To optimize the hydrolysis conditions in the production of antioxidant hydrolysates from tuna cooking juice concentrate (TC) to maximize the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, TC containing 48.91% protein was hydrolyzed with Alcalase 2.4 L, and response surface methodology (RSM) was applied. The optimum hydrolysis conditions included a 2.2% (w/v) Alcalase concentration and 281 min hydrolysis time, resulting in the highest DPPH radical scavenging activity of 66.49% (0.98 µmol Trolox/mg protein). The analysis of variance for RSM showed that hydrolysis time was an important factor that significantly affected the process (p < 0.05). The effects of different drying methods (freeze drying, hot air drying, and vacuum drying) on the DPPH radical scavenging activity and amino acid (AA) profiles of TC hydrolysate (TCH) were evaluated. Vacuum-dried TCH (VD) exhibited an increase in DPPH radical scavenging activity of 81.28% (1.20 µmol Trolox/mg protein). The VD samples were further fractionated by ultrafiltration. The AA profiles and antioxidant activities in terms of the DPPH radical scavenging activity, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline)-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging activity, ferric reducing antioxidant power, and ferrous ion chelating activity were investigated. Glutamic acid, glycine, arginine, and cysteine were the major AAs found in the TCH fractions. The highest DPPH radical scavenging activity was found in the VD-1 fraction (< 5 kDa). The VD-3 fraction (> 10 kDa) exhibited the highest ABTS radical scavenging activity and ferric reducing antioxidant power. The ferrous ion chelating activity was the highest in VD-1 and VD-2 (5 to 10 kDa). In conclusion, this study provided the optimal conditions to obtain high antioxidant activities through TCH production, and these conditions could provide a basis for the future application of TCH as a functional food ingredient.
Apple and pear are popular fruits consumed in Korea and are common fruit in daily diet. In order to compare the antioxidant activity of the apple and pear peels, total polyphenol contents, total flavonoid contents, $ABTS^+$ free radical scavenging activity, and DPPH free radical scavenging activity were measured from hot water, ethanol, and methanol extracts of the two fruit peels. The total polyphenol and flavonoid contents were highest in 95% methanol extracts of the apple peelsand 70% ethanol extract of the pear peels, respectively. Total polyphenol contents of the pear peels were higher than that of apple peels, and total flavonoid contents of the apple peels were higher than that of pear peels. The apple and pear peels had the highest $ABTS^{+{\cdot}}$ and DPPH free radical scavenging activity in 95% methanol extracts and 70% ethanol extracts, respectively. $ABTS^{+{\cdot}}$ and DPPH free radical scavenging activity of pear peels was higher than that of apple peels, and the DPPH free radical scavenging activity of apple and pear peels were detected in hot water, 95% methanol, and 70% ethanol extracts, respectively. Ascorbic acid, a synthetic antioxidant used as positive control, had significantly higher scavenging activity than the apple and pear peels. In conclusion, the apple and pear peelshave great potential as natural antioxidants. Therefore, above results should be considered to provide the possibility for the development of high functional antioxidants.
본 연구는 제주산 해조류의 생리활성을 대량검색하기 위해 HTS 기법을 이용한 실험과정의 제어 및 관리를 위한 자동화 시스템을 구축하고자 DPPH 라디칼을 이용하여 HTS를 이용한 자동화 시스템을 구축하고 제주산 해조류의 DPPH 라디칼 소거활성을 대량 검색하고자 하였다. 그 결과 HTS를 위한 효율적인 검색방법을 개발하였고 DPPH 라디칼 소거활성이 높은 해조류를 검색하게 되었다. 녹조류의 경우 납작파래 (20G6)의 $20^{\circ}C$ 추출물(1 mg/ml)에서 약 60%이 DPPH 라디칼 소거활성을 보였을 뿐 나머지 해조류에서는 40% 미만이 낮은 활성만을 보였다. 갈조류의 경우 꽈배기 모자반 (20B17), (70B17), 참그물바탕말 (70B1), 큰잎모자반 (70B16)과 감태 (70B26)에서 DPPH 라디칼 소거활성이 우수하였다. 홍조류 중에서는 왜떨기나무붉은실 (20R24)에서 가장 우수한 DPPH 라디칼 소거활성을 나타내었고 갈래잎 (20R17), 굵은참우뭇가사리 (20R18), 부채분홍잎 (20R23) 또한 높은 소거활성을 보였다. 따라서 우수한 효과를 나타내었던 해조류를 대상으로 용매분획 및 활성물질의 분리, 정제를 통해 해조류 유래의 기능성 신소재를 개발한다면, 해조류의 고부가가치화 및 HTS기술의 보편화에 큰 영향을 미칠 것으로 판단된다.
Radical scavenging and antioxidant activities of Laminaria japonica and fermented its extracts were evaluated. Freeze-dried L. japonica was fermented by Aspergillus oryzae and extracted with distilled water. The extract solution was mixed with ethanol and centrifuged. The supernatant was ethanol soluble fraction, non-polysaccharide fraction (ESF), and residue was ethanol insoluble precipitation, polysaccharide fraction (EIP). ESF was subjected to sequential fractionation with dichloromethane, ethyl acetate, butanol and water. To determine the radical scavenging and antioxidant activities of these, DPPH radical, hydroxyl radical, superoxide anion radical scavenging activities and linoleic acid oxidation were tested. Among the extracts, ESF of fermented L. japonica showed the highest radical scavenging activity. The ESF showed DPPH radical scavenging activity of 64.33% at concentration of $50{\mu}g/mL$. It was higher than 57.70% of vit. C. Ethyl acetate and butanol fraction had high value of radical scavenging and antioxidant activities, especially butanol fraction of fermented L. japonica was 79.48 % of hydroxyl radical scavenging activity at concentration of $50{\mu}g/mL$. The fermented L japonica had radical scavenging and antioxidant activities higher than L. japonica. These results suggest that fermented L japonica is healthy food having radical scavenging and antioxidant activities.
Levels of quercetin in different parts of onion were investigated using high performance liquid chromatography (HPLC) and liquid chromatography mass spectrometry (LC/MS) suitable for use with functional food material. Two main peaks were observed on HPLC chromatograms from the extracts of the skin, and the outer, middle, and core parts of onion. Using LC/MS, peak 1 was tentatively identified as quercetin monoglucoside at m/z 466.4, and peak 2 as quercetin with [M]+ at m/z 303.3. The levels of quercetin in the skin, and the outer, middle and core parts of the plant were 16.83,2.67,0.95, and 0.35 mg/g, respectively. In the study of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity, skin, the nonedible part, contained the highest amount of quercetin, compared to the other edible parts, and showed the highest DPPH radical scavenging activity. Levels of quercetin and DPPH radical scavenging activity increased from core to skin. All parts of onion exhibited the strongest antibacterial activity only against Staphylococcus aureus and Vibro parahaemolyticus. Antibacterial activities of onion exhibited that S. aureus was more sensitive than V. parahaemolyticus. Among the four onion extracts, the middle part showed the strongest inhibitory activity against S. aureus but all onion extracts showed similar antibacterial activities against V. parahaemolyticus.
The aim of this study is to examine the radical scavenging activity of perilla and sesame oil that Koreans traditionally consume. For DPPH radical scavenging activity, oil and its hexane/70% methanol extracts (ME) are used and for superoxide and hydroxyl radical scavenging activities, ME are used. Unrefined perilla oil, sesame oil, and refined sunflower oil are used. The yields for ME of perilla, sesame and sunflower oil are 0.57, 0.61, and 0.30%, respectively, and the amounts of phenolic compounds in ME of corresponding oil are 18.77, 88.64 and $0.05\;{\mu}g$ tannic acid/mg, respectively. $IC_{50}$ for DPPH scavenging activity of perilla, sesame and sunflower oil are 2.12, 1.91, and 3.35 mg/mL, respectively and those for ME of corresponding oils are 0.42, 0.07, and 43.11 mg/mL, respectively. In DPPH assay, the solvent used for oil sample is iso-octane and that for ME is methanol. Superoxide anion scavenging activity of ME of perilla, sesame and sunflower oil tested at 1 mg/mL concentration are 21.10, 13.25, and 3.14%, respectively. Hydroxyl radical scavenging activities of those samples tested at 1 mg/mL concentration are 86.08, 93.30, and 93.17%, respectively. In summary, the refining process seems to remove the phenolic compound during oil processing. Antiradical substances in perilla and sesame oils responsible for scavenging DPPH radicals are present in the methanol fraction, while the antiradical substances in the sunflower oil are in the lipid fraction. DPPH scavenging activity of ME of sesame oil is significantly higher than that of perilla oil (p<0.05). However, superoxide anion scavenging capacity of ME of perilla oils was found to be greater than that of both sesame and sunflower oils (p<0.05).
As a part of our search for novel antioxidants from the seaweeds, we have investigated radical scavenging effect for their crude extracts using 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, authentic peroxynitrite, and 3-morpholinsydnonimine (SIN-1), a peroxynitrite-generating species in vitro. Thirty-four seaweeds were screened for $ONOO^-$ and DPPH radical scavenging activities. A potent inhibitory effect against peroxynitrite generated by SIN-1 at $5{\mu}g/ml$ of methanol extracts was observed in order of Ishige okamurae(95.3%), Sargassum hemiphyllum(90.2%), Symphyocladia latiuscula(89.6%), Porphyra suborbiculata(86.7%), and Gelidium amamsii(85.9%), Also, a significant scavenging effect against direct authentic peroxynitrite was revekaled for methanol extracts of Ishige okamurae(66.2%) and Sargassum hemiphyllum(55.2%) and the acetone/methylene chloride(1:1) extract of Gigatina tenella (61.0%). In our measurement for evaluating the capacity to scavenge the stable free radical of DPPH, acetone/methylene chloride(1:1) extracts of Symphyocladia latiuscula, Gloiopeltis furcata, and Sargassum thunbergii and the methanol extract of Sargassum sp. showed an inhibitory potency of 85.8%, 82.8%, 74.1%, and 64.0%, respectively.
양파의 매운 맛과 냄새를 감소시켜 섭취가 용이하도록 제조된 흑양파가 항산화 활성이 있다고 보고되어있어서 흑양파로부터 항산화 활성물질을 구명하고자 하였다. 흑양파 MeOH 추출물을 용매분획하여 얻어진 분획물들 중 EtOAc층이 높은 DPPH와 $ABTS^+$ radical scavenging 활성이 있었다. 그래서 EtOAc층을 silica gel과 Sephadex LH-20 등의 column chromatography를 이용하여 2종의 항산화 활성물질을 분리하였다. 단리한 이들 화합물을 대상으로 ESI-MS 및 NMR 분석을 통하여 3,4-dihydroxybenzoic acid (1)와 quercetin (2)로 각각 동정하였다. 이 화합물들은 $ABTS^+$ 및 DPPH radical scavenging 활성이 있었으며, 화합물 2는 화합물 1에 비해 더 높은 radical scavenging 활성이 있었다.
시설오이로 많이 재배되고 있는 4 품종을 선발하여 생육단계별로 DPPH radical 소거활성, 아질산염 소거활성, ABTS 소거활성 그리고 항산화효소 활성에 대하여 비교 분석하였다. 장죽청장 품종이 모든 생육단계에서 DPPH radical 소거활성이 상대적으로 높게 나타났으며, 그 외 품종들 간에는 큰 차이를 보이지는 않았다. 또한 생육단계별로는 수확기에 못 미친 미성숙단계에서 DPPH radical 소거 활성이 높게 나타났다. 아질산염 소거활성은 pH가 1.2일 경우 모든 품종과 생육단계에서 40% 이상 분해시켰으며, 특히 장형낙합과 신조은백다다기 품종이 상대적으로 높은 활성을 보였다. 또한 pH 4.0에서는 추출물 모두에서 30% 이상의 아질산염 소거활성을 나타냈으며, pH 6.0에서는 대부분 활성이 없었다. ABTS 소거활성은 장죽청장과 늘푸른 청장 품종이 다른 품종보다 상대적으로 다소 높은 소거능을 나타냈고, 생육단계별로는 대부분의 품종에서 ABTS 소거능에 큰 차이를 보이지는 않았다. SOD 활성은 모든 품종과 전 생육단계에서 95% 이상의 높은 활성을 보였으며, 품종 간에 거의 유의한 차이를 나타내지 않았다. CAT 활성은 전체적으로 장죽청장과 늘푸른청장 품종이 그리고 APX 활성은 늘푸른청장, 장형낙합 품종에서 상대적으로 높은 활성을 나타냈고, POX 활성은 생육단계별로 뚜렷한 경향을 보여 수확기에 이를수록 활성이 현저히 감소하는 결과를 나타냈다. 본 실험의 결과, 오이의 높은 항산화능을 확인함으로서 향후 향장소재 및 식품소재로서의 이용 가치성을 증대시킬 수 있음을 시사한다.
Galgeuntang water extract exhibited a strong free radical scavenging activity and reducing power determination. However, a gradual increase in the free radical scavenging activity and reducing power determination was obtained with increasing concentrations. The highest radical scavenging activity was shown by the water extract from Galgeuntang (116.93 ${\mu}g$/mL) and the water extract from Cinnamonum cassia Presl. (95.01 ${\mu}g$/mL). These results of phenolic and flavonoid contents of the extracts indicated that the strong radical scavenging activity of the Cinnamonum cassia Presl. extract might be in part due to the phenolic compounds. The correlation coefficient between TPC and DPPH ($r^2$ = 0.9312), TFC and DPPH ($r^2$ = 0.9677), showed positive correlation among total phenolic/flavonoid contents and antioxidant activity. These results suggest that Galgeuntang has a potential antioxidant activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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