To evaluate if the apoptotic fragment assay could be used to estimate the dose prediction after radiation exposure, we examined apoptotic mouse crypt cells per 1,000 cells after whole body $^{60}Co$$\gamma$-rays and 50MeV ($p{\rightarrow}Be^+$) cyclotron fast neutron irradiation in the range of 0.25 to 1 Gy, respectively. The incidence of apoptotic cell death rose steeply at very low doses up to 1 Gy, and radiation at all doses tigger rapid changes in crypt cells in stem cell region. These data suggest that apoptosis may play an important role in homeostasis of damaged radiosensitive target organ by removing damaged cells. The curve of dose-effect relationship for the data of apoptotic fragments was obtained by the linear-quadratic model $y=0.18+(9.728{\pm}0.887)D+(-4.727{\pm}1.033)D^2$ ($r^2=0.984$) after $\gamma$-rays irradiation, while $y=0.18+(5.125{\pm}0.601)D+(-2.652{\pm}0.7000)D^2$ ($r^2=0.970$) after neutrons in mice. The dose-response curves were linear-quadratic, and a significant dose-response relationship was found between the frequency of apoptotic cell and dose. These data show a trend towards increase of the numbers of apoptotic crypt cells with increasing dose. Both the time course and the radiation dose-response curve for high and low linear energy transfer (LET) radiation modalities were similar. The relative biological effectiveness (RBE) value for crypt cells was 2.072. In addition, there were significant peaks on apoptosis induction at 4 and 6h after irradiation, and the morpholoigcal findings of the irradiated groups were typical apoptotic fragments in crypt cells that were hardly observed in the control group. Thus, apoptosis in crypt cells could be a useful in vivo model for studying radio-protective drug sensitivity or screening test, microdosimetric indicator and radiation-induced target organ injury. Since the apoptotic fragment assay is simple, rapid and reproducible in the range of 0.25 to 1 Gy, it will also be a good tool for evaluating the dose response of radiation-induced organ damage in vivo and provide a potentially valuable biodosimetry for the early dose prediction after accidental exposure.
To determine if micronucleus (MN) assay could be used to predict the absorbed dose of victims after accidental radiation exposure, we carried out to assess the absorbed dose depending on the numerical changes of MN in human peripheral blood lymphocytes after $^{60}Co\;{\gamma}-rays$ exposure in the range of 0.25 to 1 Gy, respectively. The MNs were observed at very low doses, and the numerical changes according to doses. Satisfactory dose-effect calibration curve is observed after low dose irradiation of human lymphocytes in vitro. When plotting on a linear scale against radiation dose, the line of best fit was $Y=(0.02{\pm}0.0009)+(0.033{\pm}0.010)D+(0.012{\pm}0.012)D^2$. The dose-response curve for MN induction immediately after irradiation was linear-quadratic and has a significant relationship between the frequencies of MN and dose. These data show a trend towards increase of the numbers of MN with increasing dose. The number of MN in lymphocytes that were observed in the control group is $0.1610{\pm}0.0093/cell$. Accordingly, MN assay in human peripheral lymphocytes could be a useful in viva model for studying radio-protective drug sensitivity or screening test, microdosimertic indicator and radiation-induced target organ injury. Since MN assay is simple, rapid and reproducible, it will also be a biodosimetric indicator for individual dose assessment after accidental exposure.
Vera, Luisa Mayra;Bermejo, Daniel;Uguna, Maria Fernanda;Garcia, Nancy;Flores, Marittza;Gonzalez, Enrique
Environmental Engineering Research
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v.24
no.1
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pp.31-37
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2019
In this paper the results of the biosorption of lead(II) and cadmium(II) with sugarcane bagasse in fixed bed columns are presented. Experimental data were fitted to several models describing the rupture curve for single-component and two-component systems. The percentages of removal of lead and cadmium in single-component systems are 91% and 90%, respectively. In lead-cadmium bicomponent systems the percentage of elimination of lead was 90% and cadmium 92%. In single-component systems, Yoon-Nelson and Thomas models successfully reproduce the rupture curves. In two-component system, the Dose-Response model was the best one reproducing the experimental rupture curves in the entire measured range.
To achieve the accurate evaluation of given absorbed dose from output dose of linear accelerator photon beam through investigate the characteristics of LiF:Mg,Cu,P TLD powder. This experimental TL phosphor is performed with a commercial LiF:Mg,Cu,P powder (Supplied by PTW) and TL reader (LTM, France). The TLD was exposed to 6 MV X rays of linear accelerator photon beam with range 15 to 800 cGy in blind dose at two hospitals. The dose evaluation of TLD was through the experimental algorithms which were dose dependency, dose rate dependency, fading and powder weight dependency. The glow curve has shown the three peaks which are 110, 183 and 232 degrees of heating temperature and the main dosimetric peak showed highest TL response at 232 high temperature. In this experiments, the LiF:Mg,Cu,P phosphor has shown the 2.5 eV of electron trap energy with a second order. This experiments guided the dose evaluation accuracy is within 1% +2.58% of discrepancy. The TLD powder of LiF:Mg,Cu,P was analyzed to dosimetric characterists of electron captured energy and order by glow shape, and dose-TL response curve guided the accuracy within 1.0+2.58% of output dose discrepancy.
Hydrogen peroxide ($H_2O_2$) causes oxidative stress and is considered as an inducer of cell death in various tissues. Two-pore domain $K^+$ ($K_{2p}$) channels may mediate $K^+$ efflux during apoptotic volume decreases (AVD) in zygotes and in mouse embryos. In the present study, we sought to elucidate linkage between $K_{2p}$ channels and cell death by $H_2O_2$. Thus $K_{2p}$ channels (TASK-1, TASK-3, TREK-1, TREK-2) were stably transfected in HEK-293 cells, and cytotoxicity assay was preformed using cell counting kit-8 (CCK-8). Cell survival rates were calculated using the cytotoxicity assay data and dose-response curve was fitted to the $H_2O_2$ concentration. Ionic currents were recorded in cell-attached mode. The bath solution was the normal Ringer solution and the pipette solution was high $K^+$ solution. In HEK-293 cells expressing TREK-1, TREK-2, TASK-3, $H_2O_2$ induced cell death did not change in comparison to non-transfected HEK-293. In HEK-293 cells expressing TASK-1, however, dose-response curve was significantly shifted to the left. It means that $H_2O_2$ induced cell death was increased. In cell attached-mode recording, application of $H_2O_2$ (300μM) increased activity of all $K_{2p}$ channels. However, a low concentration of $H_2O_2$ ($50{\mu}M$) increased only TASK-1 channel activity. These results indicate that TASK-1 might participate in $K^+$ efflux by $H_2O_2$ at low concentration, thereby inducing AVD.
Since a 13% dietary protein level is generally accepted as a standard in evaluating net protein utilization values of protein sources in chicks, limiting amino acids a 13% protein basal diet containing 15% isolated soy-protein as the only source of dietary protein, were identified. Of such amino acids as methionine, lysine, threonine and tryptophan added to the basal diet singly or as a combination, methionine appeared as the only limiting amino acid for optimum growth of the chicks. When the requirement of total sulfur-containing acids (TSAA) was estimated as the point at which the dose-response curve intersected a line representing the plateau for maximum performance, the TSAA requirements for maximum growth and feed intake were 4.73% and 3.73% of dietary protein, respectively. The values, expressed in terms of TSAA intake, required for maximum weight gain, feed intake and gain/feed ratio were 167.1, 136.8 and 159.1 mg/bird/day, respectively.
To make sure of the usefulness of extract of Rubus coreanus Miquel for producing functional feeding honey, we compared some antioxidative indicators of feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel with acacia honey, SueBee Clover honey(USA), feeding honey on the market. The water content of four honeys were 16.6~26.5%, pH were 3.18~3.70, and titratable acidity ranged 0.018~0.022%. The phenolic compound contents of SueBee Clover honey and feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel were 8.3 mg/100 g and 7.3 mg/100 g, respectively, and were significaltly higher thgheacacia honey and feeding honey on the market. The flavonoid contents per 100 g of honey ranged from 2.3 mg(acacia honey) to 15.0 mg(SueBee Clover honey). DPPH anion scavenging activity of four honeys were not high. 0.5~2.0 g/ml of feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel was 16~36% and showed a concentration-reliant figure. At the concentration of 0.25~0.75 mg/ml, the reducing power of four honeys increased concentration-dependently, and the power of 0.25 mg/ml of feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel was corresponding to thgt of $150{\mu}g$/ml of a vitamin C solution. ABTS radical scavenging activity of feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel was 43.3~68.4%; the highest activity amongst all samples. When plotting the dose-response curve, ABTS radical scavenging activity also increased as their concentration increased from 62.5 mg/ml to 500 mg/ml. The heat treatment reduced the phenolic compound contents of acacia honey and feeding honey using extract of Rubus coreanus DPPH anion scavenging activity of feeding honey on the market and feeding honey using extract of Rubus coreanus Miquel did not changed significaltly after heating for 20 min, and the three honey except SueBee Clover honey maintained the reducing power with the same treatment.
An improved kinetic assay for prekallikrein activator (PKA), a potential vasodilator, has been developed to be used as an indicator for quality control during production of human albumin preparations. It consists of two reaction stages. In the first stage, PKA and prekallikrein are incubated at $37^{\circ}C$ for 45 min to allow the transformation into kallikrein. Kallikrein, a serine protease, catalyzes the splitting of p-nitroaniline (pNA) from its substrate H-D-Pro-Phe-Arg-pNA(S-2302). The rate at which pNA is released was measured spectrophotometrically at 405 nm. Prekallikrein, a substrate of PKA was purified by DEAE ion-exchange chromatography and the major potential variations in the assay were optimized; pH 8.0 and 150 mM sodium chloride were chosen to give a proper ionic strength. Reaction times in the range of 10 to 360 min provided linear dose-response curves. The concentration of prekallikrein was adjusted to fall between 1:1 and 1:3 dilutions to generate a linear standard calibration curve. Under the optimized conditions, reproducibility was checked. In a precision test, the coefficient of variation (CV) stayed within ${\pm}4%$ and the dose-response curve showed a good correlation (${r^2}=0.999$). An accuracy test with an international standard of PKA afforded a mean recovery of 97.5%.
Single-cell gel electrophoresis (comet assay) was used to detect DNA single strand break in blood cells from several marine fish species. Three fish species were collected from Georgia coastal area. Mummichog, Fundulus heteroclitus showed higher DNA damage than sea bass, Lateolabrax japonicus and trout, Oncorhynchus masou masou under the same experimental conditions. Mummichogs had more alkaline-labile sites on their DNA than other fish species. The comet assay with mummichog blood cells at pH 12.5 showed a dose-response curve with the increasing concentrations of hydrogen peroxide. While the isolated leucocytes showed no increase of DNA damage after in vitro exposure to 2-methyl-1,4-naphthoquinone (MNQ), erythrocytes showed dose-dependent DNA damage. These results indicate that the comet assay can be applied successfully as a bioassay using erythrocyte for environmental monitoring.
A one-step, two-site enzyme immunoassay was developed for measuring human alpha-fetoprotein (AFP) in serum and amniotic fluid using monoclonal antibodies (McAb) by eliminating the high-dose hook effect. Three McAbs that recognize different epitopes were selected among 16 different clones on the basis of epitope mapping, two for immobilization and one for horseradish peroxidase conjugation. This one-step immunoassay system is more convenient and rapid compared to a conventional two-step sandwich immunoassay system. It did not exhibit the hook effect to around 2.7 mg/ml of AFP, which is probably one of the highest concentrations of AFP in the serum. The dose-response curve of the system was linear to 500 mg/ml of AFP and the system could differentiate as low as 1 mg/ml of AFP The intra- and inter-assay variations were in an acceptable range; 95~104% and 97~105% respectively Its correlation with other commercial systems was around 95%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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