• 제목/요약/키워드: DNA test

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조직공학적 섬유륜재생을 위한 PLGA 지지체 제조시 다공크기의 영향에 관한 연구 (The Effect of Pore Sizes on Poly(L-lactide-co-glycolide) Scaffolds for Annulus Fibrosus Tissue Regeneration)

  • 소정원;장지욱;김순희;최진희;이종문;민병현;강길선
    • 폴리머
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    • 제32권6호
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    • pp.516-522
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    • 2008
  • 생분해성 고분자인 poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA)를 이용한 조직공학용 다공성 지지체에서의 공극률, 공극의 크기, 공극의 모양 등은 주입된 세포들이 안착하여 증식하는데 있어서 중요한 요건 중 하나이다. 본 연구에서는 섬유를 세포와 다공크기와의 관계를 파악하고자 다공형성물질인 염화나트륨을 다섯 개의 범위로 분류하여 용매캐스팅/염추출법을 이용한 다양한 다공크기를 갖는 다공성 지지체를 제조하였다. (3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium-bromide) (MMT) 분석방법을 이용하여 제조된 지지체에 파종된 섬유륜 세포의 생존율과 증식률을 확인하였으며, in vitro 환경에서의 콜라겐 양과 DNA량을 측정하였다. In vitro 환경에의 세포간의 발생하는 여러 상호작용을 확인하기 위하여 면역결핍 쥐의 피하에 섬유륜 세포가 파종된 지지체를 이식하여 sulfated g1ycosaminoglycan(SGAG)의 합성정도와 조직학적인 평가를 수행하였다. 결론적으로 $180{\sim}250{\mu}m$ 다공크기를 갖는 지지체에서 높은 세포 생존율과 체내에서의 원할한 세포외기질의 형성을 보임으로써 여타의 지지체보다 섬유를 조직 재생에 적절할 것으로 사료된다.

소와 돼지유래 Salmonella속 균의 혈청형 및 약제감수성 (Serotype and antimicrobial susceptibility of Salmonella spp. isolated from pigs and cattle)

  • 이우원;정병열;이강록;이동수;김용환
    • 한국동물위생학회지
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    • 제32권1호
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    • pp.49-59
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    • 2009
  • At the present study, it was aimed to explore the states of antimicrobial resistant Salmonella spp. isolates from 3,850 pigs (2,732 ileocecocolic lymphnodes and 1,118 cecal contents) and 1,764 cattle (965 cecal lymphnodes and 799 cecal contents) slaughtered in Busan province from December 2000 to November 2001. Among 5,614 samples, 457 of Salmonella spp. were isolated from pig lymphnodes (13.5%), pig cecal contents (4.4%), cattle lymphnodes (3.5%) and cattle cecal contents (0.5%). Salmonella spp. were showed different isolation ratio, that was 10.8% in summer, 9.0% in autumn, 8.4% in spring and 5.0% in winter. As a result of serotyping, B group (65.4%) were identified as the most common in pigs and cattle, in order of $C_1$ (14.0%), $D_1$ (5.5%), $C_2$ (4.2%), $E_1$ (4.2%) and L (3.5%). 34 serotypes were found, among them, Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) (21.0%) was the most common serotype from pigs and cattle. The major serotypes were in order of S. Derby (15.3%), S. Schwarzengrund (14.7%), S. Typhimurium var Copenhagen (9.2%), S. Mbandaka (5.7%), S. Enteritidis (5.5%) and S. Ruiru (3.5%). The most common serotype was S. Typhimurium in pigs, and S. Ruiru in cattle. S. Ruiru was firstly isolated from pigs and cattle in Korea. In antimicrobial susceptibility test, all the isolates were demonstrated susceptibility to norfloxacin and ofloxacin. But the isolates were showed resistance other antibiotics in order of doxycycline (68.3%), tetracycline (67.8%), penicillin (54.5%) and streptomycin (52.5%). S. Typhimurium were exhibited resistance to ampicillin (34.8%), chloramphenicol (36.2%), streptomycin (94.9%), sulfamethoxazole/trimethoprim (34.8%) and tetracycline (97.8%). There were 53 strains (38.4%) which had multi drug resistant (MDR) isolates, resistant to more than 6 antimicrobial agents. The most common resistance patterns of MDR isolates were ampicillin, chloramphenicol, carbenicillin, doxycycline, nalidixic acid, penicillin, streptomycin, sulfamethoxazole/trimethoprim and tetracycline (ACCbDNaPSSuT).

흰색 반겹꽃의 화단국화 '누리볼' 육성 (Breeding of Garden Chrysanthemum Cultivar 'Nuri Ball' (Dendranthema grandiflorum Ramat.) with White Color Petals and Semi-Decorative Type Characteristics)

  • 김동찬;최현구;박하승;이영혜;원미경;정윤경;이정수
    • 원예과학기술지
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    • 제33권5호
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    • pp.789-795
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    • 2015
  • '누리볼(Nuri Ball)'은 충남농업기술원 예산국화시험장에서 2011년에 육성한 흰색꽃을 가진 반구형 화단국화 품종이다. 품종육성 경위는 모본으로 노랑색 반겹꽃 화형의 줄기가 강한 특 징을 가지고 있는 '02-145-01' 계통과 흰색 반겹꽃 화형의 초형이 안정적인 '02-04-32'계통을 2004년에 인공교배하여 얻었으며, 2006년부터 2009년까지 특성을 조사하였고, 농작물 직무육성 신품종 선정위원회를 거쳐 2011년에 품종등록을 하였다. '누리볼'의 화색은 흰색이고 반겹꽃 화형의 형태를 가졌다. 생육에서 초장은 대조품종인 '화이트 미리' 보다 작으나, 초폭이 더 넓은 안정적인 반구형의 모습을 보여 화단국화로써 뛰어난 형태가 보이는 것으로 판단된다. 대조 품종과 형태적으로는 다소 유사 하였지만, 유전적 관계와 배수성 검정을 통하여 품종의 차별성을 확인하였다. '누리볼'은 5월 하순에 정식하면 9월 하순에 개화되어 대조 품종보다 16일 빠른 개화특성을 보였으며, 꽃은 대조품종인 '화이트 미리' 보다 크지만 꽃수는 적은 것으로 나타났다. '누리볼'은 화단에 이용 가능한 조경용 국화로써, 앞으로 농가소득 창출에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

계란 오염 세균의 분리 및 분리 균주의 감마선 감수성 평가 (Isolation of Egg-Contaminating Bacteria and Evaluation of Bacterial Radiation Sensitivity)

  • 김동호;윤혜정;송현파;임병락;조철훈
    • 한국식품저장유통학회지
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    • 제15권5호
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    • pp.774-781
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    • 2008
  • 계란의 주요 오염 미생물을 분리하여 계란의 난각 표면과 내부에 접종한 다음 감마선 살균을 실시하여 각 미생물의 감마선 감수성을 평가하였다. 본 실험에서 시중 유통 계란으로부터 분리된 미생물을 16S rDNA 염기서열분석을 통하여 잠정 동정한 결과 Staphylococcus sciuri, Bacillus cereus, Escherichia coli, Proteus mirabilis 및 Enterococcus faecalis의 5 종의 미생물이 확인되었으며 Salmonella는 검출되지 않았다. 표준 시험균주인 S. Typhimurium을 비롯하여 계란 분리균주 5종을 계란 난각 표면과 내부에 $10^{6{\sim}7}\;CFU/g$되게 접종한 다음 감마선을 조사하여 D10 값으로 감마선 감수성을 평가한 결과, S. Typhimurium은 $0.365{\sim}0.399\;kGy$, Staphylococcus sciuri는 $0.418{\sim}0.471\;kGy$, B. cereus는 $1.075{\sim}1.119\;kGy$, E. coli는 $0.280{\sim}0.304\;kGy$, P. mirabilis는 $1.132{\sim}1.330\;kGy$, 그리고 Enterococcus faecalis는 $0.993{\sim}1.290\;kGy$ 수준의 D10 값을 나타내었다. 감마선 조사 후 $25^{\circ}C$ 상온저장 조건에서 미생물의 생장을 살펴본 결과, S. Typhimurium은 3 kGy에서, E. coli와 Staphylococcus sciuri는 5 kGy에서 완전 사멸되었으며 다른 미생물 접종 시험군에서도 각각의 $D_{10}$ 값에 준하는 미생물생장 억제효과가 나타났다. 일반적인 계란의 미생물 오염 수준을 102 CFU/g 수준임을 감안할 때, 3 kGy의 감마선 조사선량으로 계란의 미생물 제거가 가능할 것으로 사료되었다.

누에에 대한 저독성 Bacillus thuringiensis 균근의 선발 (Selection of Low Pathogenic Variety in Bacillus thuringiensis to Silworm, Bombyx mori)

  • 김철영;김영훈;강석관
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.43-53
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    • 1986
  • 해충의 미생물적 방제를 위한 미생물살충제 중 특히 주목되어지는 Bacillus thruingiensis살충제를 개발함에 있어서 우리나라와 같은 양잠국가에서는 누에에 대한 피해가 우려되므로 익충인 누에에 대해서는 비교적 저독성이고 목적해충에 대해서는 맹독성인 균주를 선발하기 위한 기초자료를 얻고자 plasmid영동상에 의해 확인된 3종의 B.t.균주 kurstaki. aizawai, dendrolimus를 이용하여 Renograffin 이중층법에 의해 분리된 내독소 단백질 및 포자와 내독소 단백질 혼합물 각각을 누에와 흔불나방에 대해 독성을 검정하여 아래와 같은 연구결과를 얻었다. 1. plasmid의 전기영동상을 분석한 결과 kurastaki가 150-1.5Md 사이에 10개, dendrolimus가 75-33Md 사이에 4개, aizawai가 62-4.2Md사이에 6개 band가 나타났다. 2. 누에와 흔불나방에 대한 독성검정결과는 아래와 같다. i)dendrolimus가 누에에 있어서는 가장 저독성이고 목적해충인 흰불나방에 대해서는 kurstaki와 대등한 우수한 살충력을 나타내었다. ii)공시충에 따라 균주간에 독성차이가 크게 나타났으며 kurstaki가 공시충에 따른 독성차이가 가장 작고 비교적 독성이 높은 것으로 나타났다.

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Ginsenoside Rg1 supplementation clears senescence-associated β-galactosidase in exercising human skeletal muscle

  • Wu, Jinfu;Saovieng, Suchada;Cheng, I-Shiung;Liu, Tiemin;Hong, Shangyu;Lin, Chang-Yu;Su, I-Chen;Huang, Chih-Yang;Kuo, Chia-Hua
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제43권4호
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    • pp.580-588
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    • 2019
  • Background: Ginsenoside Rg1 has been shown to clear senescence-associated beta-galactosidase (SA-${\beta}$-gal) in cultured cells. It remains unknown whether Rg1 can influence SA-${\beta}$-gal in exercising human skeletal muscle. Methods: To examine SA-${\beta}$-gal change, 12 young men (age $21{\pm}0.2years$) were enrolled in a randomized double-blind placebo controlled crossover study, under two occasions: placebo (PLA) and Rg1 (5 mg) supplementations 1 h prior to a high-intensity cycling (70% $VO_{2max}$). Muscle samples were collected by multiple biopsies before and after cycling exercise (0 h and 3 h). To avoid potential effect of muscle biopsy on performance assessment, cycling time to exhaustion test (80% $VO_{2max}$) was conducted on another 12 participants (age $23{\pm}0.5years$) with the same experimental design. Results: No changes of SA-${\beta}$-gal were observed after cycling in the PLA trial. On the contrary, nine of the 12 participants showed complete elimination of SA-${\beta}$-gal in exercised muscle after cycling in the Rg1 trial (p < 0.05). Increases in apoptotic DNA fragmentation (PLA: +87% vs. Rg1: +133%, p < 0.05) and $CD68^+$ (PLA:+78% vs. Rg1:+121%, p = 0.17) occurred immediately after cycling in both trials. During the 3-h recovery, reverses in apoptotic nuclei content (PLA:+5% vs. Rg1 -32%, p < 0.01) and increases in inducible nitrate oxide synthase and interleukin 6 mRNA levels of exercised muscle were observed only in the Rg1 trial (p < 0.01). Conclusion: Rg1 supplementation effectively eliminates senescent cells in exercising human skeletal muscle and improves high-intensity endurance performance.

하이드록실아민 절단을 이용한 재조합 인간 상피세포 성장인자의 제조 (Preparation of Recombinant Human Epidermal Growth Factor by Hydroxylamine Cleavage)

  • 김선호;이우일
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제22권6호
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    • pp.542-549
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    • 2021
  • 본 연구의 목적은 재조합 인간 상피세포 성장인자(hEGF)의 발현 확인 및 정제의 용이성을 위해 단백질의 N-말단에 융합된 부분을 제거하기위하여 기존의 고가의 효소를 사용하지 않고 간단한 화학처리로 융합 태그를 절단하면서도 여전히 친화성 크로마토그래피로 정제가 가능한 재조합 hEGF의 경제적이며 공정이 단순화된 제조법을 제공하는 것이다. 인간 상피세포 성장 인자는 인간 세포 성장 및 증식에 매우 중요한 호르몬이며 이 단백질에 대한 발현 및 정제에 관한 많은 연구가 보고 되었다. 본 연구에서는 hEGF 유전자를 대장균 코돈에 최적화 하였으며 N-말단에 Hydroxylamine에 의한 절단이 가능한 Asparagine과 Glycine이 발현되도록 포함하여 설계하였다. 제조한 DNA를 대장균 발현 벡터인 pRSET_A에 삽입하여 발현용 균주 BL21 (DE3)에 형질전환 시켰으며 재조합 융합 단백질은 대장균에서 샤페론 벡터 pG-Tf2와 성공적으로 공발현 되었다. 발현된 융합 단백질은 Ni-NTA 컬럼 크로마토그래피로 정제한 후 Hydroxylamine으로 처리해 N-말단 융합부분을 제거하였으며 SDS-PAGE를 통해 확인하였다. ELISA 분석 결과 재조합 EGF의 활성이 상업용 hEGF와 92% 이상 유사한 것으로 나타났으며 피부 섬유아세포의 세포증식을 촉진하는 것으로 확인 되었다.

Anti-aging effects of Korean Red Ginseng (KRG) in differentiated embryo chondrocyte (DEC) knockout mice

  • Nam, Youn Hee;Jeong, Seo Yule;Kim, Yun Hee;Rodriguez, Isabel;Nuankaew, Wanlapa;Bhawal, Ujjal K.;Hong, Bin Na;Kang, Tong Ho
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제45권1호
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    • pp.183-190
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    • 2021
  • Background: The circadian rhythm is the internal clock that controls sleep-wake cycles, metabolism, cognition, and several processes in the body, and its disruption has been associated with aging. The differentiated embryo chondrocyte (Dec) gene is related to circadian rhythm. To our knowledge, there are no reports of the relationship between dec gene expression and KRG effect. Therefore, we treated Dec gene knockout (KO) aging mice with KRG to study anti-aging related effects and possible mechanisms. Methods: We evaluated KRG and expression of Dec genes in an ototoxicity model. Dec genes expression in livers of aging mice was further analyzed. Then, we assessed the effects of DEC KO on hearing function in mice by ABR. Finally, we performed DNA microarray to identify KRG-related gene expression changes in mouse liver and assessed the results using KEGG analysis. Results: KRG decreased the expression of Dec genes in ototoxicity model, which may contribute to its anti-aging efficacy. Moreover, KRG suppressed Dec genes expression in liver of wild type indicating inhibition of senescence. ABR test indicated that KRG improved auditory function in aging mouse, demonstrating KRG efficacy on aging related diseases. Conclusion: Finally, in KEGG analysis of 238 genes that were activated and 158 that were inhibited by KRG in DEC KO mice, activated genes were involved in proliferation signaling, mineral absorption, and PPAR signaling whereas the inhibited genes were involved in arachidonic acid metabolism and peroxisomes. Our data indicate that inhibition of senescence-related Dec genes may explain the anti-aging efficacy of KRG.

Clinical implication of adjuvant chemotherapy according to mismatch repair status in patients with intermediate-risk stage II colon cancer: a retrospective study

  • Kang, Byung Woog;Baek, Dong Won;Chang, Eunhye;Kim, Hye Jin;Park, Su Yeon;Park, Jun Seok;Choi, Gyu Seog;Baek, Jin Ho;Kim, Jong Gwang
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제39권2호
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    • pp.141-149
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    • 2022
  • Background: The present study evaluated the clinical implications of adjuvant chemotherapy according to the mismatch repair (MMR) status and clinicopathologic features of patients with intermediate- and high-risk stage II colon cancer (CC). Methods: This study retrospectively reviewed 5,774 patients who were diagnosed with CC and underwent curative surgical resection at Kyungpook National University Chilgok Hospital. The patients were enrolled according to the following criteria: (1) pathologically diagnosed with primary CC; (2) stage II CC classified based on the 7th edition of the American Joint Committee on Cancer staging system; (3) intermediate- and high-risk features; and (4) available test results for MMR status. A total of 286 patients met these criteria and were included in the study. Results: Among the 286 patients, 54 (18.9%) were identified as microsatellite instability-high (MSI-H) or deficient MMR (dMMR). Although all the patients identified as MSI-H/dMMR showed better survival outcomes, T4 tumors and adjuvant chemotherapy were identified as independent prognostic factors for survival. For the intermediate-risk patients identified as MSI-low (MSI-L)/microsatellite stable (MSS) or proficient MMR (pMMR), adjuvant chemotherapy exhibited a significantly better disease-free survival (DFS) but had no impact on overall survival (OS). Oxaliplatin-containing regimens showed no association with DFS or OS. Adjuvant chemotherapy was not associated with DFS in intermediate-risk patients identified as MSI-H/dMMR. Conclusion: The current study found that the use of adjuvant chemotherapy was correlated with better DFS in MSI-L/MSS or pMMR intermediate-risk stage II CC patients.

양성 고페닐알라닌혈증 환자에 대한 임상적 고찰과 유전자 분석 (Clinical Manifestations and Gene Analysis of Patients with Benign Hyperphenylalaninemia)

  • 이정은;이정호;이동환
    • 대한유전성대사질환학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.79-85
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    • 2016
  • 목적: 본 연구의 목적은 국내 양성 고페닐알라닌혈증의 돌연변이 유전자 분석, 임상 양상, 치료에 대해 조사하는 것이다. 방법: 2010년도 4월부터 2015년도 8월까지, 신생아 선별검사에서 페닐알라닌의 상승으로 본원으로 전원되어 양성 고페닐알라닌혈증으로 진단된 10명의 환자를 대상으로 시행되었다. 조사항목으로는 환자들의 특징 및 임상 양상과 직접 염기서열 분석을 통한 PAH 유전자 돌연변이 형태 분석을 포함하였다. 결과: 10명의 환자들 중 2명은 고페닐알라닌혈증으로 진단된 자녀의 부모였으며, 환자들 중 특이 과거력이나 임상 증상이 있는 경우는 없었다. 혈장 아미노산 분석에서는 페닐알라닌이 1.2 mg/dL부터 4.2 mg/dL까지의 범위로 측정되었다. BH4 부하검사에서는 모든 환자들이 BH4에 무반응이었다. 확진 검사로 시행한 페닐알라닌수산화효소 유전자 분석에서는, 총 20개의 대립유전자들 중에서 11개의 각기 다른 대립유전자형을 확인할 수 있었는데, 이 중 제일 흔한 대립유전자는 R53H (c.158G>A)였다. 뿐만 아니라, 직접염기서열분석 상에서 2가지의 새로운 돌연변이 형태인 V423A (c.1268T>C)와 V51A (c.152T>C)를 발견하였다. 본 연구에 포함된 환자들은 약물을 복용하거나 식사 조절을 하지 않았음에도, 지속적인 외래 추적 관찰 결과 모든 환자들의 페닐알라닌 치는 6 mg/dL 이하로 유지되었으며, 정상적인 신경 인지발달을 하고 있는 것을 확인하였다. 결론: 이 연구는 양성 고페닐알라닌혈증 환자에 대한 분석이며 국내에서 처음으로 시행한 것이다. 모든 양성 고페닐알라닌혈증 환자들은 지속적인 치료 없이도 혈장 페닐알라닌 치를 6 mg/dL 이하로 유지하였고 정상적인 신경 인지발달을 하였다. 그러므로, 돌연변이 검사를 시행하여 양성 고페닐알라닌혈증 환자를 페닐케톤뇨증과 감별함으로써 불필요한 식사 요법이나 약물 투여를 줄여 환자의 삶의 질을 높일 수 있다.

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