The genetic toxicity of environmental pollutants, namely, nonylphenol (NP), bisphenol A (BPA) and chloropyriphos (CP) was investigated in aquatic sentinel species, freshwater crustacean, Daphnia magna, and larva of aquatic midge, Chironomus tentans, using Comet assay. Physiological effect of such pollutants was also investigated by studying the specimens' rates of reproduction, growth and survival. Acute toxicity results showed that, as expected, Daphnia was more sensitive than Chironomus to chemical exposure. The order of acute toxicity was CP > NP > BPA in D. magna and NP > CP > BPA in C. tentans. BPA may exert a genotoxic effect on D. magna and C. tentans, given that DNA strand breaks increased in both species exposed to this compound, whereas NP- and CP-induced DNA damage occurred only in C. tentans. In vivo genotoxic data obtained in aquatic sentinel species could provide valuable information for freshwater quality monitoring. The experiments with NP-exposed D. magna showed that the pollutant has long-term effects on reproduction, whereas no short-term effect on DNA integrity was found, being an example of a false-negative result from the biomarkers perspective. This result could be interpreted that other mechanism than genetic alteration might be involved in NP-induced reproduction failure in D. magna. False-positive results from the genotoxic biomarker obtained in BPA-exposed D. magna and in NP-exposed C. tentans make it difficult to use DNA integrity as an early warning biomarker. However, as the mere presence of genotoxic compounds, which are potentially carcinogenic, is of high concern to human and ecosystem health, it could also be important to rapidly and effectively detect genotoxic compounds in the aquatic system in ways that do not necessarily accompany a higher level of alteration. Considering the potential of D. magna and C. tentans as bioindicator species, and the importance of genotoxic biomarkers in ecotoxicity monitoring, DNA damage in these species could provide useful information for environmental risk assessment.
Perfluorooctane sulfonic acid (PFOS) and Perfluorooctanoic acid (PFOA) are the principal chemicals known as perfluoroalkyl acids (PFAs). Despite the widespread use of these compounds, relatively little is known about their fate and effects. The purpose of this study was to determine the toxic effects of PFOS and PFOA on Daphnia magna. In the acute toxicity test, D. magna were exposed for 48 hours at concentrations of 0, 30, 45, 67.5, 101.25 and 151.88 mg/L PFOS, and 0, 100, 160, 225, 337.5 and 506.25 mg/L PFOA, respectively. In the case of chronic toxicity test, D. magna were exposed through water for 21 days at concentrations of 0, 0.375, 0.75, 1.5, 3 and 6 mg/L PFOS, and 0, 1.25, 2.5, 5, 10 and 20 mg/L PFOA, respectively. Acute toxicity was assessed on the basis of immobility, while chronic toxicity was assessed on the basis of fecundity. The acute toxicity test on PFOS and PFOA showed that the values of $EC_{50}$ were 50.90 mg/L and 253.47 mg/L, respectively. In the chronic test, fecundity was reduced significantly at 1.5 mg/L of PFOS and 10 mg/L of PFOA, respectively. These results indicated that PFOS is more toxic to zooplankton than PFOA, and both chemicals have some hazard demonstrates risk for acute or chronic toxicity to freshwater organism.
We installed mesocosms including zooplankton, fishs, artificial marshy land and aquatic macrophytes in Kyoungan stream to study the reduction effects of algae from Sep. 16 to Oct. 28, 2011. The control tendency of phytoplankton taxa was compared by analyzing community structure and dominant species in each mesocosm. Under the condition where Bluegill was absent, Daphnia similoides showed good effect of algal control since it has large food area and has high grazing pressure. Bluegill selectively preys upon large zooplankton, Daphnia similoides, as it also preys on small zooplanktons that flow in. In condition that Bluegill was absent, Daphnia similoides preyed selectively large phytoplankton (Cryptomonas ovata). Due to the shading of light, removal of nutrients and providing refuge for small zooplanktons, aquatic macrophytes and artificial marshy land showed high level of algal control. In corrals with aquatic macrophytes and artificial marshy land, the dominancy of genus Coelastrum and Pediastrum, which are difficult for small zooplanktons to feed on, relatively increased. In conclusion, under conditions of small number of predators such as Bluegill, Daphnia similoides is thought to be useful in algal bloom; however, when lots of predators are present, using small sized zooplanktons along with artificial marshy land and aquatic macrophytes is thought to be more useful than using large zooplanktons.
Objectives: Titanium dioxide ($TiO_2$), a common nanoparticle widely used in industrial production, is one of nano-sized materials. The purpose of this study was to determine the acute and chronic toxicity of $TiO_2$ using different size and various concentrations on Daphnia magna. Methods: In the acute toxicity test, four concentrations (0, 0.5, 4, and 8 mM) for $TiO_2$ with 250 or 500 nm and five concentrations (0, 0.25, 0.5, 0.75, and 1 mM) for $TiO_2$ with 21 nm were selected to analyze the toxic effect to three groups of ten daphnia neonates over 96 hours. In addition, to better understand their toxicity, chronic toxicity was examined over 21 days using 0, 1, and 10 mM for each type of $TiO_2$. Results: Our results showed that all organisms died before the reproduction time at a concentration of 10 mM of $TiO_2$. In addition, the exposure of anatase (21 nm) particles were more toxic to D. magna, comparing with that of anatase (250 nm) and rutile (500 nm) particles. Conclusions: This study indicated that $TiO_2$ had adverse impacts on the survival, growth and reproduction of D. magna after the 21days exposure. In addition, the number of test organisms that were able to reproduce neonates gradually were reduced as the size of $TiO_2$ tested was decreased.
Insect-resistant transgenic (Bt-9) rice was generated by inserting mCry1Ac1, a modified gene from the soil bacterium Bacillus thuringiensis, into the genome of a conventional variety of rice (Ilmi). With regard to potential problems such as safety, an evaluation of non-target organisms is necessary as an essential element of an environmental risk assessment of genetically modified (GM) crops. We studied the effects of the Bt-9 rice on the survival of cantor Daphnia magna, a commonly used model organism in ecotoxicological studies. D. magna fed on the Bt-transgenic rice (Bt-9) and its near non-GM counterparts (Ilmi) grown in the same environment (a 100% ground rice suspension). The Bt-9 rice was confirmed to have the inserted T-DNA and protein expression evident by the PCR and ELISA analyses. The feeding study showed a similar cumulative immobility and abnormal response of the Daphnia magna between the Bt-9 rice and Ilmi. Additionally, the 48 h-EC50 values of the Bt-9 and Ilmi rice were 4,400 mg/L (95% confidence limits: 3861.01 - 5015.01 mg/L) and 5,564 mg/L (95% confidence limits: 4780.03 - 6476.93 mg/L), respectively. The rice NOEC (No observed effect concentration) value for D. magna was suggested to be 1,620 mg/L. We conclude that the tested Bt-9 and Ilmi have a similar cumulative immobility for D. magna, a widely used model organism, and the growth of Bt-9 did not affect non-target insects.
The RNA interference (RNAi) has been considered as an important genetic tool and applied to develop a new living modified (LM) crop trait which is an improvement of nutrient quality or pest management. The RNAi of DvSnf7 has been used for resistance to LM maize and the Western Corn Rootworm which is a major agricultural pest for the US Corn Belt. Most of the environmental risk assessments (ERA) of double strand RNA (dsRNA) have been performed using in vitro transcript products, and not in vivo expressed product. A large amount of dsRNA was required for the acute toxicity assay of water fleas. Therefore development of massive dsRNA purification techniques is critical. Daphnia, a freshwater microcrustacean, is a model organism for studying cellular and molecular mechanism involved in life history traits and ecotoxicology. In this study, we established the massive dsRNA purification method using Escherichia coli and implemented acute toxicity assays to Daphnia magna. As a result, the present RNase A and DNase I, dsRNA was efficiently purified without any special techniques or equipment. Even though purified dsRNA existed during the acute toxicity test, lethality or abnormal behavior were not observed in D. magna. These results indicated that GFP and DvSnf7 dsRNA were not significantly affected to D. magna due to their lack of sequence matching in its genome. The purification method of dsRNA and the acute toxicity assay of water fleas using purified dsRNA would be suitable for the toxicological studies of LMOs to aquatic non-target organisms.
Oh, Sung-Dug;Min, Seok-Ki;Kim, Jae Kwang;Park, Jung-Ho;Kim, Chang-Gi;Park, Soo Yun
농업과학연구
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제47권4호
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pp.791-802
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2020
Theoredoxin (TRX) transgenic soybeans were developed using the human Theoredoxin gene under the control of the -conglycinin promoter with a selection marker, the phosphinothricin acetyltransferase (PAT) gene. This study was done to assess the acute toxicity of a genetically modified (GM) soybean using the fresh water planktonic crustacean Daphnia magna. The acute toxicity effect of the TRX soybean and non-GM soybean (Gwangan) on D. magna was investigated at different concentrations (0, 156, 313, 625, 1,250, 2,500, and 5,000 mg·L-1). The TRX soybean used for the test was confirmed to express the TRX/PAT genes by PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). D. magna feeding tests showed no significant differences in the cumulative immobility or an abnormal response with either the TRX soybean or non-GM soybean. The feeding study showed a similar abnormal response and cumulative immobility of the D. magna between the TRX soybean and Gwangan treatments. Additionally, the 48 h-EC50 values for the TRX and Gwangan soybeans were 755.6 and 778 mg·L-1, respectively. The soybean NOEC (no observed effect concentration) value for D. magna was suggested to be 156 mg·L-1. These results suggest that there is no significant difference in toxicity to Daphnia magna between the TRX soybean and its non-GM counterpart.
Pharmaceuticals in wastewater effluents have been recognized as emerging pollutants threatening freshwater organisms. To extend understanding for bioaccumulation and toxicity in those organisms, information on biotransformation products (or metabolites) and their metabolic pathway are crucial. The aim of the present study is to identify and elucidate metabolites of pharmaceuticals formed in exposed organisms using suspect and nontarget screening approach using LC-HRMS. As the target pharmaceuticals, carbamazepine, ketoprofen, metoprolol, propranolol, and verapamil were selected whereas Daphnia magna and Gammarus pulex were used as test organisms. After 24h exposure, metabolites formed in the organisms were identified using LC-HRMS. The structures of metabolites were elucidated via analysis of MS/MS fragment pattern and the comparison with fragment database. As the results, a total of 10 metabolites were identified for 5 parent compounds (C253/C356 for carbamazepine, K211 for ketoprofen, M256 for metoprolol, P218/P276/P306 for propranolol, V196/V291/V441 for verapamil). Among them, the presence of C253 and V291 was confirmed using standard materials. Most of the identified metabolites were formed through oxidative reactions such as hydroxylation, N-demethylation, and dealkylation. Cysteine conjugation (phase II reaction) metabolite (C356) for carbamazepine was found in daphnia. The metabolic pathway of verapamil showed similar metabolic pathways and metabolic pathways for both species. Although the toxicological information on the identified metabolites could not be confirmed, the molecular structure information of the proposed metabolites can be used for future evaluation and prediction of toxicity.
忠淸北道 淸州市에 소재한 明岩池에 棲息하는 Copepoda와 Branchiopoda의 分布相을 硏究하기 위해 1977년 7월 29일부터 11월 5일 사이에 11회에 걸쳐 Copepoda와 Branchiopoda를 採集하였고 또한 環境要因으로 氣溫, 水溫, pH, 溶酸存素量을 測定하여 얻은 結果는 다음과 같다. 1. 調査期間동안의 平均 氣溫과 水溫은 $25.0^{\circ}C, $23.7^{\circ}C 였으며 pH는 6.86, 溶酸存素量은 10.75 ppm이였다. 2. 採集된 Copepoda와 Branchiopoda는 총 2亞目 4科 9屬 13種이였다. 3. 13種中에서 Thermocyclops taihokuensis와 Diaphanosoma brachyurum, Mesocyclops leuckarti, Daphnia longispina의 4種은 거의 全調査期間을 통해 採集되었다. 4. 全調査期間中 量的으로 가장 풍부한 우점종은 Diaphanosoma brachyurum이였다.
To investigate the impacts of transgenic rice on freshwater organisms, we conducted two life table experiments using Daphnia magna for fifteen and twenty days, respectively. We examined life history traits such as population growth rates (r), reproductive rates ($R_0$), generation times, and survivorship. In the first experiment, we used non-drought-stressed transgenic and non-transgenic rice harvested in 2005. In the second study, we used non-transgenic and transgenic rice harvested in 2006 following drought stress. Each experiment involved three treatments in which D. magna neonates were fed with Selenastrum capricornutum (control treatment) and S. capricornutum with 5% aqueous extracts of non-transgenic rice (N-T) and transgenic rice (T). In the first experiment, D. magna showed reduced population growth rates and lowered fecundity in the N-T and T treatments. In the second experiment, D. magna receiving both transgenic and non-transgenic rice extracts showed very high mortality, low population growth rates and reproduction rates. We could not detect any significant negative effects of extracts from transgenic rice on D. magna life history traits at 95%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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