaptive immune response in rock bream.
An attempt was made to study circulatory and respiratory responses to the passive tilt. Anesthetized dogs were tilted from horizontal to upright $(+90^{\circ})$ and head down $(-90^{\circ})$ position. The arterial blood pressure was decreased in the upright position and was decreased slightly in the head down position comparing to that in the horizontal position. Cardiac index also decreased in the both upright and head down positions. The total systemic vascular resistance was slightly increased in the upright position and was markedly increased in the head down position. The mean pulmonary arterial pressure was significantly decreased in the both upright and head down positions. The total pulmonary vascular resistance was decreased in the both upright and head down positions. Oxygen consumption was slightly decreased in the upright position, whereas it was slightly increased in the head down position. The A-V $O_2$ difference (vol. %) was slightly increased in the upright position and increased in the head down position. From the above results, process of the circulatory compensation to the gravity in the Passive tilting test was discussed. Neuronal cardiovascular regulation to the gravity and tile adaptation of capacitance vessles to hydrostatic stress and oxygen consumption concerning anoxic endurance of the brain were also discussed.
Based on our previous report on gastric cancer which documented ATP4A and ATP4B mRNA down-regulation in gastric tumors relative to normal gastric tissues, we hypothesized that epigenetic mechanisms could be responsible. ATP4A and ATP4B mRNA expression in gastric cancer cell lines AGS, SNU638 and NUGC-3 was examined using reverse transcriptase PCR (RT-PCR). AGS cells were treated with TSA or 5'-AzaDC and methylation specific PCR (MSP) and bisulfite sequencing PCR (BSP) analysis were performed. MSP analysis was on DNA from paraffin embedded tissues sections and plasma. Expression analysis revealed downregulation of ATP4A and ATP4B genes in gastric cancer cell lines relative to normal gastric tissue, while treatment with 5'-AzaDC re-activated expression of both. Search for CpG islands in their putative promoter regions did not indicate CpG islands (CGI) but only further downstream in the bodies of the genes. Methylation specific PCR (MSP) in the exon1 of the ATP4B gene and exon7 in ATP4A indicated methylation in all the gastric cancer cell lines tested. MSP analysis in tumor tissue samples revealed methylation in the majority of tumor samples, 15/19, for ATP4B and 8/8 for ATP4A. There was concordance between ATP4B and ATP4A down-regulation and methylation status in the tumour samples tested. ATP4B methylation was detectable in cell free DNA from gastric cancer patient's plasma samples. Thus ATP4A and ATP4B down-regulation involves DNA methylation and methylated ATP4B DNA in plasma is a potential biomarker for gastric cancer.
Cytoplasmic male sterility (CMS) is a maternally inherited trait leading to loss of the ability to produce fertile pollen and is extensively used in hybrid crop breeding. Ogura-CMS was originally generated by insertion of orf138 upstream of atp8 in the radish mitochondrial genome and transferred to Brassica crops for hybrid breeding. Gene expression changes by dysfunctional mitochondria in Ogura-CMS result in pollen developmental defects, but little is known about gene expression patterns in vegetative tissue. To examine the interaction between nuclear and organellar regulation of gene expression, microarray and subsequent gene expression experiments were conducted with leaves of $F_1$ hybrid Chinese cabbage derived from self-incompatible (SI) or Ogura-CMS parents (Brassica rapa ssp. pekinensis). Out of 24,000 genes deposited on a KBGP24K microarray, 66 genes were up-regulated and 26 genes were down-regulated by over 2.5 fold in the CMS leaves. Up-regulated genes included stress-response genes and mitochondrial protein genes, while genes for ascorbic acid biosynthesis and thylakoid proteins were down-regulated. Most of the major component genes for light reactions of photosynthesis were highly expressed in leaves of both SI and CMS plants, but most of the corresponding proteins were found to be greatly reduced in leaves of CMS plants, indicating posttranscriptional regulation. Reduction in thylakoid proteins and chlorophylls led to reduction in photosynthetic efficiency and chlorosis of Ogura-CMS at low temperatures. This research provides a foundation for studying chloroplast function regulated by mitochondrial signal and for using organelle genome introgression in molecular breeding.
We investigated the therapeutic effects of microRNA-139-5p in relation to osteoporosis of bone marrow-derived mesenchymal stem cell (BMSCs) and its underlying mechanisms. In this study we used a dexamethasone-induced in vivo model of osteoporosis and BMSCs were used for the in vitro model. Real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR) and gene chip were used to analyze the expression of microRNA-139-5p. In an osteoporosis rat model, the expression of microRNA-139-5p was increased, compared with normal group. Down-regulation of microRNA-139-5p promotes cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Especially, up-regulation of microRNA-139-5p reduced cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Overexpression of miR-139-5p induced Wnt/β-catenin and down-regulated NOTCH1 signaling in BMSCs. Down-regulation of miR-139-5p suppressed Wnt/β-catenin and induced NOTCH1 signaling in BMSCs. The inhibition of NOTCH1 reduced the effects of anti-miR-139-5p on cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Activation of Wnt/β-catenin also inhibited the effects of anti-miR-139-5p on cell proliferation and osteogenic differentiation in BMSCs. Taken together, our results suggested that the inhibition of microRNA-139-5p promotes osteogenic differentiation of BMSCs via targeting Wnt/β-catenin signaling pathway by NOTCH1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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