Dendritic cells (DCs) play an essential role in a variety of immune reactions involving $CD4^+$ T cells and have been used to enhance tumor-specific immune responses. Immunosuppression in patients with cancer includes the downregulation of function and number of DCs. Although DCs have been studied, the apoptosis of Des induced by anticancer drugs for chemotherapy remains largely uncharacterized. This study demonstrated that GM-CSF protects DCs from 5-fluorouracil (5-FU) or mitomycin C-induced apoptosis. After 6 - 10 days culture, DCs were characterized by specific surface marker, CD11c and MHC class II. MTT assay revealed that GM-CSF significantly enhanced the viability of DCs treated with 5-FU or mitomycin C. The percentage of dead cells of DCs was determined by cell size using FACScan and GM-CSF was clearly effective. However, GM-CSF did not increase the expression of MHC class II on viable DCs gated, suggesting that GM-CSF may differentially regulate critical factors involved in the function of DCs. For the quantitative analysis of apoptosis, annexin V-FITC staining was performed. 5-FU induced the apoptosis of DCs and GM-CSF significantly protects DCs from 5-FU-induced apoptosis. Taken together, the results in this study that GM-CSF has an anti-apoptosis effect on DCs may provide patients with cancer with clinical benefits to overcome the immunosuppression induced by the decrease of number and functional insufficiency of DCs.
14-3-3 is a highly conserved, ubiquitously expressed protein family. It associates with diverse cellular proteins through its specific phosphoserine/phosphothreonine-binding activity and thus contributes to the regulation of crucial cellular processes such as metabolism, signal transduction, cell-cycle control, apoptosis, protein trafficking, transcription and stress responses. This study aims to determine changes in levels of 14-3-3 isoforms and 14-3-3 - associated proteins in Helicobacter pylori(H. pylori)-infected gastric epithelial AGS cells. AGS cells were stimulated with H. pylori(NCTC 11637) at the ratio of 300:1(bacterium:cell). Western blot analysis revealed that 14-3-3 $\sigma$ was elevated at 3 hr after H. pylori treatment. Other isoforms were not significantly affected by H. pylori infection. Using immunoprecipitation to 14-3-3 $\sigma$, followed by proteomic analysis, we found that S phase kinase associated protein isoform 2 bound to 14-3-3 $\sigma$ has increased. In contrast, three proteins (DEAD-box polypeptide 3, heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H2 and WD repeat-containing protein isoform 1) bound to 14-3-3 decreased by H. pylori infection. Our results suggest that 14-3-3 may play an important regulatory role in H. pylori-induced signal transduction in gastric epithelial cells.
호소수내의 '살아있는 세균'을 측정하기 위하여 quantitative direct viable count (qDVC) 방법을 적용하였다. qDVC방법에 적용되는 최적 glycine 농도는 2%였으며, '살아있는 세균'을 계수하는데 있어서 평판계수법, CTC법 보다는 qDVC 방법이 보다 효과적이라는 것을 확인하였다. qDVC방법으로 '살아있는 세균'을 측정한 결과 다른 두 방법보다 $2.4{\sim}6.0$배 높은 값이었다. 또한 qDVC방법은 '살아있는 세균'을 죽은 세포 또는 휴면세포와 쉽게 구별할 수 있었다.
연구배경 : 결핵치료에서 어려움을 주는 가장 중요한 요인의 하나가 약제 내성균에 감염된 경우이다. 근래 다제내성 결핵균의 증가는 신속한 결핵균 감수성검사방법 개발에 대한 필요성을 더욱 증가시키고 있다. 활발하게 개발이 진행되고 있는 분자생물학적 기법들도 신속한 내성여부의 구분에 많은 도움을 주고 있지만, 아직까지는 검사약제가 제한되어 있고 보완할 점들이 많이 남아있다. 따라서 저자들은 결핵균 세포 염색 방법에 의해 생균과 사균을 구분할 수 있는 신속하고도 정확한 결핵균 약제 감수성 검사 방법을 검토하여 보았다. 방 법 : 본 연구의 대상으로 대표적인 4가지 항결핵 약제(Isoniazid, Rifampicin, Streptomycin, Ethambutol)에 모두 내성인 임상분리 결핵균 20 균주와 모든 약제에 감수성인 임상분리 결핵균 20 균주를 사용하였다. 약제감수성검사시의 최소 희석배수였던 MacFarland #1 탁도로부터 10배 희석한 결핵균액을 7H9 배양액 $30m{\ell}$에 접종한 후 $37^{\circ}C$에서 24시간 배양한 다음, 핵산 염색액인 Syto 9 (MolecularProbes, USA)과 세포질 염색액인 프로피디움(propidium iodide, $C_{27}H_{34}I_2N_4$)을 결핵균과 잘 섞은 후 실온의 암소에서 15 분간 방치한 후 슬라이드에 $5{\mu}{\ell}$씩 점적하여 형광 현미경으로 관찰하였다. 결 과 : 실험에 사용한 약제내성 결핵균은 4가지의 항결핵약제의 각 농도가 함유된 7H9 배양액에서 사멸하지 않고 생존하고 있음을 형광 현미경상에서 확인 할 수 있었다. 프로피디움(propidium iodide)은 살아있는 세균의 경우 세포핵은 염색시키지 못하고 세포질만 염색함으로써 살아있는 결핵균은 형광현미경 시야에서 녹색을 띄게 되고, 세포의 핵산을 염색시키는 Syto 9 은 사멸한 세포의 세포질을 통과하여 결핵 약제에 감수성인 결핵균의 세포핵을 염색시켜 형광 현미경 시야에서 붉은 색으로 관찰 되었다. 결 론 : Acridin (Syto9)과 propidium 성분을 이용하여 세포를 형광 염색시켜 세포의 사멸 및 생육을 판단하는 방법을 결핵균 약제감수성검사에 적용한 결과, 간편하고도 신속하게 24시간 이내에 내성균과 감수성균을 구분할 수 있었다. 생균과 사균 세포의 판별법으로 기존의 결핵균 감수성 방법을 대체하기 위해서는 형광현미경을 비롯한 실험실 장비와 숙련된 검사자가 필요하지만, 배양된 균으로 검사하는 데만 4주 이상 소요되는 기존의 결핵균 감수성 검사 방법을 대체할 수 있는 매우 저렴하고도 간편한 검사방법으로 판단되었다.
In an effort to elucidate the differential actions of blueberry(BB) in both normal and cancer cells, we utilized human breast cell lines to assess the accumulation of radical oxygen species(ROS) and ROS-associated apoptosis in both human normal breast epithelial(MCF10A) and breast cancer(MCF7) cells. BB extract was added to the cultures at a final concentration of $20{\mu}g/m{\ell}$ for 0(control), 6, 12, and 24 hr intervals. The MCF10A cells evidenced no marked ROS accumulation in the presence of BB, whereas the MCF7 cells evidenced clear ROS accumulation upon BB treatment from 12 hours forward. The number of dying or dead cells did not increase in the BB-treated MCF10A cell groups, whereas that number increased profoundly from 12 hr forward. Furthermore, the expression levels of certain stress-related, and pro- and antiapoptotic gene products evidenced differential responses to BB treatment between the MCF10A and MCF7 cell groups. These results indicate that the components of BB extract differentiate cancer cells by not preventing ROS accumulation within cells and by inducing ROS-associated cell death in cancer cells. However, no marked ROS accumulation or induction of cell death was noted in the normal breast epithelial cells. The fact that BB extract exerted a differential effect on cancer cells opens further directions of research regarding the specific components that exert the differential BB-mediated effects in the selective prevention of normal cells and therapy for cancer tissues in the physiological body.
Min Seok Woo;Eun-Jin Kim;Anjas Happy Prayoga;Yangmi Kim;Dawon Kang
한국동물생명공학회지
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제38권4호
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pp.291-299
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2023
Background: Leydig cells, crucial for testosterone production, express ion channels like ANO1 that influence hormone secretion. This study investigates the expression and role of the Tandem of P domains in a weak inward rectifying K+ channel-related Acid-Sensitive K+-1 (TASK-1) channel in these cells, exploring its impact on testicular function and steroidogenesis. Methods: TASK-1 expression in Leydig cells was confirmed using immunostaining, while RT-PCR and Western Blot (WB) validated its expression in the TM3 Leydig cell line. The effect of a TASK-1 channel blocker on cell viability was assessed through live/dead staining and MTT assays. Additionally, the blocker's effect on testosterone secretion was evaluated by measuring testosterone levels. Results: Immunohistochemical analysis revealed a predominant presence of TASK-1, along with c-Kit and ANO-1, in Leydig cells adjacent to seminiferous tubules and also in Sertoli and spermatogenic cells. Expression levels of TASK-1 mRNA and protein were significantly higher in TM3 Leydig cells compared to TM4 Sertoli cells. In addition, blocking TASK-1 in TM3 cells with ML365 induced cell death but did not affect LH-induced testosterone secretion. Conclusions: These findings suggest that TASK-1 in Leydig cells is crucial for their viability and proliferation, highlighting its potential importance in testicular physiology.
본 연구는 OPS 방법에 의한 돼지미성숙 및 성숙난자의 동결-융해 후 난자의 생존성에 있어서 난구세포의 영향을 검토하였다. 그 결과 미성숙 난자의 동결-융해 후의 성숙율은 난구세포의 부착 (25%) 및 제거 (15%)시 유의적인 차이는 인정되지 않았지만 control group (62%)에 비해서는 유의적으로 낮게 나타났다(P<0.05). 미성숙난자의 동결-융해 후 체외성숙시킨 난자의 체외수정시 난구세포 제거시 (19%), 부착된 (9%) 난자에 비해 높은 정자 침입율을 나타냈으나 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 그러나 체외수정후의 난자 성숙율은 난구세포의 부착시 (41%), 제거된 (17%) 난자에 비하여 유의적 (P<0.05)으로 높았으며. 난구세포 제거시 부착된 난자에 비해 유의적 (P<0.05)으로 높은 사멸율을 나타냈다. 한편, 체외에서 성숙시킨 난자의 동결-융해후 체외수정에 이용하였을 때 정자침입율은 난구세포 제거시 (35%, 부착된 (26%)난자에 비해 유의적으로 높았지만 이때 난자의 사멸율은 난구세포 부착 난자에서 오히려 유의성은 높았다. (P<0.05). 또 다른 실험에서 체외수정 후 6시간에서 정자침입율은 난구세포의 유무에 의한 차이는 인정되지 않았으나. 난구세포 제거시 높게 나타났으며, 이때 난자의 사멸율은 난구세포 부착시 높았으나 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 그러나 정자침입이 일어난 난자의 경우 다정자 침입난자가 전혀 관할되지 않았다. 본 연구치 결과로부터 OPS방법에 의한 돼지 미성숙, 성숙난자의 동결은 미성숙난자의 경우 난구세포의 부착이 효과적인 것으로 사료되며, 성숙난자의 경우 난구세포 제거시 정자침입율이 높게 나타나 동결-융해시 난구세포가 난자의 성숙과 수정 시 정자의 침입에 관여하는 것으로 사료된다.는 것이 시사되었다.가지고 있는 아동이, 남아의 경우, 경도비만아의 16.3% 중 2등도비만아의 19.0%, 고도비만아의 26.4% 여아의 경우 각각 11.1% 35.0% 및 47.5%인 것으로 나타났으며. 비만도와 심혈관계질환 위험인자 수간의 상관성은 여아에 있어 서 유의 적인 것으로 나타났다(r = 0.331, p = 0.001).7배와 11배의 차이를 보였다.m-coil로 전이 되어짐을 알 수 있었다. 이는 본 연구에서 분리 정제된 curdlan이 정확한 $\beta$-결합을 가진 glucan임이 확인되었으며 생합성된 curdlan의 구조와 분자적인 특성을 확인하였다. 본 연구를 통하여 $\beta$-결합을 가지는 glucan의 신속한 선별법을 구축할 수 있었고 이는 새로운 기능을 가지는 $\beta$-glucan 생합성 효소나 분해효소의 탐색에 이용될 것으로 기대된다. 남학생이 251.4mg, 여학생이 159.3mg이었다. 이상의 결과로 보아 에너지, 단백질, 칼슘, 비타민 A 등 대부분의 영양소 섭취량이 권장량에 미치지 못하여 성장기에 있는 아동들의 영양소 섭취 상태에 문제가 있음을 시사해 주었다. 5. 조사 대상자의 식습관과 영양소 섭취량의 상관관관계는 식사 시간의 규칙성은 단백질, 식이성 섬유소, 비타민 A 및 티아민섭취량과 양의 상관을 나트륨섭취량과는 음의 상관관계가 있었다. 음식의 간(염도)은 인과 콜레스테롤 섭취와 음의 상관관계를 나타냈다. 들깨가루나 들기름 사용 여부는 열량, 탄수화물 및 인의 섭취량과 음의 상관을, 지방, 철분, 리보플라빈 및 나이아신섭취량과는 양의 상관관계를 나타냈었다. 결식여부는 지방, 철분 및 나이아신섭취량과는 양의 상관관계를, 열량, 탄수화물, 인
Lee, Phil Jun;Cho, Namki;Yoo, Hee Min;Chang, Sun-Young;Ko, Hyun-Jeong;Kim, Hong Pyo
한국식품과학회지
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제52권3호
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pp.244-248
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2020
To retain valuable resources, organisms adopt several strategies including coprophagy. Cells covering the outer skin and internal digestive lumen are actively recycled to maintain their integrity. In present study, we suggested that the small intestine can consume dead cells in a manner similar to how it consumes protein from the diet. We examined the eluates from five segments of the mouse small intestine and cecum and 2 segments of the large intestine and small intestine tissue, and detected immunoreactivity with eukaryotic caveolin-1 and β-actin antibodies only in the cecum and 2 segments from the large intestine. Bacterial agitation of the mouse intestine with Shigella disrupted the architecture and absorptive function of the small intestine. Small intestine eluates were immunoreactive with murine caveolin-1 and contained heme as determined by dot blot analysis. We concluded that the body conserves resources in the small intestine by disposing of and recycling shedded cells.
In this paper, the effect of battery-package shape of electric vehicle on the forced convection around a group of battery cells has been numerically investigated. Simulations for the two package shapes with straight/curved ducts have been conducted to examine the two design factors; the maximum temperature and the temperature deviation of a group of cells which influence the cell durability. The simulation of the conjugate heat transfer has been simplified by employing an equivalent thermal conductivity of cell that consists of various materials. It has been found that the maximum temperature and the temperature deviation of curved duct were lower than those of straight duct. Velocity fields have also been examined to describe the temperature distribution of a group of cells and the position of maximum temperature was found to be related to the dead zone of flow field.
Purpose: The effects of various concentrations of ascorbic acid on stem cell spheroids derived from intraoral areas are not known yet. Thus, the purpose of this study is to evaluate the effects of different concentrations of ascorbic acid on the morphology and cellular viability of stem cell spheroids derived from the gingival tissues. Materials and Methods: Stem cells were plated onto silicon elastomer-based concave microwells and grown in the presence of ascorbic acid at concentrations ranging from 0.003% to 0.3%. The morphology of the cells was viewed under an inverted microscope at day 1, 2, 3 and 5. Qualitative live/dead assay and quantitative cellular viability using Cell Counting Kit-8 were performed on day 2 and day 5. Results: Gingiva-derived stem cells formed spheroids irrespective of ascorbic acid concentration in silicon elastomer-based concave microwells. Increase in the diameter of spheroid were seen with higher concentrations of ascorbic acid. Higher cellular viability was seen in higher concentrations of ascorbic acid. Conclusion: Within the experimental setting, the application of ascorbic acid on stem-cell spheroids produced an increase in the size and higher viability with higher dosage. It can be suggested ascorbic acid be applied with stem cell spheroids for tissue engineering purposes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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