Kim, Ji Hoon;Kim, Hyuck;Kim, Young Hak;Chung, Won-Sang;Suh, Jung Kook;Kim, Sung Jin
Journal of Chest Surgery
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v.46
no.1
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pp.14-21
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2013
Background: Reactive oxygen species (ROS) are known to be related to cardiovascular diseases. Many studies have demonstrated that angiotensin-converting enzyme inhibitors have beneficial effects against ROS. We investigated the antioxidant effect of captopril and enalapril in nitric oxide mediated vascular endothelium-dependent relaxations. Materials and Methods: Isolated rabbit abdominal aorta ring segments were exposed to ROS by electrolysis of the organ bath medium (Krebs-Henseleit solution) after pretreatment with various concentrations (range, $10^{-5}$ to $3{\times}10^{-4}$ M) of captopril and enalapril. Before and after electrolysis, the endothelial function was measured by preconstricting the vessels with norepinephrine ($10^{-6}$ M) followed by the cumulative addition of acetylcholine (range, $3{\times}10^{-8}$ to $10^{-6}$ M). The relevance of the superoxide anion and hydrogen peroxide scavenging effect of captopril and enalapril was investigated using additional pretreatments of diethyldithiocarbamate (DETCA, 0.5 mM), an inhibitor of Cu/Zn superoxide dismutase, and 3-amino-1,2,4-triazole (3AT, 50 mM), an inhibitor of catalase. Results: Both captopril and enalapril preserved vascular endothelium-dependent relaxation after exposure to ROS in a dose-dependent manner (p<0.0001). Pretreatment with DETCA attenuated the antioxidant effect of captopril and enalapril (p<0.0001), but pretreatment with 3AT did not have an effect. Conclusion: Both captopril and enalapril protect endothelium against ROS in a dose-dependent fashion in isolated rabbit abdominal aortas. This protective effect is related to superoxide anion scavenging.
The following new techniques have been developed: (A); To a 500ml of sample water, it was adjusted pH 10 with ammonia-anmonium citrate, added 10ml of 1${\%}$ sodium diethyldithiocarbamate and extracted three times with 10ml of CHCl3. The extract was shaken with 10ml of 0.05N $HCl-4{\times}10^{-4}M\;HgCl_2$. The aqueous solution was added 2ml of 2N KCl and washed two times with 10ml of pure $CHCl_3$, and then recorded square wave polarograms. (B); To a 500ml of sample water adjusted pH 10 with ammonia-ammonium citrate, it was added 2ml of 1${\%}$ 8-hydroxyquinoline and extracted three times with 10ml $CHCl_3$. The separated $CHCl_3$ phase was shaken with 10ml of 0.2 N HCl. The aqueous solution was recorded polarograms directly. These methods can be used for determination of the ppb order of metal in water with an error of ${\pm}10{\%}$. The method (B) can not be used for the determination of zinc on account of the free 8-hydroxyquinoline.
Tyrosinases are related to the enzymatic browning of plants and attract the major scientific interest for the prevention of it. Three tyrosinase isozymes ($P_1$, $P_2$ and $P_3$) from pine needles were purified to homogeneity and characterized the factors that affect their activities. The L-ascorbic acid and ${\beta}$-mercaptoethanol notably inhibited the enzymatic activities of the three isozymes. The sodium diethyldithiocarbamate was a competitive inhibitor of isozymes with the $K_i$ values of $P_1$(0.030 mM), $P_2$(0.015 mM) and $P_3$(0.019 mM), respectively. Their enzyme activities were however, increased by the addition of most metal ions. The optimum pH for the three isozymes was 9.0~9.5 and the optimum temperatures ranged from 55 to $60^{\circ}C$ using L-DOPA as substrate.
A balance between production and degradation of reactive oxygen species (ROS) is critical for maintaining cellular homeostasis. Increased levels of ROS during oxidative stress are associated with disease conditions. Antioxidant enzymes, such as extracellular superoxide dismutase (EC-SOD), in the extracellular matrix (ECM) neutralize the toxicity of superoxide. Recent studies have emphasized the importance of EC-SOD in protecting the brain, lungs, and other tissues from oxidative stress. Therefore, EC-SOD would be an excellent therapeutic drug for treatment of diseases caused by oxidative stress. We cloned both the full length (residues 1-240) and truncated (residues 19-240) forms of human EC-SOD (hEC-SOD) into the donor plasmid pFastBacHTb. After transposition, the bacmid was transfected into the Sf9-baculovirus expression system and the expressed hEC-SOD purified using FLAG-tag. Western blot analysis revealed that hEC-SOD is present both as a monomer (33 kDa) and a dimer (66 kDa), as detected by the FLAG antibody. A water-soluble tetrazolium (WST-1) assay showed that both full length and truncated hEC-SOD proteins were enzymatically active. We showed that a potent superoxide dismutase inhibitor, diethyldithiocarbamate (DDC), inhibits hEC-SOD activity.
The characteristics of crude polyphenol oxidase extracted from mushroom[Tricholoma matsutake(S. Ito et Imai) Sing.] were investigated. The enzyme showed highest affinity to pyrogaroll among trihydroxyphenols. Except for o-diphenols the enzyme was inactive in di-and monophenols. The optimum pH was about 4 and the optimum temperature ranged from 45 to $55^{\circ}C$. The enzyme activity was completely inhibited by $70^{\circ}C$ heat treatment for 2 min. $Cu^{++}$, $Fe^{++}$ and $Mg^{++}$ activated the enzyme at low concentration($10^{-1}mM$), but inhibited at high concentration (1mM). The most potent inhibitors were Na-diethyldithiocarbamate, L-ascorbic acid, L-cysteine and NaCl. The Km value with pyrogaroll was 0.88mM.
An analytical method of nine synthetic foods colors in Korea, Japan, Joint FAO/WHO Expert Committee of Food Additives (JECFA), and USA were compared. Contents of water insoluble matter in synthetic food colors tested were not different by general test methods of various organs. Contents of chloride and sulfate salts in Food Green No.3, Food Red No.3, Food Blue No.2, and Food Yellow No.4 slightly differed in various methods, and but up to the standard, and general test methods of JECFA and USA needed far more time. For the measurement of arsenic contents in food colors, colorimetric method in Korea and Japan, and silver diethyldithiocarbamate colorimetric method in USA and JECFA were used, but the standards of them were different. Content of heavy metals was up to the standard, but the methods were used colorimetric method in Korea, atomic absorption method in Japan, and both methods in JECFA and USA.
An analytical method of nine synthetic food colors in Korea, Japan, Joint FAO/WHO Expert Committee of Food Additives (JECFA), and USA were compared. Contents of water insoluble matter in synthetic food colors tested were not different by general test methods of various organs. Contents of chloride and sulfate salts in Food Green No.3, Food Red No.3, Food Blue No.2, and Food Yellow No.4 slightly differed in various methods, and but up to the standard, and general test methods of JECFA and USA needed far more time. For the measurement of arsenic contents in food colors, colorimetric method in Korea and Japan, and silver diethyldithiocarbamate colorimetric method in USA and JECFA were used, but the standards of them were different. Content of heavy metals was up to the standard, but the methods were used colorimetric method in Korea, atomic absorption method in Japan, and both methods in JECFA and USA.
In 1987, the level of heavy metals were determined ina total of 200 samples of 9 species of shellfish of Korea. The samples were collected at the fish. markets by 10 Public Institute of Health. The samples were whelk (Buccinum striatiBBimum), oyster (Crassostrea gigas), ark shell(Tegillarca granesa), shartnecked clam (Venerupis semidecussta), hard clam (Meretrix lusoria), top shell (Turbo cornutus), abalone (Haliotis gigantea), ark shell (Scapharea broughtonii), sea-mussel (Mytilus conuscus gould), respectively. The levels of total mercury, lead, cadmium, arsenic, copper, zinc and manganese were determined. The total mercury levels were determined by mercury analyzer using the combustion gold amalgamation method. The arsenic level were determined by spectrophotometry using colorimetric sil ver diethyldithiocarbamate method after dry ash dige8tion of the samples with magnesium oxide and magnesium nitrate. The levels of other metals were determined by inductively coupled pluma spectrophotometry after wet digestion of the samples with nitric acid and su1furic acid. The results were summerized as follows; 1. The overallranges and mean(ppm) were; Hg, ND-O.221 (0.036); Pb, 0.05-1.51 (0.37); Cd, 0.02-1.86 (0.61); As, 0.5-3.97 (1.22); Cu, 0.14-54.16 (4.93); Zn, 7.40-207.17 (30.09); Mn, 0.13-s.72 (3.40). 2. The levels of all 6 metals were found to be below the maximum permissible Iimits set by the Japan lor mercury, the Netherland for lead the Hong Kong for cadmium. The Finland for Arsenic no statutory Iimits for Zn and Mn in shellfish in any countries. 3. The results show that all the 9 species of shellfish studied, none have accumulated levels dangerous enough to pose a health problem.roblem.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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