Legionella pneumophila is an opportunistic pathogen that survives and proliferates within protists such as Acanthamoeba spp. in environment. However, intracellular pathogenic endosymbiosis and its implications within Acanthamoeba spp. remain poorly understood. In this study, RNA sequencing analysis was used to investigate transcriptional changes in A. castellanii in response to L. pneumophila infection. Based on RNA sequencing data, we identified 1,211 upregulated genes and 1,131 downregulated genes in A. castellanii infected with L. pneumophila for 12 hr. After 24 hr, 1,321 upregulated genes and 1,379 downregulated genes were identified. Gene ontology (GO) analysis revealed that L. pneumophila endosymbiosis enhanced hydrolase activity, catalytic activity, and DNA binding while reducing oxidoreductase activity in the molecular function (MF) domain. In particular, multiple genes associated with the GO term 'integral component of membrane' were downregulated during endosymbiosis. The endosymbiont also induced differential expression of various methyltransferases and acetyltransferases in A. castellanii. Findings herein are may significantly contribute to understanding endosymbiosis of L. pneumophila within A. castellanii.
The efficiency of animal production using cloning technology is relatively low. It is considered that the nuclear transferred (NT) embryos proceed inappropriate reconstruction with donor-recipient cell, which lead to a abnormal embryo development, and differential expression of mRNA transcript. Especially, the expression of mRNA on peri-implantation stage embryos is very important factor to decide success of implantation and ongoing pregnancy. (omitted)
Functional genomics aims at uncovering useful information carried on genome sequences and at using it to understand the mechanisms of biological function. Elucidating the unknown biological functions of new genes based upon the genomics rationales will greatly speed up the extensive understanding of biocatalysis and biodegradation in biological world including microorganisms. DNA microarrays generate a system for the simultaneous measurement of the expression level of thousands of genes in a single hybridization assay. Their data mining (transcriptome) strategy has two categories: differential gene expression and coordinated gene expression. Furthermore, measurement of proteins (proteome) generates information on how the transcribed sequences end up as functional characteristics within the cell, and quantitation of metabolites yields information on how the functional proteins act to produce energy and process substrates (metabolome). Various composite functional genomics databases containing genetic, enzymatic and metabolic information have been developed and will contribute to the understanding of the life blue print and the new discoveries and practices in biocatalysis and biodegradation that could enrich their industrial and environmental applications.
1. Leptin itself was not expressed in mouse uterine tissues. 2. Leptin receptors were not expressed in nonpregnant and little expressed in 3.5 day of pregnant uterine tissues. However, there was a signal in 4.5 and 5.5 day of tissues. 3. The expression level of leptin receptor variants in the implantation sites at around the time of initial embryo attachment (day 4.5 of pregnancy) and during the actual implantation period (day 5.5 of pregnancy) was much lower than that in the interimplantation 4. Finding of the differential expression of leptin receptors in implantation sites compared to interimplantation sites suggests that leptin - leptin receptor system may be one of the delicate regulators in the molecular mechanism of the implantation process.
Hepatitis C virus (HCV) has genetic diversity like most of RNA viruses. HCV major genotypes are classified into several subtypes which are further divided into quasispecies having, genetically different but closely related variants. The HCV core that is a nucleocapsid protein located at the amino terminus of the viral polyprotein is relatively a conserved protein among the HCV isolates and thus it has been one of plausible targets for anti-HCV drug development. However, different quasispecies of HCV core gene have also been found. In this study, we compared the expression level of core protein between two different quasispecies of HCV genotype 1b. Our data demonstrate that a little differences of amino acid sequence lead to substantial difference of expression level. It might be another important reason of different pathogenesis among HCV infected patients.
Background: Current management strategies attempt to diagnose rheumatoid arthritis (RA) at an early stage. Transcription profiling is applied in the search for biomarkers for detecting early-stage disease. Even though gene profiling has been reported using several animal models of RA, most studies were performed after the development of active arthritis, and conducted only on the peripheral blood and joint. Therefore, we investigated gene expression during the initial phase of collagen-induced arthritis (CIA) before the arthritic features developed in the thymus in addition to the peripheral blood and synovium. Methods: For gene expression analysis using cDNA microarray technology, samples of thymus, blood, and synovium were collected from CIA, rats immunized only with type II collagen (Cll), rats immunized only with adjuvant, and unimmunized rats on days 4 and 9 after the first immunization. Arrays were scanned with an Illumina bead array. Results: Of the 21,910 genes in the array, 1,243 genes were differentially expressed at least 2-fold change in various organs of CIA compared to controls. Among the 1,243 genes, 8 encode T-cell receptors (TCRs), including CD3${\zeta}$, CD3${\delta}$, CD3${\varepsilon}$, CD8${\alpha}$, and CD8${\beta}$ genes, which were down-regulated in CIA. The synovium was the organ in which the genes were differentially expressed between CIA and control group, and no difference were found in the thymus and blood. Further, we determined that the differential expression was affected by adjuvant more than Cll. The differential expression of genes as revealed by real-time RT-PCR, was in agreement with the microarray data. Conclusion: This study provides evidence that the genes encoding TCRs including CD3${\zeta}$, CD3${\delta}$, CD3${\varepsilon}$, CD8${\alpha}$, and CD8${\beta}$ genes were down-regulated during the initial phase of CIA in the synovium of CIA. In addition, adjuvant played a greater role in the down-regulation of the CD3 complex compared to CII. Therefore, the down-regulation of TCR gene expression occurred dominantly by adjuvant could be involved in the pathogenesis of the early stage at CIA.
eCG는LH, FSH및 TSH와 같이 당단백질 호르몬에 속하고, 당쇄가 많이 첨가된 $\alpha$와 $\beta$-subunits의 비공유결합으로 구성되어 있고, 말에서 보다 다른 동물에서 FSH와 LH의 이중 생리활성을 나타내는 아주 특이한 성선 자극 호르몬이다. eCG는 임신 40~130일 사이에 말의 자궁내막배의 영양막세포에서 합성ㆍ분비된다. 따라서 본 연구에서는 eCG, eLH 및 eFSH의 각각 subunits mRNA발현을 태반과 뇌하수체에서 분석하였다. mRNA의 추출은 임신 70일의 태반과 27개월된 숫컷말의 뇌하수체에서 분리하였다. 말 태반을 이용한eCG mRNA발현의 Northern blotting분석결과 $\beta$ subunit가 $\alpha$ subunit보다 아주 많이 발현되었으며, 또한 뇌하수체에서 $\alpha$-, LH $\beta$-, FSH $\beta$-subunit의 분석결과 $\alpha$ subunit는 약 0.8 kb, FSH $\beta$ subunit는 1.8 kb의 크기로 발현되었는데, 이러한 FSH $\beta$ subunit는 cloning되어진 cDNA의 크기와 일치한다. 뇌하수체 전엽에서는 $\alpha$ subunit가 LH $\beta$ subunit와 FSH $\beta$ subunit보다 현저히 많이 발현된다는 사실이 밝혀졌다. 따라서, 태반과 뇌하수체에서 발현되는 각각 subunit의 mRNA는 독립적으로 조절되어 결과적으로 발현량에 차이가 나타난다고 시사되어진다.
볼락의 성장단계에 따른 차등발현 유전자를 탐색하기 위하여 6개월령 및 18개월령 근육조직을 사용하여 subtracted cDNA library를 제작하였고, 각각의 연령에서 발현량 차이를 나타낸 202개의 cDNA 단편을 확보하였으며, 발현량 차이가 뚜렷한 32개의 cDNA 클론은 성장단계별 특이발현 후 보유전자로 선발하여 염기서열을 분석하였다. Myosin, adenylate kinase, calsequestrin, dystrobrevin beta, diphosphate kinase 유전자는 6개월령 근육조직에서 발현량이 많았으며, desmin, TGFBR2 (transforming growth factor-beta receptor), creatine kinase (muscle type), cathepsin D 유전자는 18개월령 근육조직에서 발현량이 많았다. 볼락의 성장초기와 성장절정기에서 차등발현 양상을 나타낸 유전자는 6, 18, 30, 42개월령 근육조직에서 연령 증가에 따른 발현양상을 분석하였으며, dystrobrevin beta와 diphosphate kinase-Z1은 6개월령 이후에는 발현량이 급격히 감소하여 18개월령, 30개월령 및 42개월령에서는 발현량이 극히 적었으며, creatine kinase (muscle type)와 cathepsin D 유전자는 연령 이 증가함에 따라 발현량이 증가되어 18개월령 이후, 30개월령과 42개월령 근육조직에서도 발현량이 많았다. 이와 같이 성장단계에 따른 차등발현 유전자를 탐색하고 연령 증가에 따른 발현양상을 비교 분석한 결과로부터 본 연구에서는 어류의 성장 초기단계 근육조직에서는 근육수축 관련 유전자가 많이 발현되고, 성장 절정기에는 근육 내 에너지 양 조절 관련 유전자가 많이 발현되는 것을 확인하였다.
Lee, Jung Won;Kim, Nayoung;Park, Ji Hyun;Kim, Hee Jin;Chang, Hyun;Kim, Jung Min;Kim, Jin-Wook;Lee, Dong Ho
Journal of Cancer Prevention
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제22권1호
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pp.33-39
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2017
Background: MicroRNAs (miRNAs) are key post-translational mechanisms which can regulate gene expression in gastric carcinogenesis. To identify miRNAs responsible for gastric carcinogenesis, we compared expression levels of miRNAs between gastric cancer tissue and non-cancerous gastric mucosa according to Helicobacter pylori status. Methods: Total RNA was extracted from the cancerous regions of formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of H. pylori-positive (n = 8) or H. pylori-negative (n = 8) patients with an intestinal type of gastric cancer. RNA expression was analyzed using a 3,523 miRNA profiling microarray based on the Sanger miRBase. Validation analysis was performed using TaqMan miRNA assays for biopsy samples from 107 patients consisted of control and gastric cancer with or without H. pylori. And then, expression levels of miRNAs were compared according to subgroups. Results: A total of 156 miRNAs in the aberrant miRNA profiles across the miRNA microarray showed differential expression (at least a 2-fold change, P < 0.05) in cancer tissue, compared to noncancerous mucosa in both of H. pylori-negative and -positive samples. After 10 promising miRNAs were selected, validations by TaqMan miRNA assays confirmed that two miRNAs (hsa-miR-135b-5p and hsa-miR-196a-5p) were significantly increased and one miRNA (hsa-miR-145-5p) decreased in cancer tissue compared to non-cancerous gastric mucosa at H. pylori-negative group. For H. pylori-positive group, three miRNAs (hsa-miR-18a-5p, hsa-miR-135b-5p, and hsa-miR-196a-5p) were increased in cancer tissue. hsa-miR-135b-5p and hsa-miR-196a-5p were increased in gastric cancer in both of H. pylori-negative and -positive. Conclusions: miRNA expression of the gastric cancer implies that different but partially common gastric cancer carcinogenic mechanisms might exist according to H. pylori status.
Purpose: These experiments were undertaken to evaluate the effect of Onpoeum on ovarian functions and differential gone expressions related with cell viabilities caspase-3, MAPK and MPG in female mice. Methods: We administered the Onpoeum to 6-week-old female ICR mice for 4, 8, or 12 days. With different concentration of Onpoeum, the female mice were injected PMSG and hCG for ovarian hyperstimulation. The mice divided into 3 different groups for each experiment. We chose the Caspase-3 for cell apoptosis, MAPK and MPG genes for cell viability and DNA repair. Results: In case of 4, 8, 12 day of Onpoeum, we were examined the mean number of total ovulated oocytes and the number of morphologically normal oocytes. We were also examined the embryonic developmental competence in vitro. In audition we were examined the differential expression of cell apoptosis, viability and DNA repair related genes, Caspase-3, MAPK and MPG according to concentration and duration of Onpoeum. From these results showed that the administration of Onpoeum played a role of prevention of cell apoptosis and DNA damages and also increased cell proliferation resulted in ovarian functions. Conclusion: It is suggested that the medication of Onpoeum may have beneficial effect on reproductive functions of female mice via prevention of cell apoptosis and DNA damaging and promotion of cell proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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