This study was conducted to analyze genetic characteristics of Korean Native Chicken three lines classified on the basis of the feather color and appearance (Red, Yellow, and Black) using DNA fingerprinting method. To estimate the genetic relatedness among breeds and similarities within breeds, we collected blood samples from Korean Native Chicken (KNC), Rhode Island Red (RIR), White Leghorn (WL), and Cornish(CN) and obtained genomic DNA from the blood of 10 individuals randomly selected within the breeds and lines. The genomic DNA samples were digested with restriction enzymes (Hinf J, Hae Ill) and hybridized with various probes (Jeffreys' probes 33.15, 33.6 and M13) after Southern transfer. Genetic similarities within breeds were characterized by band sharing (BS) value, estimated by the DFP band pattern between the pair of lanes. BS values within WL, RIR, and KNC were 0.82, 0.70 and 0.56, respectively. Relative genetic diversity (BS value) of KNC was higher than those two breeds (WL, RIR). Estimation of genetic similarity between KNC lines and control breed (RIR) was 0.32, whereas similarity within KNC lines (6 groups) was 0.50. In this analysis, KNC was showed to have a highly genetic diver-sity at the DNA level, and to be closer in genetic distance to RIR (0.67) than any other breeds.
RecA protein plans a central role in homologous recombination and DNA repair in Escherichia cofi (E. colD. The function 8nd structure of this protein are universal in prokarvotes and also conserved in eukaryotes such as yeast. The RecA-like protein with 74 lInDa in size has already been identified and purified from a fission yeast Schizosaccharomyces pombe (5. pommel (Lee, 19911. From this study it was revealed that the RecA-like protein of 5. pombe was highly inducible to various DNA damaging agents and inhibitors of nucleotide pool svnthesizins enzymes. The cellular level of the 5. pombe RecA-like protein wi,u markedly increased, upto 5- to 10-fold, by treatment with various DNA-damains agents including ultraviolet (UV) light, methyl methanesulfonate WS),4-nitroquinoline-1-oxide (4-NQO), and mitomycin-C (MMC), similar to E. cofi RecA protein. Interestingly, the protein level was also increased by inhibitors of nucleotide pool forming enzlwnes such as methotrexate (MTX) and hvdroxvurea (HU). The most effective doses for the inducibility of 4-NQO, MMS, W, MMC, MTX, and HU were 0.2 Ug/ml, 30 mM, 200 J/ma, 0.4 $\mus/ml,$ 1 Ug/ml, and 100 mM, respectively. The range of effective duration time for the inducibilitv of RecA-like protein was from 270 to 450 mins. These results suggest that the 5. pombe RecA-like protein also platys an imortant role in cellular responses to DNA damage as in E. coli system.
A ginseng protein fraction which has been reported to have radiation protective effect was purified from Korean ginseng and its effects on relative survival and chromosome aberration were studied in UV irradiated CHO-K1 cells. When the protein fraction $(100\;{\mu}g/ml)$ was added to the cells before UV irradiation at 4\;J/$m^2$,, the survival rates were increased to 53.8% from 40.6% in control. Addition of the protein $(100\;{\mu}g/ml)$ after UV irradiation at 4 and $8\;J/m^2$ raised the rates to 85.4 and 24.0% from 79.2 and 11.5% in control, respectively. When the ginseng protein $(800\;{\mu}g/ml)$ was added to the cells exposed to UV light at 10, 20, $30\;J/m^2$, the frequencies of chromosome aberration (CA) were reduced significantly to almost same level regardless of the UV dose increment and there was no significant difference between pre- and post-treatment. When the concentration of ginseng protein was increased from 200 to $800\;{\mu}g/ml$, at UV dose of 10, 20, $30\;J/m^2$ each, the CA frequencies were decreased consistently as the dose of ginseng protein increased, at all UV doses tested. Similar effects were observed in both cases of pre- and post-treatment. The data suggest that the protein may reduce cell damage caused by UV light, especially damage to DNA molecule, or play a role in repair processes of damaged DNA, to increase cell survival and reduce chromosome aberrations.
S.M. Cho;Kim, J.Y.;J.E. Jung;S.J. Mun;S.J. Jung;Kim, K.S.;Kim, Y.C.;B.H. Cho
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.65.2-65
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2003
To protect the plant against several soil-borne pathogens, we are currently constructing disease-resistant transgenic root stock for the growth of cucurbitaceae vegetable plants, watermelon and gourd. We made a watermelon cDNA library from Cladosporium cucumerinum-Infected leaves for substractive hybriazation and differential screening. We isolated the several pathogen inducible cDNA clones, such as caffeoyl-CoA-methyltransferase, LAA induced protein, receptor-like kinase homolog, hydroxyproline-rich glycoprotein, catalase, calmodulin binding protein, mitochondrial ATPase beta subunit, methyl tRNA synthetase and WRKY transcription factors. We previously obtained CaMADS in pepper and galactinol synthase ( CsGolS) in cucumber that were confirmed to be related with disease-resistance. CaMADS and CsGolS2 were transformed into the inbred line 'GO701-2' gourd, the inbred line '6-2-2' watermelon and the Kong-dye watermelon by Agrobacterium tumerfaciens LBA4404. Plant growth regulators (zeatin, BAP and IAA) were used for shoot regeneration and root induction for optimal condition. Putative transgenic plants were selected in medium containing 100mg/L kanamycin and integration of the CaMADS and CsGO/S2 into the genomic DNA were demonstrated by the PCR analysis. We isolated major soil-borne pathogens, such as Monosporascus cannonballus, Didymella bryoniae, Cladosporium cuvumerinum from the cultivation area of watermelon or root stock, and successfully established artificial inoculation method for each pathogen. This work was supported by a grant from BioGreen 21 program, Rural Development Administration, Republic of Korea.
The taxonomic status and phylogenetic relationship of Opuntia monacantha Haw. f. jejuensis J. K. Kim ex Y. S. Yang (Jejubaiknyuncho), which is native to southern coast of Jeju Island, Korea was analyzed using DNA markers obtained from Korean Opuntia. Opuntia stricta Haw., O. humifusa Raf., and O. humifusa Raf. f. jeollaensis E. J. Kim and S. S. Whang, native or cultivated in Korea, have no stripes on the back of tepals and have a purple pulp, whereas O. monacantha f. jejuensis has purple stripes on the back of tepals and a greenish-yellow pulp color. Opuntia monacantha has purple stripes on both the front and back of its tepals, whereas stripes appear only on the back of tepals of O. monacantha f. jejuensis. Opuntia monacantha f. jejuensis was assigned to Elatae series in phylogenetic analysis and was found to be more closely related to O. monacantha subsp. arechavaletae (Speg.) Guiggi, compared with O. monacantha at a molecular level. Based on its phylogenetic and morphological differences from O. monacantha and O. monacantha subsp. arechavaletae, which are native or have been cultivated in Jeju areas, O. monacantha f. jejuensis was named as a new forma in this study.
Psychrophilic bacteria have acquired cold-resistance in order to protect themselves against freezing temperatures, which would otherwise be lethal. DnaK/DnaJ/GrpE systems are molecular chaperones which facilitate proper folding of newly synthesized proteins. Efficient folding processes are of great importance especially in a cold environment, such as the Arctic. In order to understand the protection mechanisms of psychrophilic bacteria against cold temperatures, we have explored a genome of KOPRI22215, tentatively identified as Psychromonas arctica, whose genome sequence has not yet been discovered. With an aim of searching for a coding gene of DnaK from KOPRI22215, we have applied a series of polymerase chain reactions (PCR) with homologous primers designed from other Psychromonas species and LA PCR in vitro cloning. 1917 bp complete coding sequence of dnaK from KOPRI22215 was identified including upstream promoter sites. Recombinant plasmids to overexpress PaDnaK along with EcDnaK (DnaK of E. coli) were then constructed in pAED4 vector and the pET-based system to induce PaDnaK expression by IPTG. Characterization assays of expressed PaDnaK were carried out by measuring survival rates upon 4 day incubation at 4 $^{\circ}C$: a refolding assay as molecular chaperone, and ATPase assay for functional activity. Taking account of all the data together, we conclude that PaDnaK was identified, successfully expressed, and found to be more efficient in providing cold-resistance for bacterial cells.
마이크로칩 형태에서의 모세관 전기영동과 전류법을 이용하여 디옥시리보핵산(DNA) 단편들의 분리 검출하는 실험을 하였다. 마이크로 채널이 형성된 PDMS(polydimethylsiloxane)와 금 전극이 형성된 유리 기판을 접합하여 마이크로칩을 제작하였다. 20V/cm의 전계를 인가하여 100bp-1.5kbp 길이의 DNA 단편을 모세관 전기영동 하였을 때 250초내에 분리 검출되는 것을 확인하였다.
Plasmids, YEp13 and pMA56, were encapsulated Into liposomes by two different procedures during which the plasmid DNAs were exposed ether to 6$0^{\circ}C$ for 1.5 hr or to sonication for 2-5 min at 4$^{\circ}C$. The encapsulated plasmids were then reextracted and their physical conformations and transformation abilities were examined. It was confirmed from the results that both plasmid DNAs were remained stable throughout the procedures of encapsulation into 1iposomes.
Mar, Woongchon;Lee, Hyun-Tai;Je, Kang-Hoon;Choi, Hye-Young;Seo, Eun-Kyoung
Archives of Pharmacal Research
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v.26
no.2
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pp.147-150
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2003
To find anticancer agents from higher plants, DNA strand-scission assay method was employed for bioassay-guided fractionation as well as for screening the crude extracts. During the screening, an ethyl acetate extracts of the heartwood of Caesalpinia sappan L. (Leguminosae) exhibited potent DNA strand-scission activity. Therefore, the ethyl acetate extracts of the dried heartwood of C. sappan was subjected to the bioassay-guided fractionation, which led to the isolation of a known compound, brazilin (1) as the active constituent. In addition, caesalpine J (2) was also isolated as an inactive constituent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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