From the soils of soybean fields in Cotton Branch Station (CBS) and Pine Tree Station (PTS), Arkansas, USA, various single spore isloates of sudden death syndrome (SDS) pathogen were obtained on modified Nash & Snyder's medium (MNSM) with dilution plating technique and transferred to potato dextrose agar (PDA) medium to identify the cultural colony shape. The colony shapes of these isolates resembled F. solani isolate 171 which was white and chalky shaped on MNSM and most of them had unique form of morphology which produced white margin and blue center colony on PDA. Although, some of these isolates had more dark blue or showed slightly different color, all isolates that were selected randomly for green-house inoculation assay produced typical foliar symptoms on leaves of soybean, Hartz 6686. To determine the genetic differences among the isolates, mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) was conducted with fourty isolates from both fields, using mtDNA probes, 2U18 and 4U40, derived from Colletotrichum orbiculare. We obtained distinctive RFLPs in each treatment of restriction enzyme, EcoRI and HaeⅢ. Isolates, 11-2-5 and 14-3-1-1, from CBS and isolates, 104-3-1-2 and 701-1-5-1, from PTS showed different band patterns from 171 in both or in either treatment of restriction enzymes. Even if some of these isolates showed heterogeneous, they were more closer to 171 than PN603. And, also, rest of the thirty-six isolates had exactly same polymorphisms as 171 in each treatment of restriction enzyme. Although, some of the isolates showed the different morphological shape on PDA and slightly different band patterns on RFLPs, all of the isolates selected on MNSM due to their distinctive colony shape from other fungi produced the typical foliar symptoms on soybean leaves in greenhouse inoculation assay. It might be suggested that these isolates were not genetically different from check isolate 171 and they were unique strain of F. solani.
Twelve mecoprop-degrading bacteria were isolated from soil samples, and their genetic and phenotypic characteristics were investigated. Analysis of 16S rDNA sequences indicated that the isolates were related to members of the genus Sphingomonas. Ten different chromosomal DNA patterns were obtained by polymerase-chain-reaction (PCR) amplification of repetitive extragenic palindromic (REP) sequences from the 12 isolates. The isolates were found to be able to utilize the chiral herbicide meco-prop as a sole source of carbon and energy. While seven of the isolates were able to degrade both (R)-and (S)-mecoprop, four isolates exhibited enantioselective degradation of the (S)-type and one isolate could degrade only the (R)-enantiomer. All of the isolates were observed to possess plasmid DNAs. When certain plasmids were removed from isolates MPll, MP15, and MP23, those strains could no longer degrade mecoprop. This compelling result suggests that plasmid DNAs, in this case, conferred the ability to degrade the herbicide. The isolates MP13, MP15, and MP24 were identified as the same strain; however, they exhibited different plasmid profiles. This indicates that these isolates acquired dif-ferent mecoprop-degradative plasmids in different soils through natural gene transfer.
Variability in virulence of Calonectria ilicicola isolates form different hosts and geographic origin provides important information for breeding cultivars resistant to red crown rot. A wide range in virulence for 25 isolates of C. ilicicola from soybean and peanut was observed on six soybean cultivars. Soybean isolates were pathogenic on soybean although some were less virulent. Virulence of isolates was not affected greatly by cultivar and relatively consistent regardless of virulence level. Soybean isolates were more virulent on soybean than were peanut isolates. When virulence of two soybean and tow peanut isolates was compared between laboratory and greenhouse tests, it was stable across a range of cultivars. Mycelial growth of isolates from either soybean or peanut was reduced significantly on potato dextrose chlorate showed significant reduction of fungal growth than isolates from peanut did although their growth on potato dextrose agar was not significantly different. Evidence for physiologic specialization was not recognized in this system. However, the findings that soybean isolates of C. ilicicola were more virulent on soybean and reduction of fungal growth on potato dextrose chlorate than were peanut isolates suggest that host specialization may exist in this fugus.
Five isolates of Belonolaimus longicaudatus collected from different geographical locations and hosts in southeastern United Stated were tested to determine their host specificity and reproductive compatibility. Both the Georgia and Lake Alfred isolates reproduced well on cotton, bermudagrass, and citrus. On the other hand, the North Carolina and Gainesville isolates reproduced poorly on all crops. The Hastings isolate reproduced well on cotton and potato. The Lake Alfred and Hastings isolates showed greater host specificity to their original host of citrus and potato, respectively. Except for the Hastings isolate, all isolates reproduced poorly on potato, which clearly differentiated the Hastings isolate from others (P>0.05). Hybridization test presented reproductive compatibility among five different isolates of B. longicaudatus by generating F$_1$ offspring. The Gainesville males showed comparatively poor ability to fertilize other females and generated a lower number of offspring. In contrast, the North Carolina males were attracted by all the other isolates of sting nematode, and produced the highest number of juveniles.
Ten isolates of the orchid mycorrhizal fungi were isolated from the roots of Korean native orchid plants (Cymbidium goeringii) which inhabitate mainly in southern and western areas of Korea. The growth rates and color of the isolates in potato dextrose agar (PDA) were various. Microscopic observations of the hyphae isolated were identified as Rhizoctonia repens and R. endophytica var endophytica or their related species. R. repens was isolated from the roots of the Korean native orchids, but R. endophytica var endophyica was only isolated from the roots of the commercial orchids introduced from foreign countries. Also, the polymorephic patterns of genomic DNA extracted from selected isolates were compared with those of DNA extracted from the orchid mycorrhizal fungi isolated previously and similar band patterns were observed among those isolates. Five isolates of R. repens were selected and cultured at the oatmeal agar for investigating their symbiosis with orchid plants. The symbiotic specificity between orchid plants and isolated orchid mycorrhizal fungi was observe by growing orchids about six months in the greenhouse. The symbiotic responses of the commercial orchid plants with selected isolates were quite different form different isolates due to the genetic variations.
The isolates of Rhizopus collected from Korean traditional fermented food meju and nuruk, were compared with the well known species of Rhizopus donated. The isolates of Rhizopus were identified with the numerical analyses calculated from RAPD-DNA bands, and confirmed with the microscopic observations of morphological features on PDA. The isolates of R. oryzae purchased were segregated through the results of RAPD or the morphological features. The species of R. nigricans, known as an illegitimate species, were different from those of R. stolonife and it is estimated that they are species of Rhizopus, again. According to microscopic observations and the result of RAPD, Some isolates of R. oryzae purchased belong to R. nigricans and are completely different from R. oryzae in their growth. The isolates of R. nigricans included with several isolates of R. oryzae identified for the different phenotypes and were heterogenous. The isolate of R. oligosporus were speculated to be different from morphological features of Rhizopus, but to be similar to the species of Absidia on the apophysis of sporangium. Its sporangiophore or mycelium was observed to be dark black, but the sporangia were not in those of R. oligosporus. The isolates collected from Korean traditional nuruk showed genetic diversity, and also considered to be different tastes in Korean rice wines.
Wakabayashi, Chizuha;Lim, Hyunju;Shin, Min Jun;Choi, Myoung Gwang;Kim, Min Sun;Kim, Ki Hong
한국어병학회지
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제31권1호
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pp.15-21
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2018
Differences in in vivo virulence and in sensitivity to drugs among different isolates of Miamiensis avidus were analyzed. The isolate III showed the highest resistance against the scuticocidal activity of olive flounder (Paralichthys olivaceus) serum, and induced the highest mortalities of olive flounder fingerlings. The isolate II showed significantly higher serum resistance than the isolate I, but in vivo virulence of isolate II was not significantly different from that of isolate I. The secreted proteinases activity of isolate III was significantly higher than that of isolate I and II, and the activity was significantly reduced by the addition of E-64, a cysteine proteinases inhibitor. There were no differences among isolates in the sensitivity to doxycycline, however, there were significant differences in sensitivities to mebendazole and bithionol. These results suggest that the different characteristics of different M. avidus isolates should be taken into consideration for the development of control measures against scuticociliatosis.
Recent trends of malaria in Thailand illustrate an increasing proportion of Plasmodium vivax, indicating the importance of P. vivax as a major causative agent of malaria. P. vivax malaria is usually considered a benign disease so the knowledge of this parasite has been limited, especially the genetic diversity and genetic structure of isolates from different endemic areas. The aim of this study was to examine the population genetics and structure of P. vivax isolates from 4 provinces with different malaria endemic settings in Thailand using 6 microsatellite markers. Total 234 blood samples from P. vivax mono-infected patients were collected. Strong genetic diversity was observed across all study sites; the expected heterozygosity values ranged from 0.5871 to 0.9033. Genetic variability in this study divided P. vivax population into 3 clusters; first was P. vivax isolates from Mae Hong Son and Kanchanaburi Provinces located on the western part of Thailand; second, Yala isolates from the south; and third, Chanthaburi isolates from the east. P. vivax isolates from patients having parasite clearance time (PCT) longer than 24 hr after the first dose of chloroquine treatment had higher diversity when compared with those having PCT within 24 hr. This study revealed a clear evidence of different population structure of P. vivax from different malaria endemic areas of Thailand. The findings provide beneficial information to malaria control programme as it is a useful tool to track the source of infections and current malaria control efforts.
Characteristics of the food isolates and the clinical specimens isolates of E. coli harboring virulence factor and their correlations were analyzed. The predominant serogroup were 08 and 027 in the food isolates and 06 and 018 in the clinical isolates, respectively, showing the different patterns in serogrouping between them. In the test of antibiotic susceptibility, the food isolates were resistant to cephalothin, streptomycin, tetracycline and minocycline, and the clinical isolates were resistant to ampicillin, carbenicillin, streptomycin, cephalothin, trimethoprim/sulfamethoxazole, tetracyclino and minocycline, respectively. It shows that E.coli isolated from food sources and clinical specimens might be correlated. Plasmid profile in the food and clinical isolates showed wide diversity. Especially, large sized plasmid DNA such as 60 MDa, 90 MDa and 120 MDa were observed. The plasmid DNA (60 MDa) containing a gene encoding hemolysin was found in 43% of the food isolates and 35% of the clinical isolates. To study chromosomal homology, PFGE analysis was performed, showing different restriction patterns by Xbal. This result indicates that there were no genetic correlations between the foods and the clinical isolates.
Specimens collected from various pyogenic lesions of dogs were culturally examined for staphylococci and all staphylococcal isolates obtained from the specimens were also tested for susceptibility to 14 antimicrobial agents. A total of 123 isolates of staphylococci were identified. Of these, 120 were Staphylococcus intermedius and 3 were S aureus. All isolates were susceptible to oxacillin, cefazolin, cephalothin and amikacin, whereas more than 85% of the isolates were resistant to ampicillin, penicillin G and tetracycline. S intermedius isolates could be divided into 8 different biotypes by biotyping with the most common type accounting for 66.7% of the isolates. One hundred and seventeen(97.5%) isolates could be also divided into 26 different antibiogram patterns. The predominant antibiogram type accounted for 34.2% of the isolates. Antibiogram typing was found to be effective in distinguishing epidemiologically related isolates of S intermedius.
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