There are replete numbers of reports which have apparently shown that established patterns of methylation are critical for normal mammalian development. Here, we report expression of the DNA methyltransferases (Dnmts) family during mouse early development. Transcription of Dnmt1o occurs in one-cell and morula stage embryos, whereas Dnmtls transcripts were detectable in all cells and tissues examined during the study. Dnmt3a1 transcript was detected in all cells and Dnmt3a2 transcript was particularly detected in the oocyte and 1-cell stages. Low level Dnmt3b1 transcripts were expressed ubiquitously in oocyte, 1-cell, and preimplantation embryos except $2{\sim}4cell$ stages. Dnmt3b3 transcripts were only detected in E7.5 embryo and ovary. Furthermore, Dnmt31 transcripts were detectable in all cells and tissues examined. Unlike Dnmtl, both Dnmt3a and Dnmt3b proteins existed in the nucleus of preimplantation embryos till the morula stage. These Results suggest that differences Dnmts expression level exist and genomic DNA methylation patterns may be determined partly through differential expression of Dnmts during early development.
Hwang, Hye-Jin;Baek, Yu-Mi;Kim, Sang-Woo;Kumar, G. Suresh;Cho, Eun-Jae;Oh, Jung-Young;Yun, Jong-Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.12
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pp.2005-2017
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2007
Diabetic nephropathy remains a major cause of morbidity and mortality in the diabetic population and is the leading cause of end-stage renal failure. Despite current therapeutics including intensified glycemic control and blood pressure lowering agents, renal disease continues to progress relentlessly in diabetic patients, albeit at a lower rate. Since synthetic drugs for diabetes are known to have side effects, fungal mushrooms as a natural product come into preventing the development of diabetes. Our previous report showed the hypoglycemic effect of extracellular fungal polysaccharides (EPS) in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. In this study, we analyzed the differential expression patterns of rat kidney proteins from normal, STZ-induced diabetic, and EPS-treated diabetic rats, to discover diabetes-associated proteins in rat kidney. The results of proteomic analysis revealed that up to 500 protein spots were visualized, of which 291 spots were differentially expressed in the three experimental groups. Eventually, 51 spots were statistically significant and were identified by peptide mass fingerprinting. Among the differentially expressed renal proteins, 10 were increased and 16 were decreased significantly in diabetic rat kidney. The levels of different proteins, altered after diabetes induction, were returned to approximately those of the healthy rats by EPS treatment. A histopathological examination showed that EPS administration restored the impaired kidney to almost normal architecture. The study of protein expression in the normal and diabetic kidney tissues enabled us to find several diabetic nephropathy-specific proteins, such as phospholipids scramblase 3 and tropomyosin 3, which have not been mentioned yet in connection with diabetes.
Kim, Seung-Chang;Jang, Hong-Chul;Lee, Sung-Dae;Jung, Hyun-Jung;Park, Jun-Cheol;Lee, Seung-Hwan;Kim, Tae-Hun;Choi, Bong-Hwan
Journal of Animal Science and Technology
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v.56
no.4
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pp.12.1-12.7
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2014
This study investigated changes in gene expression by dietary fat source, i.e., beef tallow, soybean oil, olive oil, and coconut oil (each 3% in feed), in both male and female growing-finishing pigs. Real-time PCR was conducted on seven genes (insulin receptor; INSR, insulin receptor substrate; IRS, phosphatidylinositol (3,4,5)-triphosphate; PIP3, 3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1; PDK1, protein kinase B; Akt, forkhead box protein O1; FOXO1 and cGMP-inhibited 3', 5'-cyclic phosphodiesterase; PDE3) located upstream of the insulin signaling pathway in the longissimus dorsi muscle (LM) of pigs. The INSR, IRS, PIP3, and PDE3 genes showed significantly differential expression in barrow pigs. Expression of the PIP3 and FOXO1 genes was significantly different among the four dietary groups in gilt pigs. In particular, the PIP3 gene showed the opposite expression pattern between barrow and gilt pigs. These results show that dietary fat source affected patterns of gene expression according to animal gender. Further, the results indicate that the type of dietary fat affects insulin signaling-related gene expression in the LM of pigs. These results can be applied to livestock production by promoting the use of discriminatory feed supplies.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.38
no.2
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pp.78-84
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2012
Objectives: Odontogenic keratocysts (OKCs) have a tendency to recur and possess an aggressive nature. the aim of the present study was to evaluate cytokeratin (CK) expression patterns as a method for the differentiation between dentigerous cysts (DCs) and OKCs, as their histomorphologic appearance are often indistinguishable. Materials and Methods: Formalin-fixed, paraffin-embedded tissue sections of 43 OKCs and 38 DCs were immunohistochemically analyzed with i-solution in a quantitative manner in order to evaluate the immunoreactivity of CK 10, 16 and 17. Results: CK 10 expression was evident in 79.1% of OKCs but found in only 18.4% of DCs (P<0.05), and CK 10 expression was observed to occur more frequently in OKCs (mean 25.45%) than in DCs (2.19%) (P<0.05). The expression of CK 16 was evident in 79.1% of OKCs but found in only 7.9% of the DCs (P<0.05) and CK 16 expression was observed to occur more frequently in OKCs (mean 4.33%) than in the DCs (0.61%) (P<0.05). The expression of CK 17 was evident in 88.4% of OKCs but seen in only 15.7% of the DCs (P<0.05) and CK 17 expression was observed to occur more frequently in OKCs (mean 31.11%) than in the DCs (2.37%) (P<0.05). Conclusion: The immunohistochemical detection of CK 10, 16 and 17 can be utilized as a valuable biomarker for use in distinguishing between OKCs and DCs, which have clinically significant differential diagnoses.
Kwak, Dong Hoon;Kim, Sung Min;Lee, Dea Hoon;Kim, Ji Su;Kim, Sun Mi;Lee, Seo Ul;Jung, Kyu Yong;Seo, Byoung Boo;Choo, Young Kug
Molecules and Cells
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v.20
no.3
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pp.354-360
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2005
Neuronal damage subsequent to transient cerebral ischemia is a multifactorial process involving several overlapping mechanisms. Gangliosides, sialic acid-conjugated glycosphingolipids, reduce the severity of acute brain damage in vitro. However their in vivo effects on the cerebral cortex damaged by ischemic infarct are unknown. To assess the possible protective role of gangliosides we examined their expression in the cerebral cortex damaged by ischemic infarct in the rat. Ischemia was induced by middle cerebral artery (MCA) occlusion, and the resulting damage was observed by staining with 2, 3, 5-triphenylterazolium chloride (TTC). High-performance thin-layer chromatography (HPTLC) showed that gangliosides GM3 and GM1 increased in the damaged cerebral cortex, and immunofluorescence microscopy also revealed a significant change in expression of GM1. In addition, in situ hybridization demonstrated an increase in the mRNA for ganglioside GM3 synthase. These results suggest that gangliosides GM1 and GM3 may be synthesized in vivo to protect the cerebral cortex from ischemic damage.
Background: The human mic2 gene is a pseudoautosomal gene that encodes a cell surface antigen, CD99. High levels of CD99 constitute a tumor marker in Ewing s sarcoma (ES). We have recently demonstrated that CD99-induced apoptosis occurs only in undifferentiated ES cells, not in differentiated ES cells, raising the possibility of the involvement of CD99 in neural ontogeny. Methods: To elucidate the relations between the expression of CD99 and the differentiation of neural cells and the mechanism by which the expression of CD99 is regulated, we analyzed the differential patterns of CD99 expression in SH-SY5Y by treatment of 12-O-tetradecanoyl-13-phorbol acetate (TPA) and retinoic acid. In addition, to explore the transcriptional activity of CD 99 during neural cell differentiation, SH-SY5Y cells were transiently transfected with a CD99 promoter-driven luciferase construct, and treated with the inducers. Results: In immunoblotting and flow cytometry, the expression level of CD99 was increased on differentiated SH-SY5Y cells induced by TPA and retinoic acid. The luciferase activity was elevated by the treatment with TPA, known to mature SH-SY5Y cells toward a sympathetic neuronal lineage, whereas retinoic acid inducing a sympathetic chromaffin lineage displayed little effect. Conclusion: The result indicates that CD99 might be expressed only on cells maturing toward a neuronal lineage among differentiating primitive neuronal cells. In addition, the expression of CD99 seems to be regulated at the transcriptional level during the differentiation.
Seo, Hee-Jung;Lee, Seong-Kyu;Baik, Haing-Woon;Cheon, Yong-Pil;Chun, Tae-Hoon;Choi, In-Ho;Lee, Ki-Ho
Journal of Animal Science and Technology
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v.53
no.3
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pp.195-202
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2011
Maintenance of adequate telomere length in developing cells is the most important concern to preserve the integrity of the genome. The length of telomere is strictly regulated by numerous telomere-binding proteins and/or interacting factors. Even though the expression of telomerase in the male reproductive tract has been characterized, developmental expressional profiling of telomerase and other telomere-associated proteins has not been determined in detail. The present study was attempted to examine expression patterns of catalytic subunit (Tert) and RNA component (Terc) of telomerase and two telomerase associated factors, telomerase associated protein 1 (Tep1) and TERF1 (TRF1) interacting nuclear factor 2 (Tinf2) in the testis and seminal vesicle of male rat during postnatal development. The real-time PCR analysis was utilized to quantify mRNA expression of molecules. The abundance of Tep1 mRNA in the testis and seminal vesicle was the highest at 5 months of age. Expressional fluctuation of Tinf2 during postnatal development was found in the testis, while expression of Tinf2 in the seminal vesicle was gradually increased until 5 months of age and then significantly decreased later. mRNA level of Tert gene in the testis was significantly increased at the adult and the elder, while the highest expression of Tert gene in the seminal vesicle was found at 5 months of age. Expression of Terc transcript in the testis and seminal vesicle was the highest at 5 months of age, followed by significant reduction at 1 and 2 years of ages. Such differential gene expression of telomere-associated factors and telomerase components in different male reproductive tissues during postnatal development indicates that maintenance of telomere length would be regulated in tissue- and/or age-specific manners.
In Erhualian and Yorkshire reciprocal cross $F_1$ pig populations, we examined the mRNA expression characteristic of liver-derived IGF-1, IGF-1R, IGF-2, IGF-2R and IGFBP-3 during the embryonic and postnatal developmental periods (E50, E70, E90, D1, D20, D70, D120 and D180). Our results demonstrated that the IGF-system genes mRNA levels exhibited an ontogenetic expression pattern, which was potentially associated with the porcine embryonic development, postnatal growth, organogenesis and even the initiation and acceleration of puberty. The expression pattern of IGF-system genes showed variation in the reciprocal cross ($F_1$ YE and EY pigs). This study also involved the expression features of imprinted genes IGF-2 and IGF-2R. The parent-of-origin effect of imprinted genes was reflected by their differential expression between the reciprocal crosses populations. The correlation analysis also indicated that the regulatory network and mechanisms involved in the IGF system were a complex issue that needs to be more fully explored. A better understanding of IGF system components and their interactive mechanisms will enable researchers to gain insights not only into animal organogenesis but also into somatic growth development and even reproduction.
Seo, Hee-Jung;Seon, Chan-Wook;Choi, In-Ho;Cheon, Yong-Pil;Cheon, Tae-Hoon;Lee, Ki-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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v.34
no.2
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pp.103-109
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2010
Functional regulation of a specific tissue or organ is controlled by a number of ways, including local cell-cell interaction. Of several forms of cell-cell junctional complexes, gap junctions are caught a great attention due to a formation of direct linkage between neighboring cells. Gap junctions are consisted of connexin (Cx) isoforms. In the present study, we evaluated expressional profiling of Cx isoforms in the rat initial segment (IS) of the male reproductive tract at different postnatal ages. The presence and expression of 13 Cx isoform mRNAs were determined by semi-quantitative real-time PCR analyses. A total of 8 Cx isoform mRNAs were detected in the IS of the male rats during postnatal development. The highest level of Cx30.3 mRNA was found at 5 months of age, while abundance of Cx31 mRNA was the highest at 1 year of age. Expression of Cx31.1 gene was relatively consistent during the postnatal development. Fluctuation of Cx32 and 37 gene expression was observed during the postnatal period. Significant elevation of Cx40 mRNA abundance was detected at 25 days of age and older ages. Expression patterns of Cx43 and 45 genes were similar with the highest level at 2 weeks of age, followed by gradual decreases at older ages. These results indicate differential regulation on expression of Cx isoforms in the rat IS during postnatal development. A complicated regulation of gene expression of Cx isoforms in the IS at different postnatal ages is suggested.
Malaria is a life-threatening disease, and Africa is still one of the most affected endemic regions despite years of policy to limit infection and transmission rates. Further, studies into the variable efficacy of the vaccine are needed to provide a better understanding of protective immunity. Thus, the current study is designed to delineate the effect of each dose of vaccine on the transcriptional profiles of subjects to determine its efficacy and understand the molecular mechanisms underlying the protection this vaccine provides. Here, we used gene expression profiles of pre and post-vaccination patients after various doses of RTS,S based on samples collected from the Gene Expression Omnibus datasets. Subsequently, differential gene expression analysis using edgeR revealed the significantly (false discovery rate < 0.005) 158 downregulated and 61 upregulated genes between control vs. controlled human malaria infection samples. Further, enrichment analysis of significant genes delineated the involvement of CCL8, CXCL10, CXCL11, XCR1, CSF3, IFNB1, IFNE, IL12B, IL22, IL6, IL27, etc., genes which found to be upregulated after earlier doses but downregulated after the 3rd dose in cytokine-chemokine pathways. Notably, we identified 13 cytokine genes whose expression significantly varied during three doses. Eventually, these findings give insight into the dual role of cytokine responses in malaria pathogenesis. The variations in their expression patterns after various doses of vaccination are linked to the protection as it decreases the severe inflammatory effects in malaria patients. This study will be helpful in designing a better vaccine against malaria and understanding the functions of cytokine response as well.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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