Protein and peptide candidates are screened to apply therapeutic application as a drug. Ensuring that these candidates are delivered and maximized effectiveness is still challenging and a variety of studies are ongoing. As drug delivery system vehicles, cell-penetrating peptide (CPP) can deliver various kinds of cargo into the cell cytosol. In a previous study, we developed Ara27 CPP, which are a zinc knuckle family protein of Arabidopsis, and confirmed internalization in human dermal fibroblasts and human dental pulp stem cells at low concentration with short time treatment condition without any toxicity. Ara27, an amphipathic CPP, could be modified and utilized in the biomedical field excluding the risk of toxicity. Therefore, we would like to confirm the non-toxic induced penetrating ability of Ara27 in various cell lines. The purpose of this study was to screen the cell internalization ability of Ara27 in various cell lines and to confirm Ara27 as a promising core CPP structure. First, Ara27 was screened to confirm non-toxicity concentration. Then, fluorescence-labeled Ara27 was treated on human normal cell lines, cancer cell lines and animal cell lines to identify the cellular internalization of Ara27. Ara27 was well intracellular localized in all cell lines and the intensity of fluorescence was remarkably increased in time pass manner. These results indicate that Ara27 has the potential as a core structure for applications in various drug delivery systems.
Background and Objectives: Regenerative endodontic procedures (REPs) are a research hotspot in the endodontic field. One of the biggest problems of REPs is that it is difficult to realize regeneration of pulp-dentin complex and functional reconstruction. The reason is still not clear. We hypothesize that the migration may be different in different dental stem cells. Periodontal ligament stem cells (PDLSCs) may migrate faster than stem cells of apical papilla (SCAPs), differentiating into cementum-like tissue, bone-like tissue and periodontal ligament-like tissue and, finally affecting the outcomes of REPs. Hence, this study aimed to explore the mechanism that regulates the migration of PDLSCs. Methods and Results: After isolating and culturing PDLSCs and SCAPs from human third molars, we compared the migration of PDLSCs and SCAPs. Then we investigated the role of SDF-1𝛼-CXCR4/CXCR7 axis in PDLSC migration. We further investigated the impact of Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) lipopolysaccharide (LPS) on PDLSC migration and the potential mechanism. PDLSCs showed better migration under both noninflammatory and inflammatory conditions than SCAPs. SDF-1𝛼 can promote the migration of PDLSCs by elevating the expression of CXCR4 and CXCR7, increasing the interaction between them, promoting expression of 𝛽-arrestin1 and activating the ERK signaling pathway. P. gingivalis LPS can promote the migration of PDLSCs toward SDF-1𝛼 through increasing the expression of CXCR4 via the NF-𝜅B signaling pathway, promoting the expression of 𝛽-arrestin1, and activating the ERK signaling pathway. Conclusions: This study helped elucidate the potential reason for the difficulty in forming pulp-dentin complex.
The purpose of this study was to observe the responses of the remaining pulp tissue after pulpotomy upon the several kinds of $Ca(OH)_2$ products and the responses of periapical tissue upon some root canal filling materials after extirpation. For pulpotomy, the class V cavities were prepared on the premolars, molars and upper canines, and the pulp was amputated. Each drug was placed over the amputated tissue and cavity was sealed with zinc oxide eugenol cement. The drugs which were used for the study were Dycal (Caulk Co. U.S.A.), Cavitec (Kerr Co. U.S.A.), Calvital, Nobudyne and Neodyne (Neo Dental Chemical Products). For extirpation, the endodontic cavities were prepared on the lingual surfaces of anterior teeth, and the pulp tissues were extirpated as routine method. After enlarging, irrigation, and measuring of root length by taking X-ray, each root canal filling material was filled in the canal with gutta percha cone, and endodontic cavity was sealed with zinc oxide eugenol cement. Zinc oxide eugenol, $Ca(OH)_2$ (Eli Lilly Co. U.S.A.) and Vitapex (Neo Dental Chemical Products) were used as root canal filling materials. Animals were sacrificed after 1, 3 and 6 weeks following the operation. The teeth were decalcified in formic acid, sectioned and stained with hematoxylin eosin. Microscopic examination revealed as follows. 1. Dycal: The dentin bridge formation was observed at the 3rd week after pulpotomy. Inflammatory conditions which were infiltration of inflammatory cells and dilatation of blood vessels were kept in remaining pulp tissue at the 6th week. 2. Calvital: The dentin bridge was observed at the 1st week after pulpotomy. As the time clasped, the pulp tended to be the fibrous degeneration. 3. Cavitec, Nobudyne and Neodyne: In the case of Cavitec and Nobudyne, the incompleted and irregular dentin bridge was observed at the 6th week, and in Neodyne, was observed at the 3rd week. The severe inflammatory changes were seen in the remaining pulp tissue. As the time clasped, the fibrous degeneration tended to spread in the remaining pulp tissue. 4. $Ca(OH)_2$: Osteocementum was formed at the 3rd week, the matrix of cementum and dentin were resorted, and infiltration of lymphocytes was seen in periapical tissue when $Ca(OH)_2$ was used as canal-filling materials. S. ZOE and Vitapex The cementum like substance was seen in periapical portion at the 1st week, when ZOE and Vitapex were used as root canal filling materials. As the time elapsed, the matrix of cementum and dentin tended to be resorted. At the 6th week, the inflammatory condition of periapical tissue was continued in the case of ZOE, but was reduced in the case of Vitapex.
Kim, Won-Seok;Kim, Young-Seok;Jeon, Seong-Bae;Jun, Sang-Ho;Lee, Eui-Suk;Jang, Hyon-Seok;Kwon, Jong-Jin;Rim, Jae-Suk
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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v.34
no.2
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pp.91-99
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2012
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the expression of osteogenic genes associated with bone regeneration on anodizing titanium surface. Methods: $20{\times}20{\times}1$ (mm) commercially pure titanium plate was made, one group was pure titanium, second group was punched, and last group was punched and anodized by electrochemical method. Through the osteogenic cell culture model, the expression of extracellular matrix proteins, such as bone morphogenetic protein-2, bone sialoprotein, aggrecan, osteocalcin, Alkaline phosphatase, collagen I had been evaluated by Real-time polymerase chain reaction, and the morphology of growing cells was evaluated by scanning electron microscopy. Results: The attachment of mesenchymal stem cell was even and well-oriented on all Ti surfaces. The osteogene expression was increased on punching groups but, decreased on anodizing surfaces in 3 week samples. Conclusion: Punched anodizing Ti has possibility be using as a dental implant material, but further in vivo study would be needed.
The purpose of this study was to investigate the morphology and intercellular junctions of the odontoblast of dental pulp in the rat incisor by means of the freeze fracture electron microscopy. Twenty male Sprague-Dawley rats weighing $150{\sim}200g$ were used. After being anesthetized by an intraperitoneal injection of 0.5 ml sodium pentobarbital per kg in body weight(60 mg/ml) the animals were perfused with 2.5% glutaraldehyde-2% paraformaldehyde fixative in 0.1 M cacodylate buffer, pH 7.2 through the ascending aorta for one hour. The incisors were carefully extracted from the jaws and demineralized by suspending them in 0.1 M EDTA in 3% glutaraldehyde (pH 7.2) for two weeks. After demineralization, the specimens were obtained from the portion divided into five equal parts. For freeze-fracture replication, demineralized tissues were infiltrated for several hours with 10%, 25% glycerol in 0.1M cacodylate buffer as a cryoprotectant and then frozen in liquid Freon 22 and stored in liquid nitrogen. Fracturing and replication were done in Balzers BAF 400D high-vacuum freeze-fracture apparatus at $-120^{\circ}C$ under routine $5X10^{-7}$ Torr vacuum. The tissue was immediately replicated with platinum unidirectionally at $45^{\circ}$ angle and reinforced with carbon at $90^{\circ}$ angle unidirectionally or by using a rotary stage. The replication process was monitored by a quartz-crystal device. The replicas were immersed in 100% methanol overnight. The tissue was then digested from the replica by clorox (laundry bleach), placed into 5% EDTA, and washed repeatedly with distilled water. The replicas were picked up on 0.3% formvar-coated 75 mesh grids and examined in the JEOL 100B electron microscope. The results were as follows; 1. Both in thin sections and freeze-fracture replicas, three types of intercellular junctions were recognizable in the plasma membrane of odontoblast: gap junction, tight junction and desmosome-like junction. 2. The nuclear pores were evenly distributed over the nuclear envelope. The pore complex formed a ring about 70 nm in diameter. 3. Gap junctions were found between odontoblasts as well as odontoblasts and neighbouring pulp cells (fibroblast, subodontoblastic cell process, nerve-like fibre). Gap junctions, which were round, ellipsoid and pear-shaped and 600 nm in diameter, were observed in the odontoblast. 4. Numerous round and ellipsoid gap junctions could be frequently seen on the plasma membranes in cell body and apical part of the odontoblasts. On the P face, the junctions were recognized as a cluster of closely packed particles, measuring about 9 nm in diameter, and on the E face, the junctions were recognized as a shallow grooves.
This study was aimed to investigate the effects of indomethancin on physiologic root resorption and to examine the dental pulp and tissue changes around the resorbing teeth 13-14 week old six mongrel dogs were divided into 3 groups, two experimental groups administered indomethacin 2mg/kg/day and 8mg/kg/day orally two times a day for 14 days respectively. and control group administered a placebo The deciduous incisors showing root resorption were selected. fixed for 24 hrs in $10\%$ formalin solution. demineralized in $10\%$ EDTA solution. Invested in paraffin and sectioned in $5{\mu}m$ thick sections. The preparations were stained with H&E staining and Masson's trichrome staining and examined under the light microscope Observation revealed that deciduous root resorbing tissue resembles inflammatory tissue and accompanies bore remodelling. The dental pulp was formal except the area near root resorption. well organized columnar odontoblasts layer under the predentin, anud the odontoblasts near root resorption were cuboidal or flat cells in the disrupted layer under the predentin. Indomethacin administered group showed a partial decrease in the number of odontoclasts and nucleus But there was no sign of pulp change by indomethacin. These results suggest that indomethacin inhibits recruitment of odontoclasts partially and that of osteoclasts more. and so when it is administered for long periods deciduous root resorption can be delayed and eruption of the successor can be delayed for a short period.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.44
no.3
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pp.289-297
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2017
Local and general factors have been attributed to root resorption occurred by injuries such as trauma and dental caries that affect periodontal ligament or dental pulp tissue. Pathologic root resorption is different from physiologic root resorption in terms of resorption pattern such as micromorphology of resorption fossae and types of observed cells. Microscopic morphologies and histologic features of physiologic and pathologic root resorption surface of maxillary primary central incisors resulting from trauma and periapical inflammation were observed by scanning electron microscope and light microscope. The morphology of physiologic resorption lacunae was small and oval or circular shape with regularities. The morphology of pathologic resorption lacunae was large and polygonal shape with irregularities compared with the physiologic resorption lacunae. Multinucleated giant cells and mononuclear cells were closely attached to the physiologic and pathologic resorption lacunae, whereas several kinds of mesenchymal cells with numerous inflammatory cells were found in the areas adjacent to the pathologic resorption surface. Compensating cementum formation took place along some of the areas of physiologic and pathologic resorption area resulting from trauma, but could not be observed on pathologic resorption area resulting from periapical inflammation.
Journal of Korean Academy of Oral and Maxillofacial Radiology
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v.19
no.1
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pp.55-64
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1989
The purpose of this study was to clarify that scintigram was a more effective method than radiogram in the early detection of periapical lesion. Periapical lesions were produced artificially by the opening of the pulp chambers of the lower right 3rd and 4th premolars in 6 dogs. The serial bone scintigrams using 99m-Tc-MDP and periapical radiograms were taken weekly. The uptake counts of the 99-Tc-MDP in the experimental side were compared with those in the control side. The periapical radiograms were interpreted with the joint evaluation by three dental radiologists. The following results were obtained; 1. The radioactivity in the experimental side was increased at the Ist week except one animal in which the radioactivity was increased at the 2nd week. 2. It was observed that increasing amount of radioactivity per week was prominent from the 1st day of experiment to the Ist week, and the 3rd week to the 4th week. 3. The radiographic evidence of the periapical lesions was observed at the 3rd week and became more apparent at the 4th week. 4. Histologically, proliferation of blood vessels and infiltration of chronic inflammatory cells were observed at the 1st week and osteoblasts were found after the 3rd week.
Arsenic trioxide is one of the 'tooth pulp devitalizing agents' used through the dental history when anaesthesia was not available. But owing to its capacity to kill cells in surrounding tissues, the use of arsenic trioxide in vital pulpotomy has been reduced. Arsenic trioxide can cause necrosis of gingiva, bone which can cause osteomyelitis of the jaws. But some dentists still continue to use arsenic trioxide in their endodontic practices. The purpose of this article is to present arsenic trioxide induced osteomyelitis on maxilla and treatment process.
본 연구는 치수 염증 시 IL-8과 MCP-1 분비에서 neuropeptide의 역할에 대해 관찰하고자 발거된 건전한 치아를 수직 파절시켜 치수조직을 채취하여 배양된 치수세포 및 혈관내피세포(ECV 304세포)를 각기 다른 농도의 Substance P(SP)로 12시간 자극하였고, 24시간 동안 4시간 간격으로 시간대별로 자극하였으며, 또 치수세포를 Calcitonin gene-related peptide (CGRP)로 12시간 자극하였다. 이들 세포를 SP길항제 (Spantide)로 15분간 차단한 후 SP로 12시간 재 자극하였으며, SP와 CGRP혼합액을 12시간 자극하였다. 상기의 실험 후 부유물로 ELISA를 시행하여 IL-8과 MCP-1의 분비 량을 측정하였다. 치수세포는 SP로 자극 시 IL-8이 현저히 증가한 반면, CGRP는 효과가 없었으며, SP와 CGRP를 혼합자극 시 시너지 효과 또한 없었고, Spantide는 치수세포의 IL-8과 MCP-1의 분비를 차단시켰다. 치수세포를 SP로 24시간 동안 4시간 간격으로 자극 시 8시간 후 최대의 IL-8은 분비량 나타내었으며, 8시간과 12시간 사이에서 최대의 MCP-1 분비량을 나타내었다. ECV 304세포를 SP로 자극 시 IL-8과 MCP-1 분비량이 미약하게 증가하였으며, Spantide는 ECV 304세포의 IL-8과 MCP-1 분비를 억제시켰다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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