Objectives In this study, we investigated the antimicrobial activity of a 70% ethanol extract of Maneung-hwan (MEH), which is prescribed by practitioners of oriental medicine for use against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Methods The antibacterial activity of MEH against MRSA strains was evaluated using the disc diffusion method, broth microdilution method (minimal inhibitory concentration, MIC), checkerboard dilution test, and time-kill test. The mechanism of action of MEH was investigated by bacteriolysis using detergents or ATPase inhibitors Additionally, mRNA and protein expression were investigated by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot assay, respectively. Results The MIC of MEH was 25~1,600 ㎍/mL against all the tested bacterial strains. We showed that MEH extract exerts strong antibacterial activity. In the checkerboard dilution test, the fractional inhibitory concentration index of MEH in combination with antibiotics indicated synergism or partial synergism against S. aureus. The time-kill study indicated that the growth of the tested bacteria was considerably inhibited after a 24-h treatment with MEH and selected antibiotics. To measure the cell membrane permeability, MEH (3.9 ㎍/mL) was combined with Triton X-100 (TX) at various concentrations N,N-dicyclohexylcarbodimide (DCCD) was also tested as an ATPase inhibitor. TX and DCCD cooperation against S. aureus exhibited synergistic action. Accordingly, the antimicrobial activity of MEH in the context of cell membrane rupture and ATPase inhibition was assessed. Additionally, the expression of genes and proteins associated with resistance was reduced after exposing MRSA to MEH. Conclusions These results suggest that MEH possesses antibacterial activity and acts as a potential natural antibiotic against MRSA.
본 연구에서는 두충나무, 황벽나무 등을 포함하는 수목추출물의 소재특성을 시험하여 화장품 및 피부질환 치료소재로서의 응용 가능성을 조사하였다. 수목추출물의 항산화력은 DPPH 자유라디칼 소거법으로 측정되었으며 저농도에서는 항산화력이 낮았으나, $1000{\mu}g/ml$의 고농도에서는 우수한 항산화제인 비타민 C와 유사하였다. 항균력은 원판확산법으로 측정되었으며, 수목추출물은 피부상재균인 Staphylococcus epidermidis에 대해서는 낮은 항균력을 보이지만, 여드름 유발균인 Propionibacterium acne에 대해서는 높은 항균력을 보여주는 선택성 항균력이 있어, 여드름소재로서 매우 우수한 특성을 나타내었다. 무모생쥐를 이용한 항아토피 시험결과, 수목추출물은 DNCB에 의해 유도된 피부염증을 14일 째 거의 정상상태로 회복시켰으며, 피부내 항체인 IgE의 농도도 대조군에 비해 16% 낮추어주어 항아토피 효과가 우수한 것으로 나타났다. 따라서 수목추출물은 항여드름효과 및 항아토피 효과가 뛰어나서 화장품 혹은 피부질환 치료소재로서 응용 가능성이 매우 높음을 알 수 있었다.
본 연구는 삼나무 부위별 추출물들의 피부사상균 Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum gypseum에 대한 항진균 활성을 평가하였다. 항진균 활성의 평가는 디스크확산법과 한천희석법을 사용하였고 활성 성분의 주성분을 확인하기 위해 GC/MS 분석을 실시하였다. 항진균 활성은 삼나무의 정상재와 흑심재 중 흑심재의 심재가 가장 높은 활성을 보였다. 활성 성분은 n-hexane과 chloroform를 전개용매로 이용하여 TLC를 실시하였다. TLC를 통해 분리된 활성 성분들에 대해 다시 항진균 활성을 측정한 결과 7번째 분획물이 가장 높은 활성을 나타내었다. 분획물에 대하여 GC/MS 분석을 실시한 결과 탄소개수 13개를 가지는 damascone에 탄소 2개가 더해진 sesquiterpene으로 예상되었다. 이밖에 elemol, eudesmol, hinokione 등도 검출되었다.
본 연구는 13과 37종 양치식물의 엽상체(지상부)와 근경의 메탄올 추출물을 대상으로 식품의 오염 및 변질의 원인이 되는 Bacillus subtils, 식중독의 원인이 되는 Escherichia coli, 식중독 및 선회병(listeriosis)의 원인이 되는 Listeria monocytogenes, 피부 여드름의 원인이 되는 Propionibacterium acnes에 대한 항균활성을 탐색하고 항균력이 우수한 천연소재를 선발하기 위하여 시행하였다. $5mg{\cdot}mL^{-1}$의 농도의 추출물을 대상으로 각 미생물에 대하여 50% 이상의 항균활성을 나타낸 양치식물 추출물을 선발하였으며, 선발된 추출물을 2mg/disc의 농도로 조절하여 agar diffusion법으로 항균력을 측정하여 15mm 이상의 억제환을 나타내는 추출물을 선발하였다. 상기의 방법으로 선발된 추출물을 $0.125{\sim}2.000mg{\cdot}mL^{-1}$의 농도로 조절하여 72시간 동안 각 미생육의 생육에 미치는 영향을 분석하여 항균활성이 우수한 양치식물의 추출물을 선발하였다. 연구의 결과, B. subtils의 생육억제에는 야산고비의 성엽과 쇠고비의 근경 추출물, E. coli의 생육 억제에는 설설고사리의 성엽과 나도히초미 및 더부살이고사리의 근경 추출물, L. monocytogenes의 생육억제에는 관중의 성엽과 공작고사리, 꿩고비 및 쇠고비의 추출물이 효과적이었다. 한편 대부분의 양치식물 추출물은 P. acnes의 생육억제 효과가 미비하였으나, 관중과 참지네고사리는 성엽과 근경 모두에서 P. acnes의 생육억제 효과가 매우 우수하였으며, 별도의 제균처리를 하지 않은 관중과 참지네고사리의 메탄올 조추출물의 $MIC_{50}$은 성엽의 추출물에서 66.8과 $80.4{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$, 근경의 추출물에서는 8.8과 $54.2{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$로 나타났다.
Purpose: Essential oils are secondary metabolites of herbs and have antibacterial activities against foodborne pathogens. However, their applications for food protection are limited due to the hydrophobic and volatile natures of essential oils. Methods: In this study, essential oil nanoemulsions of rosemary and lavender were formulated with non-ionic surfactant Tween 80 and water using ultrasonic emulsification, and their antibacterial effects were determined. Results: The antibacterial activities of nanoemulsions were evaluated against 12 strains of 10 bacterial species, and significant antibacterial effects were observed against four Gram-positive and four Gram-negative bacteria but not against Streptococcus mutans and Shigella sonnei. In the disc diffusion test, the diameter of the inhibition zone proportionally increased with the concentration of nanoemulsions. Using cell turbidity measurement, minimum bactericidal concentration (MBC) of the nanoemulsions, which is the lowest concentration reducing viability of the initial bacterial inoculum by ${\geq}99.9%$, was significantly higher than the minimum inhibitory concentration (MIC) of the nanoemulsions. The largest bactericidal effects of lavender and rosemary essential oil nanoemulsions were observed against S. enterica and S. aureus, respectively. Conclusion: Nanoemulsion technique could improve antibacterial activity of essential oil nanoemulsions by increasing the solubility and stability of essential oils. Our findings shed light on the potential use of essential oil nanoemulsions as an alternative to chemical sanitizers in food protection.
항균 활성이 우수한 예덕나무의 75% 에탄올 추출물을 용매 분획 후 일정 수준의 농도로 액체 배지(tryptic soy broth)에 첨가하여 L. monocytogenes 5 균주를 배양시킨 결과 헥산분획물 20 ppm에서 72시간 동안 증식 저해 효과를 나타내었다. 항균 활성이 우수한 예덕나무 헥산 분획물을 silica gel column chromatography로 1회 분획하여 항균 활성이 우수한 획분 M34를 얻었으며 M34 획분은 50 ppm 수준의 농도에서 실험 균주 모두 증식을 저해했다. 획분 M34를 2회 연속 분리하여 소 획분 M34-4-4를 얻은 후 액체 배지에 첨가하여 L. monocytogenes 2 균주를 접종한 후 72시간 배양한 결과 50 ppm 수준의 농도에서 증식 저해 효과가 나타났으며, M34-4-4을 구조 동정한 결과 linolenic acid로 확인되었다.
In this study, antimicrobial resistance of E coli isolated from domestic beef on sale in Busan and Gyeongnam province was investigated from March to October 2007. A total of 600 beef samples were collected for the monitoring of antimicrobial resistance, and 92 (15.3%) strains of E coli were isolated. Antimicrobial resistance test was carried out by agar disc diffusion method with 17 antimicrobials. In general, E coli isolates showed the highest antimicrobial resistance to doxycycline (73.9%), followed by tetracycline (70.7%) andcefazolin (63.0%). Then they showed higher resistance to several antimicrobials like norfloxacin (48.9%). However, They had low antimicrobial resistance to amikacin (4.3%), colistin (1.1%). Of 92 isolates, 82 (89.1%) were resistant to more than 2 antimicrobials. Among 17 antimicrobials examined, tetracyclines were the most resistant, followed by cephalosporins, quinolone. The resistance was seemed to be correlated to amounts of antimicrobial use. In the result of this study, we suggest that there be need to regulate the abuse of antimicrobial on food-producing animals in Korea because the concern on antimicrobial resistant is gradually increased worldwide.
In the study reported here, the antimicrobial and antioxidant activities of the ethanol leaf extract of Dendropanax morbiferus Lev. from Jeju Island was investigated. Of the 14 strains of 12 species of microorganisms tested, the extract exhibited antimicrobial activity observed against seven Gram-positive bacteria of four species, but not against six Gram-negative bacteria and a yeast strain. Using the disc diffusion method, the diameter of the inhibition zone increased with application of the extract with every strain and the highest growth inhibition was exhibited with Staphylococcus aureus KCTC 1916 at 5 mg/ml. The minimal inhibitory concentration of the extract (MIC) by turbidity was 2.5 mg/ml against Bacillus cereus KACC 12672 and 15 mg/ml when with Enterococcus faecalis KCTC 3206. The minimum bacterial concentration (MBC) values defined as being $${\geq_-}99.9%$$ reduction in viable cells against the tested strains was higher than the MIC values. Time killing curves using the optimum MIC were performed on seven strains incubated for 48 hr. The growth of B. cereus KACC 12672 was detected after 12 hr and no significant growth was found in the others strains after 48 hr (p<0.05). The 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) scavenging activity of the ethanol leaf extract was similar to that of butylated hydroxyanisole (BHA) at the same concentration. These results indicate that leaf extract of D. morbiferus Lev. can be utilized as a natural preservative and an antioxidant.
This study was conducted to investigate the antioxidative and antimicrobial activities of Korean dandelion (Taraxacum coreanum). Water extracts, ethanol extracts and methanol extracts were used to examine the free radical scavenging activity, total flavonoid content, total polyphenol content and antimicrobial activity. The free radical scavenging activity, total flavonoid, total polyphenol and total antioxidant activity of the water extracts were higher than those of the other extraction solvents. The antimicrobial activties of Korean dandelion extracts were examined on several food borne illness microorganisms using the paper disc diffusion method. Inhibition zones were observed on Staphylococcus aureus subsp. aureus, Listeria monocytogenes, Bacillus subtilis, Bacillus cereus and Escherichia coli in ethanol extracts. Inhibition zones were also observed on Listeria monocytogenes in water extracts. The physico-chemical properties of Korean dandelion tea according to the roasting time and soaking amount of tea were studied. The pH of the dandelion tea significantly decreased while the soluble solid contents significantly increased with increased roasting time (p<0.01). The lightness of the dandelion tea decreased and the turbidity increased with increased roasting time. In sensory evaluation, the sensory scores for the color, flavor and total acceptability were highest in the 40 min roasted tea. These results suggest that the water extract of Korean dandelion could be used as an antioxidative and antimicrobial functional food source. The optimum roasting time for Korean dandelion tea was 40 min at $200^{\circ}C$.
Objectives : The present study was designed to investigate effects of mixed extracts (9:1, v/v) of Hwangryunhaedoktang, Chamaecyparis obtusa essential oil. We evaluated the antimicrobial and antioxidant activity by manufacturing mixed extracts as the materials for functional medicinal herb cosmetics. Methods : We performed antimicrobial were tested microbes (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Escherichia coli, Candida albicans, Propionibacterium acnes) by disc diffusion method and measure clear zone. Antioxidant activities were measured by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging activity. Results : Antimicrobial activities of mixed extracts against S. epidermideis, P. acnes, S. aureus, E. coli, and Candida. A were $10.9{\pm}3.0mm$, $16.9{\pm}2.0mm$, $9.2{\pm}2.0mm$, $10.3{\pm}1.0mm$, $11.8{\pm}3.0mm$ respectively. The Chamaecyparis obtusa essential oil had the highest antimicrobial activities against S. epidermideis, P. acnes, S. aureus, E. coli, and Candia. A and clear zone of microbes ware $16.7{\pm}3.0mm$, $28.8{\pm}0.2mm$, $15.9{\pm}2.0mm$, $11.5{\pm}1.0mm$, $16.3{\pm}3.0mm$. Hwangryunhaedoktang extract showed antimicrobial activity but only P. acnes and S. aureus The antioxidant activities of the mixed extracts were tested through the evaluation of DPPH radical scavenging activity. The 100 % mixed extracts were found to have 90 % DPPH radical scavenging activity. The mixed extracts was presented similar antioxidant activities compared with that of ascorbic acid. As a result, A mixture extract is expected to have antimicrobial effects and free radical scavenging activity was found. Conclusions : Accordingly, It can be concluded that mixed extracts has the potential to cosmetic material.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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